ICS 65.020 B 01 山 DB37 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 3399—2018 花生品种（系）抗茎腐病田间鉴定技术规范 Rule for Field Resistance Evaluation of Peanut Varieties (Lines) against Stem Rot 2018 - 08 - 17 发布 山东省质量技术监督局 2018 - 09 - 17 实施 发 布 DB37/T 3399—2018 前  言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规划起草。 本标准由山东省农业厅提出。 本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省农业科学院植物保护研究所。 本标准主要起草人：李长松、齐军山、祁凯、张博、张悦丽、马立国。 I DB37/T 3399—2018 花生品种（系）抗茎腐病田间鉴定技术规范 1 范围 本规范规定了花生品种（系）茎腐病抗性鉴定接种体的制备、田间抗性鉴定和抗性评价的技术要求。 本规范适用于山东省花生品种（系）抗茎腐病的田间鉴定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 接种体 通过人工制备能够侵染寄主并引起相应病害的病原体。 2.2 抗性评价 根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病虫害反应程度和抵抗水平的定性描述。 3 物接种体的制备 500 g破碎的花生壳加水润湿，拌入50 g玉米粉，分装入直径20 cm的培养皿内，每皿大约占容积1/3～ 1/2，121 ℃高压灭菌2 h。将供试花生茎腐病（病害症状和病菌形态特征见附录A）菌株接种到花生壳 培养基上，28 ℃培养5 d，用于接种。 4 田间抗性鉴定 4.1 鉴定圃 鉴定圃应设置在人工营造的病圃或病害常发区，具备利于发病的环境条件。病圃内每个品种（系） 每小区播种100粒。鉴定品种随机排列，起垄覆膜种植，垄距84 cm，垄上种两行花生，垄上小行距32 cm， 垄间大行距52 cm。每穴2粒，大花生穴距16 cm，小花生穴距14 cm，每12个鉴定品种设1个高感对照品 种。若鉴定品种低于12个，设1个高感对照品种。每品种重复3次。 4.2 播种时间 鉴定圃播种时间与大田生产播种时间相同。 4.3 接种方法 1 DB37/T 3399—2018 于花生主茎5片～6片叶人工接种。傍晚或雨后，按5 g/株的用量把接种体均匀撒施到花生茎基部的 表面。 4.4 接种前后的田间管理 若遇持续干旱，接种前3 d～5 d先进行田间浇灌，接种后及时浇灌，以满足发病条件。 4.5 调查方法 接种后15 d和30 d调查病情，以最后结果作为品种抗性评价的主要依据。以花生整株为单位，每小 区调查50株～100株，按如下标准记载病级。 5 抗性评价 5.1 病情分级标准 5.1.1 5.1.2 5.1.3 5.1.4 5.1.5 0 级：枝叶生长旺盛，无症状； 1 级：萎蔫枝叶不到整株的 25 %，茎部出现水浸状小病斑； 2 级：25.1 %～50 %的枝叶萎蔫，茎部形成黄褐色水渍状不规划病斑； 3 级：50.1 %以上的枝叶萎蔫，茎部出现深褐色坏死斑； 4 级：整株枯死，茎部组织黑色，腐烂，病部出现子实体。 5.2 病情指数计算公式 病情指数  (各级病株数  病级代表数值 ) / (调查总株数  最高级的代表数值 )  100 5.3 抗性类别 依据鉴定材料3次重复的病情指数平均值确定其抗性水平，划分标准见参见表1。 表 1 花生茎腐病抗性的评价标准 病情指数 抗性水平 抗性级别 病情指数=0 免疫 0 0＜病情指数≤10 高抗 1 10＜病情指数≤30 中抗 2 30＜病情指数≤60 中感 3 病情指数＞60 高感 4 6 鉴定记载表格 鉴定记载表见附录B。 2 DB37/T 3399—2018 AA 附 录 A （资料性附录） 花生茎腐病 A.1 花生茎腐病症状 病菌从子叶或幼根侵入植株，在根颈部产生黄褐色水渍状病斑，后变黑褐色，叶片黄褐色，病斑自 根颈部向纵横方向扩展，致使茎基组织腐烂，地上部萎蔫枯死。当环境潮湿时，病部产生分生孢子器(即 黑色小突起)，病部表皮易剥落，纤维组织外露。干燥时病部呈褐色干腐，茎内中空。成株期感病后， 约10 d～30 d 全株枯死，发病部位多在茎基部贴地面，有时也出现主茎和侧枝分期枯死现象。 A.2 病原菌学名 棉色二孢（Diplodia gossypina）(异名为Lasiodiplodia theobromae、Diplodia natalensiss、 Lasiodip-lodia triflorae 和 Botryodiplodia theobromae)，系半知菌亚门球壳孢目色二孢属。 A.3 病原菌形态 A.3.1 在25 ℃恒温培养箱中，生长在PDA培养基上菌落呈圆形或近圆形，质地疏松，菌丝絮状、浅白 色，菌丝沿平面辐射状生长。48 h长满培养皿后有旺盛的气生菌丝生长，在培养皿中央聚集成絮状，后 随菌丝黑色素产生，菌落变为灰黑色，培养基背面呈黑色。10 d后，开始产生暗灰色、小蘑菇状、近圆 形的菌丝团，直径3 mm～5 mm。20 d后，菌丝团顶端产生黑色子座。分生孢子座炭黑色，圆柱形，直径 1 mm～3 mm。 A.3.2 分生孢子器分散或集中于子座内，球形或近球形，直径200 μm～300 μm，高195 μm～360 μm，暗褐色，炭质，壁厚，具孔口，埋生于寄主皮层中，孢子器孔口乳状突起，产孢细胞不分枝，少 见分隔，形状多样，呈倒棍棒状或圆筒形， 大小8.5 μm～10.3 μm×2.9 μm～3.6 μm。全壁芽生环 痕式产孢，分生孢子单个顶生于产孢细胞上，椭圆形、长圆形或卵圆形，基部平截，端部钝圆，单胞， 初无色，双层壁，有时中央1个～2个油球，大小22.75 μm～30.25 μm×12.5 μm～15.0 μm，平均2 6.03 μm×13.28 μm。后变茶褐色至暗褐色，中央有一隔膜，壁厚，椭圆形，长圆形或卵圆形，表面 光滑，少数有纵纹，大小20.86 μm～31.36 μm×12.29 μm～15.89 μm，平均25.9 μm×13.71 μm。 3 DB37/T 3399—2018 BB 附 录 B （资料性附录） 花生抗茎腐病鉴定结果记载表 表 B.1 花生抗茎腐病鉴定结果记载表 病情级别 编号 品种（系） 来源 重复 0级 1级 2级 3级 4级 病情 平均 抗性 指数 病指 水平 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 注：1 播种日期： 2 接种日期： 3 接种生育期： 4 接种体病原物编号： 5 调查日期： _________________________________ 4