ICS 65.020.01 B 05 DB41 河 南 省 地 方 标 准 DB41/T 1927—2019 高油酸花生四级种子生产技术规程 2019 - 11 - 21 发布 河南省市场监督管理局 2020 - 02 - 21 实施 发 布 DB41/T 1927—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由河南省农业农村厅提出并归口。 本标准起草单位：河南省农业科学院经济作物研究所。 本标准主要起草人：刘娟、徐静、臧秀旺、郝西、张俊、郑峥、汤丰收、齐飞艳、石磊、张忠信、 韩锁义、郭秀璞、杜红、王蒙、易明林、张香萍、王桂芳。 I DB41/T 1927—2019 高油酸花生四级种子生产技术规程 1 范围 本标准规定了高油酸花生育种家种子、原原种、原种和大田用种的四级种子生产要求和方法。 本标准适用于高油酸花生四级种子生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.5 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定 GB 5009.168 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB/T 7415 主要农作物种子贮藏 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 855 花生产地环境技术条件 NY/T 1276 农药安全使用规范总则 NY/T 2237 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 花生 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 高油酸花生 种子脂肪中油酸含量≥75%的花生。 3.2 四级种子 在种子生产中，以育种家种子为种源，运用重复繁殖技术路线，按世代顺序繁殖的育种家种子、原 原种、原种和大田用种的种子。 3.3 育种家种子 育种家育成的最初种子，具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用白色标签作标记。 3.4 原原种 由育种家种子直接繁殖而来，具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用白色标签作标记。 3.5 原种 1 DB41/T 1927—2019 由原原种直接繁殖而来，具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用紫色标签作标记。 3.6 大田用种 由原种繁殖用于大田生产的种子，具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用蓝色标签作标记。 4 育种家种子 4.1 种子来源 育种家种子。由育种者通过保种圃繁殖。 4.2 地块选择 种子圃应选择地势平坦、土层深厚、质地疏松、富含有机质、排灌方便、远离污染源的地块，产地 环境应符合NY/T 855的要求。 育种家保种圃应选择上年未种过花生的田块，且周围50 m之内不得种其它花生品种。 4.3 整地 及时耕翻，精细整地，做到上虚下实、平整无坷垃；耕地前应施足底肥。 4.4 种植 4.4.1 种子发芽率测试 播种前应进行发芽试验，种子发芽率应≥80%。 4.4.2 播种期 播种期应以连续5日土壤5 cm地温稳定在18 ℃以上为宜。 4.4.3 种植方式 单粒点播，行距35 cm～40 cm，株距17 cm～20 cm，行端设走道0.8 m～1 m。四周设1 m～2 m保护 区，保护区种植同品种同类别种子。 4.4.4 田间管理 4.4.4.1 施肥 2 每666.7 m 施纯氮6 kg～10 kg，五氧化二磷5 kg～7 kg，氧化钾6 kg～8 kg。缺钙地块，每 2 666.7 m 增施钙肥（石膏）40 kg～50 kg。肥料使用应符合NY/T 496的要求。 2 也可随播种随施肥，肥料用量：三元复合肥（氮、磷、钾：15-15-15）40 kg/666.7 m ～50 kg/666.7 2 m 左右，种肥与种子分离，防止烧种。 4.4.4.2 水分管理 开花下针期至饱果期应及时旱浇涝排。灌溉用水应符合GB 5084的要求。 4.4.4.3 化学调控 2 DB41/T 1927—2019 高肥水田块或有旺长趋势的田块，株高达到30 cm～35 cm时，应及时叶面喷施植物生长延缓剂，延 缓剂应符合NY/T 1276和GB/T 8321的规定。施药后10 d～15 d，如果主茎仍有旺长趋势，可再喷施一次。 4.4.4.4 病虫害防治 病虫草害防治方法见附录A，药剂使用应符合NY/T 1276和GB/T 8321的规定。 4.5 收获 4.5.1 收获期地温要求 收获期最低地温应不低于12 ℃。 4.5.2 收获要求 摘果装袋，做到单收、单运、单脱，种子袋内外应附标签，严防机械混杂。 4.6 晾晒与贮藏 种子晾晒时，气温不低于12 ℃。荚果水分低于10%，单运单贮。种子贮藏应符合GB/T 7415的要求。 4.7 真实性和品种纯度鉴定 4.7.1 表型鉴定 4.7.1.1 田间鉴定 按品种地上部的性状典型性和地下部的荚果性状典型性进行鉴定，淘汰非典型单株。鉴定、淘汰应 在苗期、开花期、收获期等不同阶段分次进行，直至性状典型一致。鉴定方法按 NY/T 2237 执行。 4.7.1.2 油酸含量检测 油酸含量测定的方法按 GB 5009.168 的要求进行；其油酸含量指标应符合高油酸花生品种指标要求 和该品种本质特征。 4.7.2 分子鉴定 采用固定数目的单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）引物，通过与标准样品 比较或与 SNP 指纹数据比对平台比对的方式，对品种真实性进行验证或身份鉴定。具体检测方法见 附录 B。 5 原原种 5.1 种子来源 育种家种子。 5.2 地块选择 繁种田周围30 m之内不得种植其它花生品种。其它应符合4.2的要求。 5.3 整地 符合4.3的要求。 3 DB41/T 1927—2019 5.4 种植 符合4.4的要求。 5.5 收获 符合4.5的要求。 5.6 晾晒和贮藏 符合4.6的要求。 5.7 真实性和品种纯度鉴定 符合4.7的要求。 6 原种 6.1 种子来源 原原种。 6.2 地块选择 繁种田周围30 m之内不得种植其它花生品种。其它应符合4.2的要求。 6.3 整地 符合4.3的要求。 6.4 种植 单粒播种。行距30 cm～35 cm，株距13 cm～16 cm，四周设3 m～5 m保护区，保护区种植同品种同 类别种子。 6.5 收获 符合4.5的要求。 6.6 晾晒和贮藏 符合4.6的要求。 6.7 真实性和品种纯度鉴定 符合4.7的要求。 7 大田用种 7.1 种子来源 原种。 7.2 地块选择 4 DB41/T 1927—2019 应尽量选择上年未种过花生的田块，若只能在连作花生田繁种，该田块上年所种花生必须为高油酸 品种。 7.3 整地 符合4.3的要求。 7.4 种植 播种采取穴播，行距35 cm～40 cm，穴距17 cm～20 cm，每穴两粒。要求连片种植，一场一种或一 村一种，严防混杂。 7.5 收获 符合4.5的要求。 7.6 晾晒和贮藏 符合4.6的要求。 7.7 真实性和品种纯度鉴定 符合4.7的要求。 5 DB41/T 1927—2019 附 录 A （规范性附录） 主要病虫草害防治方法 花生主要病虫草害防治方法见表A.1。 表A.1 夏花生主要病虫草害防治方法 种类 防治对象 防治时期 防治方法 用 80%代森锰锌可湿性粉剂 400 倍液，或 40%多菌灵胶悬剂 1000 叶斑病和网斑病 发病率达到 5%～7% 倍液，或 75%百菌清可湿性粉剂 600～800 倍液进行茎叶喷雾， 2 每 667 m 用药液 75 kg，每隔 10 d 左右喷 1 次，连喷 2～3 次。 播种前 根腐病和茎腐病 预防 病毒病 每 667 m 用 40%的多菌灵胶悬剂或 70%的甲基托布津 100 g，兑 水 80 kg～100 kg，根部喷淋。 及时防治蚜虫、叶蝉、蓟马等传播媒介，杜绝病毒来源。 2 发病初期 播种前 青枯病 花生专用包衣剂包衣。 2 发病初期 病害 每 8 kg～10 kg 种子用 25%多菌灵可湿性粉剂 100 g 拌种，或用 发病初期 播种前 用 5%的菌毒清水剂 200～400 倍液叶面喷雾，每 667 m 用药液 40 ㎏～50 ㎏，7 d～10 d 喷 1 次，连喷 2～3 次。 选用高抗青枯病的花生品种。 喷施 72%农用链霉素、新植霉素、20%噻菌铜溶液等，每 667 m 2 用药液 50 ㎏～75 ㎏，每 7 d～10 d 喷 1 次，连喷 2 次～3 次。 用辛硫磷拌种，或用花生专用包衣剂包衣。 物理防治：在田间放置黑光灯诱杀成虫。 蛴螬 2 6 月下旬至 7 月中下旬 化学防治： 每 667 m 用 50%辛硫磷乳油或 40%毒死蜱乳油 0.2 kg～ 0.25 kg，拌毒土撒施。 生物防治：田间撒施白僵菌或绿僵菌或 Bt 菌剂。 虫害 蚜虫 百株有蚜 250 头左右 10%高效吡虫啉可湿性粉剂 4000 倍液，叶面喷施。 1.8%阿维菌素乳油 2000～4000 倍液或 20%甲氰菊酯乳油 1500～ 红蜘蛛 有螨植株在 5%以上 2 2000 倍液，每 667 m 用药液 40 kg，7 d～10 d 喷 1 次，连喷 2～ 3 次。 2 草害 6 芽前杂草 播种时 每 667 m 用 50%的乙草胺乳油 150 mL 或 72%的异丙甲草胺乳油 100 mL～200 mL，兑水 50 kg 喷施。 DB41/T 1927—2019 BA 附 录 B （规范性附录） 花生品种真实性分子标记鉴定方法 B.1 引物合成 利用已遴选的 14 个核心 SNP 引物和 36 个扩展 SNP 引物作为品种真实性验证和身份鉴定的检测引物， 构建已知品种的 SNP 指纹数据比对平台。 根据真实性验证或身份鉴定的要求，采用序贯式方法，选定 SNP 引物。 SNP 引物采用 ULTRPAGE 的方式进行纯化，将 Primer_Allele FAM（36 umol/μ L） 、Primer_Allele HEX （36 umol/μ L） 、Primer_Common（90 umol/μ L）三种引物溶解后按体积比 1:1:1 混匀为 KASP 引物 Mix。 B.2 DNA提取 在种子生产基地随机取样，供检样品为叶片或种子，采用混合样品检测（至少含有 30 个个体），先 单独提取 DNA，再取等量 DNA 混合。 DNA 提取方法应保证提取的 DNA 数量和质量符合 PCR 扩增的要求，DNA 无降解，溶液的紫外光吸光 度 OD26