ICS 65.020.20 B 16 DB61 陕 西 省 地 方 标 准 DB 61/T 1082—2017 番茄灰霉病抗性鉴定技术规范 Rule for Resistance evaluation of Tomato grey mold 2017 - 07 - 13 发布 陕西省质量技术监督局 2017 - 08 - 06 实施 发 布 DB61/T 1082—2017 目 次 前 言 ............................................................................... II 1 范围 .............................................................................. 1 2 术语和定义 ........................................................................ 1 3 病原物 ............................................................................ 1 3.1 3.2 4 病原物来源和保存 .............................................................. 1 孢子悬浮液的制备 .............................................................. 1 抗病性鉴定 ........................................................................ 1 4.1 室内鉴定 ...................................................................... 1 4.2 田间鉴定 ...................................................................... 2 4.3 病情级别与标准 ................................................................ 2 4.4 抗性级别判定 .................................................................. 3 I DB61/T 1082—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由西北农林科技大学提出。 本标准由陕西省农业厅归口。 本标准负责起草单位：西北农林科技大学。 本标准主要起草人：王阳、马青、宗兆锋、赵新贝。 本标准由西北农林科技大学负责解释。 本标准首次发布。 联系信息如下： 单位：西北农林科技大学 电话：029-87082710 地址：陕西杨凌邰城路3号 邮编：712100 II DB61/T 1082—2017 番茄灰霉病抗性鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了番茄灰霉病抗性鉴定技术的术语和定义、病原物制备、抗病性评价标准及鉴定报告等 内容。 本标准适用于番茄生产品种、新育成品种、区域试验品种、亲本及中间材料的灰霉病抗性鉴定和抗 性评价。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 番茄灰霉病 Tomato grey mould 由灰葡萄孢 Botrytis cinerea Pers侵染引起的番茄真菌性病害。植株的叶片、花、果实和茎均可 受害。叶片发病，形成“V”字形病斑；幼果受害先危害残留的花瓣、花托，后向果实扩展呈灰白色腐 烂；茎部受害，为深褐色长椭圆形病斑；湿度大时产生灰色霉层。 3 病原物 3.1 病原物来源和保存 采集灰霉病病株，从发病植株的典型病斑上分离纯化病菌，经致病性测定后，4℃保存备用。长期 保存于-80℃超低温冰箱中。 3.2 孢子悬浮液的制备 6 灰霉病菌在PDA平板上黑暗培养7d产孢后，收集孢子，2%的蔗糖溶液配置孢子悬浮液（1×10 孢子 /ml）。 4 抗病性鉴定 4.1 室内鉴定 4.1.1 苗期鉴定 选取待测番茄品种和感病对照六叶期幼苗，进行孢子悬浮液喷雾接种，接种后在23℃、相对湿度90% 的黑暗条件下保湿24h。每份试材3次重复，每重复10株。4d后调查发病率和严重度，并按照公式（1） 计算灰霉病病情指数。 病情指数=∑（各级病株数×该病级值）/（调查总株数×最高级值）×100………………………（1） 1 DB61/T 1082—2017 4.1.2 离体叶片鉴定 选取待测番茄和感病对照六叶期植株第3片复叶，采用孢子悬浮液点滴接种,每份试材3次重复，每 重复30片小叶。在小叶中心近轴处用移液器加5µL孢子悬浮液，以2%蔗糖溶液作对照。将接种后的叶片 置于直径9cm的培养皿内，封口膜封口。在23℃、相对湿度90%的黑暗条件下培养24h后进行光照培养， 光照时间为12h/d，光照强度为3000lx。4d后记载侵染型，计算病情指数。 4.1.3 果实鉴定 取发育一致的果实，在果实对应侧面用消毒针尖扎3mm深的孔，接种5µL孢子悬浮液，以灭菌蒸馏 水5µL作对照。每份试材3次重复，每重复5个果，每果扎2个孔。将果实置于湿度90%的器皿中保湿，20 ℃黑暗条件下保存，4d后测量病斑面积，计算病斑扩展速率和相对病斑扩展速率。 4.2 田间鉴定 4.2.1 鉴定圃设置 在番茄灰霉病常发区域设置抗性鉴定圃。田间鉴定病圃的栽培条件（品种、土壤类型及施肥）须均 匀一致，设立保护行。在鉴定圃中每个材料种2行，每行15株，选当地感病品种做对照，重复3次。 4.2.2 接种方法 6 用2%蔗糖溶液配置孢子悬浮液（1×10 孢子/ml）接种，接种采用喷雾法。在番茄初花期进行接种， 接种前2d田间浇灌，以满足发病所需条件。选择傍晚接种，保湿24h。接种后15d、30d各调查一次；记 载病株率和严重度。 4.3 病情级别与标准 4.3.1 室内苗期和田间鉴定病情级别 室内苗期和田间鉴定病情级别见表1。 表1 室内苗期和田间鉴定病情级别 抗性类别 病情级别 症 缩写 类别 0级 叶片无病斑 I 免疫 1级 单叶片有病斑 3 个 HR 高抗 3级 单叶片有病斑 4 个～6 个 R 抗病 5级 单叶片有病斑 7 个～10 个 MR 中抗 7级 单叶片有病斑 11 个～20 个，部分密集成片 S 感病 9级 单叶片有病斑密集占叶面积四分之一以上 HS 高感 4.3.2 离体叶片病情级别 离体叶片病情级别见表2。 2 状 DB61/T 1082—2017 表2 病情级别 症 离体叶片病情级别 抗性类别 状 缩写 类别 0级 叶片无病斑 I 免疫 1级 病斑面积占整个叶面积的 5%以下 HR 高抗 3级 病斑面积占整个叶面积的 6%～15% R 抗病 5级 病斑面积占整个叶面积的 16%～25% MR 中抗 7级 病斑面积占整个叶面积的 26%～50% S 感病 9级 病斑面积占整个叶面积的 50%以上 HS 高感 4.3.3 离体果实病情级别 离体果实病情级别见表3。 表3 病情级别 4.4 症 离体果实病情级别 抗性类别 状 缩写 类别 0级 无病斑 I 免疫 1级 病斑直径小于 1cm HR 高抗 3级 病斑直径 1cm～2cm R 抗病 5级 病斑直径 2cm～3cm MR 中抗 7级 病斑直径 3cm～4cm S 感病 9级 病斑直径大于 5cm HS 高感 抗性级别判定 4.4.1 有效性判别 对照感病品种的抗性级别达到7级～9级，该批次鉴定有效。 4.4.2 抗性评价 4.4.2.1 在连续 3 次鉴定的结果中，如有 2 次的抗性类别是一致的，则此抗性类别作为最终鉴定结论。 4.4.2.2 达到免疫-高抗的鉴定品种，当两次抗性类别不一致时，以记载的被确认的最高病情级别所对 应的抗性类别为准。 4.4.2.3 同一鉴定品种的抗性级别一次为 5 级，另一次在 5 级以下或 5 级以上且相差 1 个等级，取抗 性级别数值较大的鉴定结果；如果两次抗性级别相差 2 个级别以上（包括 2 个级别）的，则需要做第三 次抗性鉴定。 4.4.2.4 同一鉴定品种的抗性级别一年在 5 以上，另一年在 5 以下的，则需要做第三次抗性鉴定，按 本标准 4.4.2.1～4.4.2.3 规则重新划分抗性类别。 _________________________________ 3