ICS 65.150 CCS B 51 37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 4340—2021 鳗草种子收集与保存技术规范 Technical specifications for seed collection and storage in eelgrass (Zostera marina L.) 2021 - 03 - 11 发布 2021 - 04 - 11 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB 37/T 4340—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省海洋局提出并组织实施。 本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：威海虹润海洋科技有限公司、中国科学院海洋研究所、荣成峻鹏生物科技有限公 司。 本文件主要起草人：周毅、张晓梅、徐少春、许帅、杨红生、王培亮、王军杰、谷虹。 I DB 37/T 4340—2021 鳗草种子收集与保存技术规范 1 范围 本文件规定了鳗草种子收集和保存的原则、技术方法等要求。 本文件适用于鳗草种子收集与保存工作。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 海草 seagrass 可完全生活在海水中的高等被子植物，隶属于泽泻目（Alismatales）。 注： 我 国 分 布 的 海 草 包 括 四 科 ， 分 别 是 鳗 草 科 （ Zosteraceae ） ， 丝 粉 草 科 （ Cymodoceaceae ） ， 水 鳖 科 （Hydrocharitaceae）和川蔓草科（Ruppiaceae）。 3.2 鳗草 Zostera marina L. 生活在北温带海洋中的一年生或多年生沉水被子植物。 注： 系我国北方常见海草的一种，隶属于鳗草科，鳗草属（Zostera）。 3.3 生殖枝 flowering shoot/reproductive shoot 海草进入花期/繁殖期后，发育形成花和种子等生殖器官的茎枝。 3.4 营养枝 vegetative shoot 不进行有性繁殖过程的茎枝。 3.5 佛焰苞 spathe 鳗草的生殖器官总称，其肉穗花序由总苞片包裹，状如佛焰，称为佛焰苞。 4 收集和保存原则 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 优先选择面积不小于 0.25 ha 的鳗草草床。 优先选择生殖枝比例不低于 20 %的鳗草草床。 提前做好本底调查，确定目标草床的种子成熟期和休眠期，以明确种子最佳采集时间和保存方法。 种子采集时应合理调整采集量。 外形完整、质硬、色泽棕至黑色的种子一般具有活力，宜进行保存。 1 DB 37/T 4340—2021 5 收集 5.1 生殖枝种子收集 5.1.1 采集时间 5.1.1.1 鳗草生殖枝的采集应在种子开始成熟但尚未脱落时进行，即大部分种子已颗粒饱满而其颜色 尚未加深时。 5.1.1.2 鳗草生殖枝的采集时间一般是 7 月上旬。 5.1.2 采集 5.1.2.1 步行采集 潮间带面积较小或生殖枝比例较低的鳗草草床宜采用步行采集法。每月大潮期间，潮高低于50 cm 时，携带网具等徒步进入鳗草床，徒手采集生殖枝。 5.1.2.2 行船采集 潮间带面积较大且生殖枝比例较高的鳗草草床宜采用行船采集法。当潮位满足可从水面清晰识别生 殖枝和营养枝时，可行船进入鳗草草床，降低船速、人工快速采集视野内的生殖枝，并挑选剔除夹带的 营养枝。 5.1.2.3 潜水采集 潮下带分布的鳗草草床宜采用潜水采集法。潜水员可携带网具下潜至鳗草冠层上方，徒手采集生殖 枝。 5.1.3 运输 采集的生殖枝宜进行冷藏运输。运输时间较短时（＜6 hr）亦可采用常温避光运输，注意保持生殖 枝湿润状态。 5.1.4 暂养 5.1.4.1 现场暂养 选择封闭的海湾或潟湖进行生殖枝现场暂养。 将生殖枝装入细网袋（孔径≤0.7 mm），用较大孔径渔网进行外层加固，将整个网袋固定于船只、 木桩、筏架等设施，并浸没于海水中。 5.1.4.2 室内暂养 选择室内较大容积的养殖池、缸或者桶进行生殖枝暂养。 3 将生殖枝直接散置于水体内或用网袋分装悬挂于水体中，1 m 水体生殖枝不超过2 kg。保持自然光 照、通氧、水温不高于26 ℃，每日换水并充分搅动生殖枝。 5.1.4.3 佛焰苞冷藏暂养 较为珍贵稀缺的种子资源，可将含有种子的佛焰苞进行冷藏暂养。 采摘生殖枝上含有种子的佛焰苞，及时装袋避免过度脱水，并置于密闭、避光、低温（1 ℃～4 ℃） 条件保存。 2 DB 37/T 4340—2021 5.1.5 种子收集 当暂养的生殖枝或者佛焰苞的种子完全成熟脱落后，用海水反复漂洗，剔除腐烂的海草叶片等组织 碎屑，完成种子收集。漂洗所用海水的温度应与暂养环境的温度相同。 5.2 沉积物种子收集 5.2.1 沉积物采集 当错过生殖枝收集时，可在鳗草花期结束、种子成熟脱落进入底泥后，在低潮时挖取草床表层10 cm 以浅的沉积物，以收集其中包含的种子。 5.2.2 沉积物运输 采集的沉积物宜进行冷藏运输。 5.2.3 种子收集 在海水中用不小于1.5 mm的大孔径网筛和不大于0.7 mm的小孔径网筛分别去除较大和较小的颗粒杂 质，人工挑选完整结实的种子。沉积物筛洗过程需要大量海水，可在现场或有条件的实验室内进行。 5.3 种子收集记录 种子收集过程中，应记录时间、地点、采集方法、采集量以及后续处理细节等，填写种子采收记录 表（见表A.1、表A.2）。 6 保存 6.1 运输过程中的保存 鳗草种子运输过程中，应置于自然海水或人工海水中密闭冷藏保存，每天换水，时间不超过7 d。 6.2 室内保存 6.2.1 中短期（小于 6 个月）保存 6.2.1.1 常温保存 将鳗草种子放入孔径不大于0.7 mm的网袋中，置于自然海水循环水系统中，维持常温水温（20 ℃）， 每三天充分抖动一次网袋中的种子。 6.2.1.2 冷藏保存 将鳗草种子置于盛有自然海水的容器中冷藏（4 ℃）保存。 6.2.2 长期（6 个月—3 年）保存 将鳗草种子置于盐度为40～50的人工海水中，温度维持0 ℃～1 ℃，避光保存。每月换水一次，人 工海水和容器应在同等温度下预冷4 h以上。保存过程中应定期观察，防止水体出现结冰现象。 6.3 抗菌剂的使用 在鳗草种子短期和长期保存过程中，可加入浓度2 ppm～5 ppm纳米银或硫酸铜等抗菌剂。 3 DB 37/T 4340—2021 6.4 盐水选种法的使用 将收集的种子置于比重1.20的人工盐水中，饱满的种子会沉于底部，可快速筛选高质量鳗草种子。 6.5 保存记录 种子保存过程中，应记录保存编号、采收编号、保存地点、保存方法、起止时间、种子量、管理人 等，并填写种子保存记录表（见表A.3）。 4 DB 37/T 4340—2021 A A 附 录 A （资料性） 鳗草种子收集记录报表格式 表A.1～表A.3给出了鳗草生殖枝种子采集、底泥种子采集及种子保存记录表。 表A.1 鳗草生殖枝种子采收记录表 采收 编号 地点 生殖枝采集 生殖枝暂养 种子收集 （记录人______） （记录人______） （记录人______） 方法 日期 重量（kg） 地点 条件 起止日期 收集日期 种子量(kg) 表A.2 鳗草底泥种子采收记录表 底泥采集（记录人______） 采收 编号 地点 日期 底泥处理与种子收集（记录人______） 3 体积（m ） 地点 日期 种子量(kg) 种子量(kg) 管理人 表A.3 鳗草种子保存记录表 保存编号 采收编号 保存地点 保存方法 起止时间 5