ICS 65.020.01 B 31 辽 DB21 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3193—2019 蛹虫草工厂化栽培技术规程 Technical regulation for of Cordyceps militaris 2019 - 11 - 30 发布 辽宁省市场监督管理局 2019 - 12 - 30 实施 发 布 DB21/T 3193-2018 前 言 本标准是按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由辽宁省农业农村厅提出并归口管理。 本标准起草单位：沈阳农业大学、辽宁天合生物科技开发有限公司。 本标准起草人：范文丽、李天来、须晖、舒黎黎、魏宝东、王奇颖、刘兴安、赵英明、辛广、 侯俊、李晓明、孙周平、刘义玲、刘在民。 本标准发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行 反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：02423447862 标准起草单位通讯地址：沈阳农业大学（沈阳市沈河区东陵路 120号），联络电话：02488487143 2 DB21/T 3193-2018 蛹虫草工厂化栽培技术规程 1 范围 本标准规定了蛹虫草(Cordyceps militaris)工厂化栽培中产地环境、生产设施、工厂化栽培技术 流程、菌种生产、接种管理、环境控制、采收、烘干与存储等相关生产工艺技术要求。 本标准适用于蛹虫草工厂化栽培。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 1886.248 食品安全国家标准 食品添加剂 稳定态二氧化氯 GB 3095 环境空气质量标准 GB 4806食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 7096 食品安全国家标准 食用菌及其制品 GB/T 12728 食用菌术语 GB/T 20783 稳定性二氧化氯溶液 GB 26366 二氧化氯消毒剂卫生标准 GB 50073 洁净厂房设计规范 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 749 绿色食品 食用菌 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 NY/T 1935 食用菌栽培基质质量安全要求 NY/T 2375 食用菌生产技术规范 NY/T 2798.5 无公害农产品 生产质量安全控制技术规范 第5部分:食用菌 NY/T 5010 无公害农产品 种植业产地环境条件 DB21/T 1541 蛹虫草栽培技术规程 DB21/T 3030 蛹虫草液体菌种生产技术规程 3 术语和定义 GB/T 12728 界定的术语和定义适用于本文件。 4 产地环境 3 DB21/T 3193-2018 产地环境应符合 NY/T 5010 的规定，环境空气应符合 GB 3095 要求，生产用水应符合GB 5749 要求。 5 工厂化设施 宜采用大跨度彩钢保温栽培房进行工厂化生产，栽培房设计符合GB 50073 一般要求。外墙及 3 屋顶保温宜采用聚苯乙烯密度25kg/m ，栽培房可采用“非”字形排列，方位南北通透，可每24m～ 3 30m设置横过道，每间培养房容积（长×宽×高为5m×8m×6m）240 m 为宜，内墙可喷厚度5cm聚氨 酯保温材料，地面夯实后，铺一层5cm厚的泡沫板，再浇注10cm水泥砂浆，墙体地平线上30cm处每 个栽培房等距离开20cm×20cm通风口3个，每间栽培房开一扇1.5m×2.0m大门。 6 工厂化栽培技术流程 7 菌种生产 7.1 菌种选择 栽培种选用国家或省级部门审（鉴、认）定或登记的蛹虫草品种，其它应符合NY/T 1742要 求。 7.2 菌种制备 母种的生产应符合 NY/T 528 的规定，原种、栽培种采用液体培养基，培养基配方按DB21/T 3030要求进行。 7.2.1原种 2 按照原种培养基配方制备培养基，灭菌后，在无菌条件下从母种试管中取5块～6块0.5cm 的菌 种块接种到2500mL的三角瓶中，装液量为容量的40%，20±2℃黑暗静置24h，然后振荡培养 72h～ 96h。 7.2.2 栽培种 7.2.2.1 装罐 采用液体菌种平板检测法和显微镜检测法对菌种纯度进行检测，将符合标准的原种在无菌条件 下接入已灭菌发酵罐中，发酵罐装液量为总容量的80%。 7.2.2.2 发酵条件 进入发酵罐的净化空气系统通气压力为0.065Mpa～0.1Mpa，罐内压力为0.035Mpa～0.05Mpa， 发酵罐温度控制在（20±2）℃。 4 DB21/T 3193-2018 7.2.2.3 观察与检测 每天经发酵罐视窗观察，菌液澄清透明，菌丝呈球形、片状和丝状均匀分布；出气口气体无异 味；每间隔24h从取样口取样进行杂菌检测，即将取样菌液在超净工作台上均匀涂布到平板中，分 别置于28±1℃和36±1℃培养箱中，培养8h～12h后显微镜检查杂菌。 7.2.2.4 下罐 若显微镜观察无杂菌，则培养至72h，及时下罐，进行大生产接种。 8 接种管理 8.1 接种环境消毒 8.1.1 消毒剂选择 消毒剂宜选用二氧化氯，质量符合 GB26366、GB 1886.248 和 GB/T 20783 的规定，其使用浓 3 度为 0.1 L/m 。选用其它消毒剂种类及使用方法按 NY/T 2798.5 执行。 8.1.2 消毒方法 8.1.2 1清理 接种前 3d～5d，将工厂化栽培房打扫干净，并用清水清洗地面。 8.1.2.2 环境条件 栽培房内温度控制在 15 ℃～40 ℃，空气湿度保持在 RH≥85 %。 8.1.2.3 清毒处理 栽培房内每隔 5m 在距离地面高 1m 处设置 1 个熏蒸点，按消毒体积将药剂均匀分装，置于敞口 塑料容器内，按产品说明书要求反应释放二氧化氯气体，人员迅速撤离现场，密闭工厂化栽培房， 并启动内循环风机，密闭 24h～48h。达到密闭要求时间后，打开通风换气风机换气，直到栽培房 内无刺激性气味为止。 8.2 栽培用培养基制作及接种 8.2.1 栽培用培养基 栽培用培养基主要以小麦或大米为主，质量安全应符合 NY/T 1935 的规定。 8.2.2 培养基制作 将小麦或大米等装入栽培容器中再加水，小麦料水比1:1.2，大米料水比1:1，用高压聚丙烯薄 膜和皮筋封口，采用高压灭菌法，灭菌压力0.13MPa±0.01 MPa，灭菌时间1 h。灭菌后将栽培容器 放于消毒的接种室内，冷却至24℃以下即可接种。栽培容器及相关用品均符合GB 4806.7的要求。 8.2.3接种 5 DB21/T 3193-2018 在接种隧道中接种，严格按照无菌操作进行，每500g麦子或大米接菌量为60mL±3mL，菌液均 匀喷洒到培养基表面。 9 环境控制 9.1发菌期 菌丝生长阶段避光培养，栽培室温度控制在20±2℃， 空气相对湿度控制在65%±5%，空间CO2 浓度控制在0.01%～0.02%，培养6d±1d，菌丝长满整个栽培容器料面。 9.2 原基分化期 菌丝长满培养基后，增加散射光照射，采用LED灯带进行补光，光质可以选择白光、蓝光，光 照强度200±50lux，每天光照时间10±1h，并进行5℃昼夜温差刺激,空气相对湿度保持70%±5%。 3d±1d后菌丝由白色转为橘黄色，10±1d后原基出现。 9.3 出菇期 现原基时第一次进行放气，即将栽培容器上封口膜刺孔放气，栽培室内CO2浓度控制在0.3%～ 0.4%，容器内CO2浓度控制在3%～4%。温度控制在18±1℃，空气湿度85%～90%。每天定期开启内循 环通风和外循环风机，保持栽培室空气新鲜，每天光照时间8h，当蛹虫草子实体长到1cm时，进行 第二次放气，即在封口膜上增加刺孔数量，栽培容器内CO2浓度控制在1.5%～2.5%。 10 采收 蛹虫草生长60d±5d即可采收。从蛹虫草基部拔取，按大小等级分别排列，进行保鲜或烘干。 生产记录按 DB21/T 1541规定执行。采收后应及时清理栽培房，并进行消毒。 11 烘干与储存 采用热风干燥方法，温度40℃～50℃，蛹虫草烘至含水量13%以下即可。烘干后子实体用薄膜 袋密封，置5℃～10℃避光干燥的储存库内，防吸潮霉变。 蛹虫草商品符合 GB 7096和NY/T 749 要求。 12 病虫害防控 栽培房消毒前建议先用5%火碱清洗地面，控制“吃草菌”即虫草生齿梗孢，其它病虫害防治按 照NY/T 2375要求进行。 6