ICS 65.020.20 B 31 DB61 陕 西 省 地 方 标 准 DB 61/T 1014—2016 小麦品种抗白粉病鉴定技术规范 Rule for resistance evaluation of wheat powdery mildew 2016 - 02 - 24 发布 陕西省质量技术监督局 2016 - 05 - 01 实施 发 布 DB61/T 1014—2016 前 言 本标准根据 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由西北农林科技大学提出。 本标准由陕西省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：西北农林科技大学植保学院、杨凌现代农业产业标准化研究推广中心。 本标准主要起草人：王保通、李强、姚撑民、康振生、周永明。 本标准由西北农林科技大学负责解释。 本标准首次发布。 联系信息如下： 单位： 西北农林科技大学植保学院 电话： 029-87092601 地址： 陕西省杨凌示范区邰城路 3 号 邮编： 712100 II DB61/T 1014—2016 小麦品种抗白粉病鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了小麦品种抗白粉病的鉴定技术的术语和定义、病原物制备、抗性评价及鉴定报告等内 容。 本标准适用于小麦生产品种、农家品种、高代品系及小麦近缘种的白粉病抗性鉴定和抗性评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 613 小麦白粉病测报调查规范 NY/T 967 农作物品种审定规范 小麦 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 小麦品种 Wheat varieties 小麦品种指的是小麦生产品种、新育成品系、高代品系、农家品种和各类抗源材料等，根据需要可 以扩展至小麦的近缘种属。 3.2 反应型(侵染型) Infection type 根据寄主植物过敏性坏死反应有无和反应程度来划分的病斑类型。 4 病原物制备 4.1 病原物菌种库建立 采自陕西省小麦产区不同生态区的小麦白粉病病株，经活体分离、纯化、毒性鉴定后，按毒性菌株 毒性谱建立菌种库。 4.2 病原物选择 接种体一般为陕西省关中灌区、渭北旱塬和陕南等生态区内的小麦白粉病菌毒性谱较宽和毒性较强 的混合接种体，或用特定生态区的小麦白粉病菌优势毒性菌株作为接种体，也可以根据委托单位要求从 菌种库中选择。 1 DB61/T 1014—2016 4.3 病原物 物鉴定和制备 备 从发病 病植株叶片的典型病斑上进 进行分离纯化 化，经形态学 学鉴定确认为 为Blumeria grraminis f.sp. tritici， t 单 孢子堆分离 离，经一套已知基因载体品种致病性测 测定后，进一 一步在感病品 品种陕225或京双16上扩繁 繁，保存 备用。 5 抗病性鉴 鉴定 5.1 苗期鉴 鉴定 5.1.1 盆栽 栽法鉴定 在温室 室中进行，温 温度控制在177℃±1℃之间，自然光照。根据鉴定小麦品种（系 系）的数量将 将待测的 品种和感病 病对照（可用陕225或京双 双16）播种于 于直径10cm小 小花盆或50穴 穴的育苗穴盘 盘中，每品种 种播种1盆 （穴），5粒 粒～8粒种子。播种后加盖 盖透明塑料罩 罩放在温室中 中培养。待小 小麦第一片叶 叶完全展开后，用抖接 法或扫抹法 法充分接种白粉菌分生孢子 子。接种后加 加盖透明塑料 料罩放在温室 室培养，7d~10d待感病对照 照品种充 分发病后，按本标准5.33规定的方法 法记载第一片叶的反应型。 5.1.2 体叶段法鉴定 定 离体 当温室 室培养的待测品种第一叶完 完全展开时， ，在超净台上 上选取麦苗第 第一叶，剪3cm长度叶段 段, 每品种 剪3个叶片，整齐排列在 在直径10 cm培 培养皿中的水 水琼脂培养基 基上（培养基 基含苯骈咪唑 唑60 μg/ml）。然后用 繁殖好的孢 孢子粉在接种 种筒内对上述 述离体叶段进行接种，接种后盖上培养 养皿盖，置于 于17℃±1℃的 的光照培 养箱中培养 养（16 h光照，8 h黑暗）7dd～10d后，按 按本标准5.3规 规定的方法调 调查、记载品 品种（系）的反 反应型。 5.2 成株期 期鉴定 5.2.1 鉴定 定圃设置 成株期 期抗性鉴定圃设置在小麦白粉菌人工诱 诱发鉴定圃或 或病害常发区 区域自然诱发 发鉴定圃。品种 种种植采 用开畦条播 播、等行距配置方式(如图 图1所示)。畦埂 埂宽50 cm，畦宽250 cm m，畦长视地形、地势而定 定；距畦 埂125 cm处 处顺畦种1行诱 诱发行，品种 种可选用陕2225或京双16，在诱发行两 两侧20 cm横向种植鉴定品 品种，行 长100 cm，行距33 cm，每行播种1个 个品种（约5克～6克种子 子），每隔200行种植一行 行感病对照品种 种，重复 1~3次。顺序 序排列、编号 号，鉴定圃四 四周设100 cm m宽的保护区 区。 田间鉴 鉴定病圃的栽 栽培条件应均匀 匀一致。田间 间管理上要多 多灌水，多施 施氮肥，创造 造有利于发病 病的环境。 注：实线 线表示诱发行和 和对照品种；虚 虚线表示鉴定品 品种。 图1 5.2.2 2 接种 种时期和方法 法 鉴定 定圃田间配置 置示意图 DB61/T 1014—2016 5.2.2.1 接种时期一般在小麦拔节后期进行。 5.2.2.2 接种前，根据鉴定需要选择小麦白粉菌菌株，菌种在感病品种幼苗上繁殖。当感病品种充分 发病后，采用扫抹法把病菌孢子接于病圃的诱发行上，每隔 500 cm 接 100 cm 诱发行。为确保发病充分 需在 2 天～3 天后于不同接种点再接种一次。接种前(5 天～7 天)后田间需灌溉一次，确保田间湿度。 5.2.3 调查时期和方法 小麦扬花期和灌浆期各调查一次，根据本标准5.3规定的方法每行随机选取10株左右进行调查并记 载病情级别（反应型或严重度）。 5.2.4 最高病情级别确认 5.2.4.1 每个品种取 2 次调查结果中的最大值。如果每个重复最高病情级别植株只有 1 株（叶），需 根据外部特征确定是否为杂株。如不是杂株则以该株小麦发病级别为准；如是杂株，应以其它植株的反 应型或严重度为准。 5.2.4.2 若一个鉴定群体中出现明显的抗、感类型，应在调查表中注明“抗性分离”，用“/”表示。 5.3 病情级别划分标准 5.3.1 反应型分级标准 反应型分级标准见表1，该标准适合苗期和成株期鉴定用。 表1 白粉病反应型分级标准 反应型级别 5.3.2 症 状 0 级 植株无病斑 0; 级 坏死反应，叶片有枯死斑 1级 病斑小于 1mm，菌丝稀薄透绿 2级 病斑小于 1mm，不透绿 3级 病斑大于 1mm，，病斑较多，菌丝层较厚，不连片 4级 病斑大于 1mm，，病斑多，菌丝层厚且连片 成株期严重度划分标准 将植株由上而下划分9个相等的区段，根据各区段病位高度及叶片严重度二个因素综合定级，分级 标准见表2，分级标准示意图见图2。 表2 级别 成株期严重度分级标准 症 状 0级 全株无病 1级 第一段叶片有少数病斑（病斑占叶面积 2％以下） 2级 第二段叶片有少数病斑（第一段叶片轻度发病） 3级 第三段叶片轻度发病，第二段叶片中度发病，第一段叶片严重发病 4级 第四段叶片轻度发病，第三段叶片以下中到严重发病 3 DB61/T 1014—2016 表 2 成株期严 严重度分级标 标准（续） 级别 症 状 5级 第五段叶 叶片轻度发病，第四段叶片以 以下中到严重发 发病 6级 第六段叶 叶片轻度发病，第五段叶片以 以下中到严重发 发病 7级 第七段叶 叶片轻度发病，第六段叶片以 以下中到严重发 发病 8级 第八段叶 叶片轻度发病，第七段叶片以 以下中到严重发 发病 9级 整体叶片 片严重发病，穗 穗部不同程度发 发病 小麦 麦白粉病 0 级-9 级 级严重度 度分级标准示 示意图 图2 价 抗性评价 6 6.1 抗性类 类别划分 6.1.1 按反 反应型划分抗 抗性分级 按反应 应型划分标准见表3。 表3 最高反应型级别 6.1.2 4 按反 反应型划分抗 抗性分级 抗性类别 缩写 类别 0级 I 免疫 0;级 HR 高抗 1级 R 抗 2级 MR 中抗 3级 S 感 4级 HS 高感 严重度划分抗 抗性类别 按严 DB61/T 1014—2016 按严重度划分抗性类别见表4。 表4 严重度级别 6.1.3 按严重度划分抗性类别 抗性类别 缩写 类别 0级 I 免疫 1-2 级 HR 高抗 3-4 级 MR 中抗 5-6 级 MS 中感 7-8 级 HS 高感 9级 ES 极感 抗病类别记载 抗病类别记载可参考附录A。 6.2 有效性判别 感病对照品种的抗性反应型级别达到3~4级或严重度级别达到7～9级时，该批次鉴定有效。 6.3 抗性评价 6.3.1 对于达到免疫-高抗的品种，需在第二年做重复鉴定。当两年抗性类别不一致时，应以级别重的 年份为最终鉴定结论。 6.3.2 人工接种鉴定，同一鉴定品种的抗性级别如果两年抗性级别相差 1 个等级，取抗性级数值较大 的鉴定结果；如果两年抗性级别相差 2 个级别以上（包括 2 个级别）的，则需要做第三次抗性鉴定，取 位于中间的抗性级别，重新划分抗性类别。 6.3.3 同一鉴定品种的抗性级别一年在 5 级以上，另一年在 5 级以下的, 则需要做第三次抗性鉴定， 按其中两年鉴定级别相同或相似抗性级别划分抗性类别。 7 鉴定报告 7.1 人工接种鉴定一般以鉴定品种对特定生态区内不同毒性菌株的混合接种体或特定毒性菌株（群） 的抗性反应出具鉴定报告。鉴定报告一般以单个品种单独出具。如集中批量送样的，也可以多个品种出 一份报告。鉴定报告格式见附录 B。 7.2 鉴定报告应盖鉴定单位公章，还应有鉴定人和复核人签字。 5 DB61/T 1014—2016 A A 附 录 A （资料性附录） 鉴定记载表 A.1 小麦品种苗期抗白粉病鉴定记载表 表A.1 小麦品种苗期抗白粉病鉴定记载表 鉴定方法：□盆栽法鉴定 □离体叶段法鉴定 播种时间： 接种时间: 品种 品种 品种 编号 名称 来源 鉴定人： 6 年 鉴定地点： 调查时间： 接种菌株： 最高反 各级反应型级别株数 应型级 0级 月 日