ICS65.020.30 B40DB14 山西省地方标准 绒山羊人工授精操作技术规 DB14/T689- 2012 2022Äê10ÔÂ14ÈÕÈ·ÈÏÓÐЧ 程 2012-12-20发布 2013-01-20实施 山西省质量技术监督局发布DB14/T689—2012 I目  次 前言.................................................................................II 1范围...............................................................................1 2规范性引用文件.....................................................................1 3术语和定义.........................................................................1 4采精...............................................................................1 5精液品质检查.......................................................................2 6精液的稀释、分装、贮存和运输.......................................................3 7输精...............................................................................4 附录A（规范性附录）输精器材的清洗与消毒.............................................5 附录B（规范性附录）种公羊精液品质检查登记表.........................................6 附录C（资料性附录）精液稀释液参考配方...............................................7 附录D（资料性附录）输精情况登记表...................................................8DB14/T689—2012 II前  言 本标准按GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山西省农业厅提出并归口。 本标准起草单位：山西省牧草工作站、山西农业大学、晋岚绒山羊育种中心。 本标准主要起草人：姚继广、任有蛇、郑永田、赫磊、王慧生、刘旗、张建新、杜海梅。DB14/T689—2012 1绒山羊人工授精操作技术规程 1范围 本标准规定了绒山羊人工授精的采精，精液品质检查，精液的稀释、分装、贮存、运输和输精。 本标准适用于山西省内绒山羊的人工授精。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T636猪人工授精技术规程 NY/T1335牛人工授精技术规程 DB14/T522晋岚绒山羊 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 适繁母羊 身体健康，繁殖机能正常，年龄在1~6岁的雌性羊。 3.2 发情鉴定 用一定方法判断母羊是否发情及发情所处阶段的过程。 3.3 人工授精 利用器械以人工方法采集公羊的精液，经特定处理后，再输入到发情母羊生殖道特定部位使其妊娠 的动物繁殖技术。 4采精 4.1公羊的调教 4.1.1用于采精的种公羊的选择和鉴定按DB14/T522的规定执行，公羊的调教从1.0～1.5岁开始。 4.1.2将预调教的种公羊放入发情母羊群中，让其自然交配几次，以激发性欲，建立条件反射后赶出。 也可在用调教好的公羊采精时，让其旁观。然后训练其用假阴道采精，使其逐步克服胆小怕人的行为习 惯，逐渐适应假阴道采精。每日早、晚按摩睾丸各1次，每次10min～15min。DB14/T689—2012 24.2采精前准备 4.2.1器械的准备 采集的器械包括干燥箱、恒温箱、显微镜、盖玻片、载玻片、擦镜纸、血球计数器、pH试纸、长柄 镊子、酒精灯、滤纸、假阴道组件（外壳、内胎、胶塞、集精瓶等）、凡士林、量筒、玻璃棒、温度计、 采精架、开膣器、输精器、移液枪或注射器、手电筒、白瓷盘、脸盆、毛巾、肥皂等。器械的洗涤与消 毒按照NY/T1335和附录A的规定执行。 4.2.2精液稀释液配制 精液稀释液配制方法可参照附录C。使用前置于水浴锅内预热至37℃。 4.2.3假阴道的准备 4.2.3.1洗涤。假阴道的主要部件如内胎和集精杯等，在使用前一天以1%～2%的碳酸氢钠温液彻底洗 涤，也可配合使用肥皂脱去油脂，再用清水冲洗3～4遍，然后晾干。 4.2.3.2安装内胎。采精的当天，将内胎的光滑面向里粗糙面向外，置于外壳内拉直，再将内胎两端 外翻在外壳的两端，用胶圈加以固定，防止滑脱。 4.2.3.3消毒。以长柄镊夹取75%酒精浸湿的纱布块，全面涂擦内胎进行消毒。待消毒彻底后，再安 装集精杯。集精杯可用蒸煮或酒精消毒。 4.2.3.4冲洗。用灭菌的稀释液对灭菌后的内胎和集精杯冲洗2～3次，洗掉酒精或蒸馏水。 4.2.3.5注水。由假阴道外壳的注水孔注入假阴道夹层腔体积2/3左右的热水，水温40℃～45℃，年 轻羊可低1℃～2℃。 4.2.3.6安装集精杯。注水后，将消毒冲洗后的集精杯插入假阴道一端。在集精杯夹层中灌入40℃～ 45℃的温水，使杯内保持38℃左右。 4.2.3.7涂润滑剂。用灭菌的玻璃棒蘸取灭菌的润滑剂涂至假阴道前1/2处，滑润其内腔。 4.2.3.8调压。根据采精个体的不同，从胶塞的进气孔注入一定量的空气以维持假阴道内腔适宜的压 力，刺激阴茎产生射精反射。 4.2.3.9测温。临采精时，用灭菌的温度计插入假阴道内测试其温度，温度以38℃～40℃为宜。 4.2.4台羊的准备 选择健康、体格大小与公羊相近的发情母羊固定在采精架上做为台羊。采精前，对台羊后驱进行清 洗消毒处理。 4.3采精操作 采精要做到定点、定时、定人。采精时，助手将种公羊引到台羊前。采精者蹲在台羊右后方，右手 横握假阴道，胶塞向下，前低后高，与母羊骨盆的水平线保持35°～40°。当公羊爬跨、伸出阴茎时， 迅速用左手托住包皮，将阴茎导入假阴道内。当公羊猛力前冲，并弓腰后，则完成射精。随公羊从台羊 身上滑下时，顺势将假阴道向下向后移动，保持集精瓶端向下，并立即倒转竖立，然后打开胶塞放气， 取下集精瓶，并盖上盖子送操作室检查。 4.4采精频率 成年种公羊每天可采精1～2次，连续采3d～5d，休息1d。 5精液品质检查DB14/T689—2012 35.1采精量 采精后，用移液枪或注射器将精液移至预热的试管，并计量采精量。绒山羊的射精量一般在0.5ml～ 1.5ml。 5.2外观检查 正常颜色为乳白色，无脓无腐败气味，肉眼可见云雾状。带有腐败臭味，颜色为红色、黄色、绿色 的精液应废弃。 5.3精子活力 检查活力前，将载玻片和盖玻片在37℃的恒温板上预热。取1滴待检查精液，稀释后置于已预热的 载玻片上，上覆盖玻片，在光学显微镜下放大200～400倍，估测精液样品中前进运动精子所占百分率。 采用0～1.0的10级评分标准。100%直线前进运动者为1.0分，90%直线前进运动者为0.9分，以此类推。 鲜精活力不低于0.7。 5.4精子密度 5.4.1常规检查时用估测法。即在显微镜10×10倍视野下判断精子的稠密和稀疏程度。精子密度可分 为“密”、“中”、“稀”三级。 密：整个视野内充满精子几乎看不到空隙，很难见到单个精子活动。 中：视野内精子之间有相当于一个精子长度的明显空隙，可见单个精子的活动。 稀：视野内精子之间的空隙很大，甚至可查清所有精子数。 5.4.2定期检查时，用血细胞计数板准确测定每毫升精液中的精子数。即在显微镜下统计出计算室的 四角及中央共5个中方格（80个小方格）内的精子数，再根据稀释倍数计算出每毫升精液中的精子数。 5.5填表 把检查结果填入精液品质检查登记表（见附录B）。 6精液的稀释、分装、贮存和运输 6.1稀释液的配制 稀释液的配制按照NY/T636的规定进行。稀释液配方参见附录C。牛奶稀释液、卵黄稀释液在4℃的 恒温箱中保存时间不应超过24h。 6.2精液的稀释 6.2.1精液稀释的倍数 精液一般稀释2～4倍。精子密度在25亿以上的精液可稀释10～20倍。10倍以上高倍稀释时，应分两 步进行，先加入稀释液总量的1/3～1/2进行低倍稀释，稍等片刻后再将剩余的稀释液全部加入稀释。 6.2.2精液稀释的步骤 精液稀释的步骤按照NY/T636进行。稀释完毕静置5min后，做精子活力检查。稀释后活力不低于稀 释前，方可进行分装与保存。 6.3精液分装DB14/T689—2012 4用移液枪将精液分装到1.5ml～5ml的离心管中，并标明种公羊耳号、生产日期、生产单位等信息。 6.4精液贮存 6.4.1常温保存 放置于操作室消毒的容器内，15℃～25℃条件下避光保存。可保存48h，最好是当天用完。 6.4.2低温保存 温度为0℃～5℃。应缓慢降温，可将分装好的精液用橡皮筋绑定在温度计上，放入盛有37℃敞口容 器中，再将该容器放