ICS 65.020.01 B 15 DB52 贵 州 省 地 方 标 准 DB52/T 1501.17—2020 农作物抗病性鉴定技术规范 第 17 部分:大豆花叶病毒病 Technical specification for evaluation of crop resistance to diseases Part 17: Soybean resistance to Soybean Mosaic Virus 2020 - 05 - 22 发布 贵州省市场监督管理局 2020 - 09 - 01 实施 发 布 DB52/T 1501.17—2020 目 次 前 言 .............................................................................. II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 鉴定方法 .......................................................................... 2 5 抗病性评价 ........................................................................ 3 附录 A（资料性附录） 芜菁花叶病毒病原、症状及发生流行规律 ............................ 4 附录 B（资料性附录） 芜菁花叶病毒病原鉴定及保存方法 .................................. 5 附录 C（资料性附录） 白菜芜菁花叶病毒病抗病性鉴定记载、评价表 ........................ 8 I DB52/T 1501.17—2020 前 言 《农作物抗病性鉴定技术规范》分为17个部分： ——第1部分：水稻抗稻瘟病； ——第2部分：水稻抗稻曲病； ——第3部分：水稻抗纹枯病； ——第4部分：小麦抗条锈病； ——第5部分：小麦抗白粉病； ——第6部分：小麦抗纹枯病； ——第7部分：马铃薯抗晚疫病； ——第8部分：玉米抗丝黑穗病； ——第9部分：玉米抗大斑病； ——第10部分：玉米抗小斑病； ——第11部分：玉米抗灰斑病； ——第12部分：玉米抗南方锈病； ——第13部分：辣椒抗枯萎病； ——第14部分：辣椒抗炭疽病； ——第15部分：白菜抗根肿病； ——第16部分：白菜抗芜菁花叶病毒病； ——第17部分：大豆抗大豆花叶病毒病。 本部分为《农作物抗病性鉴定技术规范》的第17部分。 本部分按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本部分由贵州省植物保护研究所提出。 本部分由贵州省植物保护标准化技术委员会（GZ/TC16）归口。 本部分起草单位：贵州省植物保护研究所、贵州省油料研究所、三都县植保站、岑巩县植保站。 本部分主要起草人：王莉爽、刘学辉、艾祯仙、李淳、何海永、陈小均、谭春燕、许兴亮。 II DB52/T 1501.17—2020 农作物抗病性鉴定技术规范 第 17 部分：大豆抗大豆花叶病毒病 1 范围 本部分规定了大豆抗大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus,SMV)鉴定方法与抗病性评价。 本部分适用于贵州区域种植的大豆品种(系)、种质资源对大豆花叶病毒抗病性的鉴定和评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 NY/T 3114.1 大豆抗病虫性鉴定技术规范 3 第 1 部分：大豆抗花叶病毒病鉴定技术规范 术语和定义 以下术语和定义适用于本文件。 3.1 大豆花叶病毒 Soybean Mosaic Virus,SMV 大豆花叶病毒是马铃薯病毒属的成员之一,具有马铃薯病毒属病毒的一般特性；是一种世界性分布 的植物病毒（病原、田间症状和发生规律见附录A）。 3.2 盛荚期 pods period 大豆植株完全结荚，无花朵。 3.3 田间鉴定 field Identification 大豆品种种植在病区的试验地，在大豆盛荚期对各个参鉴品种发病程度进行调查，经结果分析确定 各个大豆品种的抗性水平。 3.4 病圃 disease nursery 在大豆病毒病常年发生较重区域选择作为大豆抗大豆花叶病毒病鉴定的地块。 3.5 对照品种 susceptible control variety 用于衡量病害发生程度的抗、感品种。 1 DB52/T 1501.17—2020 3.6 抗病性评价 evaluation of disease resistance 根据抗病性分级标准判别大豆对大豆花叶病毒病的反应程度和抵抗水平。 4 鉴定方法 4.1 病圃设置 4.1.1 田间设置 2 2 参试品种采用随机区组排列，每小区面积为5 m ～10 m ，株行距0.1 m×0.4 m，每一行参试品种， 种一行感病品种诱发行，待大豆出苗后接种病原物（病原物的鉴定、保存及接种方法见附录B），以确 保发病的均一性。每个参试品种重复3 次。 4.1.2 对照品种的选择 以感病品种南农1138-2作为田间抗病性鉴定的对照品种。 4.1.3 栽培技术及管理 诱发行的播种时间为当地最适播种期的前10 天～20 天，参试品种按当地正常播种时期进行播种。 大豆整个生长期不使用任何杀虫剂和杀菌剂。 4.2 调查 4.2.1 调查时间 在大豆盛荚期进行病情调查。 4.2.2 调查方法和计算 每小区5点取样，每点调查6 株，共30 株。按照分级标准进行病情调查和记载发病总株数，用公式 （1）计算病情指数。 病情指数（DI） （各级病株数  相应级数值）100 4.2.3 调查分级 病情分级及其对应的症状描述见表1。 2 调查总株数  9 ................. (1) DB52/T 1501.17—2020 表1 大豆花叶病毒病病情分级 病情级别 5 病 情 描 述 0 植株正常无病毒症状。 1 轻花叶皱缩、或褐色小斑占叶面积 10%以下；结荚正常。 3 叶片皱缩、花叶或叶脉坏死，褐斑面积占整株叶面积的 10%-20%。 5 叶片皱缩、花叶或叶脉坏死，褐斑面积占整株叶面积的 20%-30%。 7 叶片出现明显皱缩、重花叶或叶脉坏死，褐斑面积占整株叶面积的 30%-50%；结荚畸形。 9 叶片严重皱缩、花叶或 50%以上叶片褐斑枯死，植株严重矮化或顶枯死亡。荚畸形，甚至不结荚。 抗病性评价 5.1 有效性鉴定 当设置的对照品种盛荚期的病情指数高于40视为病毒病自然发病鉴定有效。 5.2 抗性评价标准 根据大豆盛荚期大豆病毒病的病情指数平均值作为大豆病毒病抗性评价的依据，具体标准参照表2。 记录见附录表C。 表2 大豆花叶病毒病抗病性评价分级 抗病级别 平均病情指数（DI） 抗病性评价 0 DI=0 免疫（I） 1 0.1＜DI≤25 抗病（R） 3 25.1＜DI≤40 中抗（MR） 5 40.1＜DI≤55 中感（MS） 7 55.1＜DI≤70 感病（S） 9 70.1%≥ 高感（HS） 3 DB52/T 1501.17—2020 BB 附 录 A （资料性附录） 大豆病毒病病原、症状及发生流行规律 A.1 病原 引起大豆病毒病的主要病原病毒是大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus，SMV）。 A.2 危害症状 SMV的寄主范围较窄，主要侵染大豆，在大豆上的症状表现受大豆品种、病毒株系和环境条件的 影响。危害大豆后主要有花叶和坏死两大类症状，花叶类症状在感染初期表现为嫩叶上出现明脉，陆续 出现轻花叶、黄斑花叶、叶片向下反卷，或疮叶、畸形叶、皱缩、矮化等畸形症状，茎杆和豆荚上的茸 毛消失，产生“光荚”。坏死型症状在感染初期主要表现为叶片上出现褐色小枯斑或叶脉坏死，随后坏死 部分扩大甚至连成一片，严重时叶片脱落（图A.1）。 图 A.1 A.3 大豆花叶病毒病田间症状图 发生流行规律 大豆花叶病毒以带毒种子作为田间传播的主要初侵染源，经蚜虫非持久性传播及汁液摩擦接种引起 再次侵染。 4 DB52/T 1501.17—2020 CC 附 录 B （资料性附录） 大豆病毒病病原的分离、保存及接种方法 B.1 病原物分离 采集田间具有花叶或皱缩等症状的大豆病毒病的大豆叶片，采用RNA的反转录和cDNA的聚合酶链 式扩增相结合的技术（RT-PCR）鉴定或双抗夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）鉴定等方法，确定分 离株系为大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）后，采用心叶烟进行分离纯化和致病性测定，保 存备用。 B.2 病原物的繁殖和保存 B.2.1 病原物的繁殖 将已鉴定纯化的SMV株系人工接种在感病品种上隔离培养，待大豆花叶病毒显症后采集新鲜病叶 作为接种毒源。 B.2.2 病原物的保存 病毒株系可活体保存在感病品种，或将病叶保存在-80 ℃的超低温冰箱。 B.3 接种方法 采用人工摩擦接种，具体方法参考NY/T 3114.1。 5 DB52/T 1501.17—2020 DD 附 录 C （资料性附录） 大豆花叶病毒病抗病性鉴定记载、评价表 表 C.1 大豆花叶病毒病抗病性鉴定田间调查记载表 鉴定 编号 播种（移栽）日期： 鉴定地点： 经纬度： 海拔： 接种日期 ： 调查人： 记录人： 调查日期： 重复 总株数 病情分级 0 1 3 5 7 9 I II III I II III I II III … 表 C.2 大豆花叶病毒病抗病性评价表 鉴定 编号 鉴定 品种 重复 I 病情指数 重复 II 病情指数 重复 III 病情指数 平均 病情指数 抗病性 级别 抗病性 评价