ICS 70.100.70 Y 42 DB37 山 东 省 地 方 标 准 DB37/T 3027—2017 唇用化妆品中对位红的测定 高效液相色谱法 Determination of dye para red in lipstick by high performance liquid chromatography method 2017-10-25 发布 山东省质量技术监督局 2017-11-25 实施 发 布 DB37/T 3027—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省质量技术监督局提出。 本标准由山东省化工标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、山东省食品药品检验研究院。 本标准主要起草人：霍艳敏、周莉莉、于文江、公丕学、郑红、卢兰香、别梅、张艳侠。 I DB37/T 3027—2017 唇用化妆品中对位红的测定高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了高效液相色谱测定唇用化妆品中对位红的方法。 本标准适用于唇膏、口红、唇彩等唇用化妆品中对位红的测定。 本标准方法检出限：0.5 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样用乙腈超声提取，提取液经冷冻离心、过滤，用高效液相色谱分离，紫外检测器检测，以保留 时间定性，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水，其它试剂和材料主要包括： a) 乙腈：色谱纯； b) 三氯甲烷； c) 无水硫酸钠，650 ℃灼烧 2 小时； d) 标准品：对位红（CAS：6410-10-2），纯度≥95.5 %； e) 标准储备溶液：准确称取 25 mg(精确至 0.1 mg) 对位红标准品于 25.00 mL 容量瓶中，加约 1 mL 三氯甲烷，待溶解后乙腈定容，作为标准储备溶液，浓度为 1 mg/mL，此溶液于 4 ℃冰箱 中储存，可使用 3 个月； f) 标准工作溶液：将标准储备液用乙腈稀释成 0.1 μg/mL 、1.0 μg/mL 、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、50.0 μg/mL、100.0 μg/mL 的系列标准溶液； g) 微孔滤膜：有机相，孔径 0.45 μm。 5 仪器和设备 仪器和设备主要包括： a) 高效液相色谱仪：具二极管阵列检测器或紫外检测器； b) 天平：感量 0.01 g、0.1 mg； c) 涡旋混合器； 1 DB37/T 3027—2017 d) e) f) 超声波清洗器； 冷冻离心机：转速不低于 10000 r/min； 马弗炉：控温精度 650 ℃±10 ℃。 6 分析步骤 6.1 试样的制备 唇膏、口红等膏状、固体样品，将其捣碎混匀，唇彩等粘稠样品搅匀。 6.2 试样的处理 准确称取试样1 g（精确至0.01 g）于研钵中，加入10 g经650 ℃灼烧过的无水硫酸钠，在研钵中 研磨均匀，全部转移至50 mL具塞离心管中，加入15 mL乙腈，旋紧管盖，在涡旋混合器上涡旋混匀2 min， 用超声波清洗器超声提取20 min，再在10000 r/min、5 ℃时离心5 min，取上层清液过微孔滤膜（4.7）， 供高效液相色谱分析。 6.3 液相色谱参考条件 色谱参考条件： a) 色谱柱： C18 柱，250×4.6 mm(i,d)，5 μm，或性能相当者； b) 流动相：乙腈+水=85+15； c) 流速：1.0 mL/min； d) 柱温：35 ℃； e) 进样量：10 μL； f) 检测波长：紫外检测器检测波长设为 485 nm。标样谱图见附录 A。 6.4 测定 将标准工作溶液（4.6）按照浓度由低到高的顺序进样测定，以该组分峰面积对其浓度绘制标准曲 线。试样经测定，以保留时间定性，外标法定量。 6.5 结果计算 6.5.1 试样中被测组分的含量按式（1）计算： w= C ×V ....................................... (1) m 式中： w ——试样中该组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； C ——由标准曲线得到的试样溶液中该组分的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V ——试样溶液的体积，单位为毫升（mL）； m ——试样质量，单位为克（g）。 6.5.2 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字。 7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。 2 DB37/T 3027—2017 AA 附 录 A （资料性附录） 对位红标样的色谱图 min 图A.1 对位红标样的色谱图 _________________________________ 3