DB4114 商 丘 市 地 方 标 准 DB 4114/T 101—2018 牛冷冻精液使用 2018 - 10 - 26 发布 商丘市质量技术监督局 2018 - 11 - 09 实施 发 布 DB4114/T 101—2018 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由商丘市畜牧工作站提出。 本标准起草单位：商丘市畜牧工作站、柘城县农业畜牧局、夏邑县农业畜牧局、商丘市睢阳区农业 畜牧局、民权县农业畜牧局。 本标准主要起草人：马东予、袁丽莹、路统胜、班宜锋、李威、吴艳华、韩梅。 本标准参与起草人：孙玮、张传良、陈娟、杨翠花、张俊丽、尹本亮、朱爱华。 I DB4114/T 101—2018 牛冷冻精液使用 1 范围 本标准规定了牛冷冻精液的质量要求、使用方法和操作技术要点。 本标准适用于商丘市各养牛场、养牛户使用牛冷冻精液进行人工授精操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143 牛冷冻精液 GB/T 30396 牛冷冻精液包装、标签、贮存和运输 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 前进运动精子数 每剂量精液中呈前进运动的精子数。 3.2 精子活力 在 37℃环境下前进运动精子占总精子数的百分率。 3.3 精子畸形率 畸形精子占总精子数的百分率。 3.4 细菌数 每剂量精液经培养后观察到的细菌菌落数。 3.5 冷冻精液 经特殊方法处理的精液超低温冷冻后在液氮中（－196℃）长期保存。 4 冷冻精液质量要求 牛冷冻精液质量要求按 GB/T 4143 执行。 5 冷冻精液的包装、贮存和运输 1 DB4114/T 101—2018 牛冷冻精液的包装、贮存和运输按GB/T 30396执行。 6 冷冻精液解冻 6.1 解冻方式 细管冻精可用 38℃±2℃温水直接浸泡解冻。 6.2 解冻后的使用时间 解冻后尽快使用，细管冻精（上限）为 1h。 7 冷冻精液检查 7.1 精子活力检查 按 GB 4143 进行。 7.2 前进运动精子数检查 按 GB 4143 进行。 7.3 精子畸形率检查 按 GB 4143 进行。 7.4 细菌数检查 按 GB 4143 进行。 8 输精器械消毒 8.1 化学消毒 各种器械用后先用 2%小苏打水刷洗除污，然后用温开水冲洗干净。 8.2 物理灭菌 玻璃、金属器械、胶球和布类用蒸汽灭菌 30min 或干热灭菌。 8.3 一次性消毒使用 输精器用后及时清洗、消毒，每配种一头母牛，须使用一只经过消毒的输精器，塑料外套管一次性 使用。 9 输精时间的确定 通过母牛发情鉴定，确定输精时间。 2 DB4114/T 101—2018 9.1 母牛发情鉴定 9.1.1 外部观察法 母牛表现出站立不安、到处走动、精神兴奋，食欲减退，泌尿频繁，外阴部湿润肿胀，外阴部流有 透明粘液，根据这些症状可判断为发情。 9.1.2 直肠检查法 发情母牛子宫颈稍大 松软，子宫角体积增大，子宫收缩反应明显。 发情初期： 卵泡直径在 0.45-0.55cm，手触有软化点。 发情盛期：卵泡明显增大，直径在 1-1.5cm，卵泡呈圆形，显著突出于卵囊表面，手触有明显波动 感。 发情末期：卵泡不再增大，泡壁变薄，紧张度增加，手触易破。 9.2 输精时间 9.2.1 单次输精时间 母牛单次的输精时间在发情末期 9.2.2 两次输精时间 两次输精的时间都在发情末期，但两次间隔时间为 8-12h。 10 输精操作 10.1 输精母牛的准备 10.1.1 输精母牛固定 将输精母牛固定在保定架内，用细绳拴住尾巴拉向一侧固定。 10.1.2 母牛消毒 输精人员把手指甲剪短磨光，戴上长臂手套，对输精母牛肛门及外阴进行消毒后擦干。 10.2 输精方法 输精方法有直肠把握输精法和开张器输精法，直肠把握输精法较为常用。每一发情期输精1-2次。 要做到输精适时和输精器适深，慢插、轻注、缓出，防止精液逆流。 10.2.1 直肠把握输精法 输精人员将一只手伸入母牛直肠内，寻找到子宫颈，并用手握住子宫颈的外口端，手臂往下按压， 使阴门裂开，然后另一只手把准备好的输精器自阴门向斜上方插入 6-10cm，注意避开尿道口，再改为 平插，把输精器送到子宫颈外口，然后使输精器缓缓越过子宫颈管中的皱壁轮，将输精器送至子宫深部 2/3-3/4 处，然后注入精液，抽出输精器。 3 DB4114/T 101—2018 10.2.2 开张器输精法 借助开张器将母牛的阴道撑开，借助照明工具，找到母牛的子宫外口，在子宫颈处 1.5-2.0cm 处， 慢慢注入精液，然后再把输精管和开张器一同从子宫里面取出。 11 记录统计与报表 母牛繁殖记录表应每头登记一张，配种时认真逐项填写，并长期保存，按时统计上报。 _________________________________ 4