ICS 65.020 B 61 DB 37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 3752—2019 草莓苗木繁育技术规程 Technical regulotions of seedlings breeding for strawberry 2019 - 12 - 05 发布 山东省市场监督管理局 2020 - 01 - 05 实施 发 布 DB 37/T 3752—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。 本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东农业工程学院、龙口市农业局、济南普朗特生物科技有限公司。 本标准主要起草人：秦旭、范崇慧、崔刚、王猛、刘文宝、段曦、束靖、徐波、鲁萌。 I DB 37/T 3752—2019 草莓苗木繁育技术规程 1 范围 本标准规定了草莓苗木繁育的品种与植株选择、脱毒苗繁育、生产用苗繁育和生产档案等。 本标准适用于山东省内草莓苗木繁育。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 NY/T 5010 无公害农产品 种植业产地环境条件 NY/T 5105 无公害食品 草莓生产技术规程 3 品种与植株选择 3.1 品种选择 选择抗性强、品质优良草莓品种。促成栽培选择休眠短的品种。 3.2 植株选择 选择健康草莓植株，种苗质量标准为有三片以上新叶，根须发达，无病虫害。 4 脱毒苗繁育 4.1 繁育流程 包括培养室培养和温室驯化移栽两个阶段。 4.2 培养室培养 4.2.1 培养室设置 4.2.1.1 配药室 配备冰箱、实验台、天平、恒温培养箱、加热器、pH计、蒸馏水制备器、三角瓶、培养皿、量筒、 烧杯、容量瓶等仪器设备。 4.2.1.2 洗涤室 1 DB 37/T 3752—2019 配备洗瓶池、洗瓶机、纯水发生器等。 4.2.1.3 灭菌室 配备高压灭菌锅等设备。 4.2.1.4 更衣室 用于操作人员更衣，放置无菌操作服。 4.2.1.5 冷凝室 用于存储培养基。 4.2.1.6 接种室 用于操作人员接种操作，放置超净工作台、双目显微镜、臭氧发生器等灭菌仪器、镊子、剪刀、接 种刀设备。 4.2.1.7 培养室 用于组培苗培养，放置多层培养架，室内保持在20 ℃～25 ℃，空气相对湿度保持在50 %～60 %， 采用日光灯、LED灯等补充光照，培养室内每日光照12 h～14 h，光照强度2 000 lx～3 000 lx。 4.2.2 热处理 将选好草莓植株放入39 ℃±1 ℃恒温培养箱或人工气候箱内进行培养，光照模拟自然光，待长出 匍匐茎作为外植体。 4.2.3 茎尖诱导培养 4.2.3.1 外植体清洗 洗涤剂清洗2 min～3 min，再用吐温清洗2 min～3 min，清洗过程中不停摇晃，以便清洗充分；清 洗过后用流水冲洗30 min～40 min。 4.2.3.2 外植体消毒 在超净工作台上将外植体置于无菌瓶中；用75 %酒精浸泡30 s，过程中不断摇晃，消毒均匀彻底； 无菌水冲洗4～5遍；用1 ‰的HgCL浸泡3 min，过程中不断摇晃，消毒均匀彻底；无菌水冲洗4～5遍。 4.2.3.3 培养基制作 基本培养基为MS培养基。将加热溶化的培养基分装在100 ml三角瓶或其它培养容器中，在121 ℃高 -1 -1 压灭菌20分钟。茎尖分化培养基和增殖继代培养基添加6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.2 mg·L ～0.5 mg·L ， -1 -1 -1 赤霉素（GA3）0.1 mg·L ～0.5 mg·L ，吲哚丁酸（IBA）0～0.02 mg·L ；生根培养基附加6-苄氨基 -1 -1 -1 -1 腺嘌呤（6-BA）0.1 mg·L ～0.2 mg·L ，吲哚丁酸（IBA）0.02 mg·L ～0.1 mg·L 。 4.2.3.4 茎尖剥离 在双目解剖镜下，用解剖针将0.3 mm～0.5 mm的生长点完整取下，然后将其接入配制好的培养基内 培养。 4.2.3.5 茎尖培养 2 DB 37/T 3752—2019 接种后的玻璃瓶放在培养室中培养。环境条件同培养室要求。培养大约2个月，草莓茎尖可长成完 整植株，此后进行增殖继代培养。 4.2.4 病毒检测 组培苗要进行病毒检测，每个组培无性系抽取1 %的样品进行草莓斑驳病毒（SMoV）、草莓轻型黄 边病毒（SMYEV）、草莓镶脉病毒（SVBV）及草莓皱缩病毒（SCrV）检测，检测采用酶联免疫法（ELISA）、 PCR、分子标记法进行。检测无病毒后继续增殖继代培养。 4.2.5 增殖继代培养 培养基为MS培养基+6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.05 mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.01 mg/L+糖25 g/L。在 超净工作台上用镊子、剪刀将其分隔成3～4株在一起的小芽丛，再放入新培养基瓶中培养，每瓶3～4 个芽丛，每代周期大约30 d～40 d，最好不超过两代，继代培养时间不应超过1年。 4.2.6 生根培养 培养基为1/2MS培养基+吲哚丁酸（IBA）0.2 mg/L+糖20 g/L。当瓶内苗增殖到需要数量时，将芽丛 分成单株，每株应达到2～3片叶，放置在生根培养基的瓶内生根。4～5周后将生根的草莓苗从瓶内移栽 到温室中。 4.3 炼苗移栽—原原种苗 4.3.1 温室条件 用于瓶苗移栽的温室应设有防虫网，温度控制在10 ℃～25 ℃。 4.3.2 脱毒苗出瓶 用镊子夹住草莓苗从培养瓶中轻轻拉出，在水中清洗附带在根系的琼脂，放入盛有水的容器内防萎 缩，然后拿到温室。 4.3.3 脱毒苗驯化 4.3.3.1 移栽 瓶苗首先移栽至5 cm深穴盘，移栽基质可选用椰糠（EC值为1）、草炭等，移栽时根须全部进入基 质，生长点露出基质表面。移栽后浇透水，使根系与基质紧密结合。 4.3.3.2 移栽后管理 移栽后，保持叶片湿润、基质潮湿即可，每周喷一次杀菌剂（见附录A）。30天左右根系盘满，移 栽至11 cm深穴盘，基质要求同上，每2 d浇一遍透水，每周喷一次叶面肥及杀菌剂。再过30天左右根系 盘满，移栽至16 cm×16 cm营养钵，移栽基质为水洗后的混合基质（EC值为1.5），每5 d浇一遍透水， 每周喷一次叶面肥及杀菌剂（见附录A）。 4.4 原种苗培育 将原原种苗生长出的匍匐茎进行压苗培育，在良好隔离条件下生产出符合质量标准的草莓原种苗。 种苗质量标准有3片以上完全展开的新叶，根须发达。 5 生产用苗繁育 3 DB 37/T 3752—2019 5.1 产地环境 建立专用繁苗圃；选择地势平坦、土层深厚、排灌方便、通透性好、微酸性土壤、富含有机质、三 年以上没有栽植过草莓的地块，忌马铃薯、生姜、茄果类等蔬菜茬地。环境条件应符合NY/T 5105的规 定。 5.2 整地做垄 2 定植前7 d整地，深翻两遍，深度为30 cm，每667 m 施入腐熟农家肥5 000 kg、磷酸二铵15 kg、 硫酸钾10 kg。起大垄，垄高40 cm，垄宽120 cm～150 cm，根据育苗时间长短设定。垄沟呈“V”字型。 起垄后，垄沟内浇透水备用。肥料的使用应符合NY/T 496和NY/T 5105的规定。 5.3 定植原种苗 5.3.1 定植时期 根据山东省气候条件，草莓原种苗定植在4月上中、旬进行。 5.3.2 定植 4月上旬，将原种苗定植在垄沟内，每垄沟定植两行，行距为20 cm，株距20 cm，定植要求“深不 埋心，浅不露根”。定植后，及时顺沟浇定植水。 5.4 田间管理 5.4.1 肥水管理 宜使用肥水一体化技术。土壤相对湿度保持在60 %～70 %。6月～7月为草莓苗生长旺盛期，每隔20 2 d，每667 m 冲施高氮复合肥(N-P2O5-K2O含量为22-15-18)20 kg～30 kg，8月份停止施用氮肥，可喷0.5 % 磷酸二氢钾溶液2次，并适当控制水分。 5.4.2 劈叶 定植后8 d～10 d，草莓苗心叶已开始生长，此时及时进行劈除老叶，减少养分消耗，促进植株迅 速恢复生长 5.4.3 促生匍匐茎 2 ～1 定植后20 d～30 d，每667 m 喷50 mg·L 的赤霉素25 L-30 L，15 d左右再喷一次，促进抽生匍匐 茎。 5.4.4 匍匐茎管理 5.4.4.1 领蔓。匍匐茎抽出后，及时领蔓，使匍匐茎向畦面均匀伸展。 5.4.4.2 人工压茎。匍匐茎抽生幼叶时前端用少量细土压向地面，生长点外露。 5.4.4.3 断茎。当母苗抽生的第一子苗长到 4 片～5 片叶时，将匍匐茎切断。 2 5.4.4.4 除匍匐茎。每株保留 50 个左右匍匐茎苗（繁殖系数低的品种 30 个～40 个），每 667 m 合格 匍匐茎苗控制在 4 万株以内，多余的在未扎根之前尽早去掉。 5.4.4.5 摘除花序及病、老、残叶。生产季节要及早去掉母株的花序，及时去掉老叶片和病残叶片。 5.4.5 除草 4 DB 37/T 3752—2019 随时人工除草。 5.4.6 病虫害防治 应及时防治白粉病、叶斑病、蚜虫、地老虎等病虫害（见附录A），农药使用应符合GB/T 8321（所 有部分）和NY/T 1276的规定。 5.5 假植苗培育 5.5.1 假植时间 定植前25 d～30 d进行假植。 5.5.2 假植方式 主要有苗床假植和营养钵假植两种方式。提倡使用营养钵假植育苗，提早花芽分化，整钵出苗。 5.5.3 营养钵假植 5.5.3.1 育苗土准备 育苗土为无病虫害的肥沃表土，加入一定比例的草炭、炭化稻壳、腐熟秸秆等有机物料，混匀后加 3 入优质腐熟农家肥20 kg/m 。 5.5.3.2 假植 选取二叶一心以上已经生根的匍匐茎子苗，栽入直径10 cm或12 cm的塑料营养钵中。将栽好苗的营 养钵排列在架子上或苗床上。 5.5.3.3 假植期管理 栽植后浇透水，第1周遮阴，保持湿润。栽植15 d后叶面喷施1次0.3 %尿素，再隔10 d喷施1次0.3 %～ 0.5 %的磷酸二氢钾。及时摘除抽生的匍匐茎、枯叶和病叶，并进行病虫害综合防治。后期，苗床上的 营养钵苗要通过转钵断根。 5.5.4 苗床假植育苗 5.5.4.1 苗床准备 2 3 苗床宽1.2 m，每667 m 施腐熟有机肥2 m ，并加入一定比例的有机物料。 5.5.4.2 假植 选择具有三片展开叶的匍匐茎苗进行栽植，株行距（10～15）cm×15 cm。 5.5.4.3 假植期管理