(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210569207.5 (22)申请日 2022.05.24 (71)申请人 吉林农业大 学 地址 130000 吉林省长 春市新城大街28 88 号吉林农业大 学 (72)发明人 杜林娜　林瑞新　初国栋　万辰梦　 杨晶　 (74)专利代理 机构 西安赛嘉知识产权代理事务 所(普通合伙) 61275 专利代理师 张少君 (51)Int.Cl. A61K 36/52(2006.01) A61K 9/107(2006.01) A61K 47/14(2006.01) A61K 47/22(2006.01)A61K 47/26(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种核桃楸 黄酮提取及纯化工艺 (57)摘要 本发明提供了一种核桃楸黄酮提取及纯化 工艺， 及所制备的黄酮组分纳米乳在癌症治疗中 应用。 本发明中， 核桃楸废枝黄酮类组分纳米乳 的制备工艺较为简单， 所得纳米制剂的平均粒径 为20‑35nm， 解决了核桃楸黄酮类化合物水溶性 低、 生物利用度差等不足。 此外该纳米乳还具有 较好的稳定性和抗肝癌活性， 在肿瘤治疗等领域 具有良好的应用前 景。 权利要求书1页 说明书4页 附图5页 CN 115089627 A 2022.09.23 CN 115089627 A 1.一种核桃楸 黄酮提取及纯化工艺， 包括以下步骤： (1)在45℃条件下将核桃楸废枝烘干至恒重， 然后经粉碎机粉碎， 过60目筛， 得到核桃 楸废枝粉末； (2)称取步骤(1)得到的核桃楸废枝粉末适量， 加入提取溶剂， 采用超声波辅助提取黄 酮类化合物； 提取结束后， 离心收获上清液， 即为核桃楸废枝黄酮类化合物的粗提液； 其中， 所述的提取 溶剂为68％(V/V)乙醇溶 液； (3)将步骤(2)得到的上清液进行旋转蒸发浓缩， 得到核桃楸废枝黄酮类化合物的粗提 物。 2.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(2)中向过筛后的核桃楸废枝干粉中加 入68％的乙醇溶 液， 使其料 液比为1： 20g/mL， 超声 波功率225W， 温度62℃， 时间20mi n。 3.一种核桃楸 黄酮提取及纯化工艺， 包括以下步骤。 (1)以核桃楸废枝黄酮的粗 提物为样本， 采用大孔吸附性 树脂纯化黄酮类化 合物； (2)洗脱液 经旋转蒸发浓 缩后， 冷冻干燥得到核桃楸 黄酮。 4.如权利要求3所述的纯化工艺， 其特征在于， 所述的大孔吸附树脂为AB ‑8大孔吸附树 脂。 5.如权利 要求3所述的纯化工艺， 其特征在于， 步骤(1)中上样液的浓度 为1.2mg/mL， 上 样液流速为2.4BV/h， 上样量为5BV， 洗脱液为体积分数60％的乙醇溶液， 洗脱液流速为 2.4BV/h， 洗脱液用量 为4BV。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115089627 A 2一种核桃楸黄酮提取及纯化工艺 技术领域 [0001]本发明属于医药 领域， 公开了一种核桃楸 黄酮提取及纯化工艺。 背景技术 [0002]肝癌是世界范围内最为常见的恶性肿瘤之一。 在我国的恶性肿瘤中， 肝癌的发病   率和死亡率分别位居第四位和第二位。 然而， 由于肝癌发病机制较为复杂， 起病隐匿，  多数 患者在确诊时已进入中晚期， 治疗手段极为有限。 近年来， 传统中药材 因其特有  的多靶点、 多层次、 不良反应少等优势， 逐渐受到了广大科研工作者的关注。 大量研  究报道提示 天然、 有效、 低毒性的中药化学成分在抗 肝癌方面存在巨大潜力。 [0003]核桃楸(Juglans  mandshurica)为雌雄异株落叶阔叶乔木， 属胡桃科， 胡桃属的   一种珍贵树种。 作为我国十 分重要的药源植物， 核桃楸具有显著的抗菌、 消炎、 抗氧  化等作 用。 核桃楸树枝中包含了黄酮类、 蒽醌类、 生物碱、 萜类等活性成分， 使其具  有良好的药用 前景和开发价值。 黄酮类化合物又称类黄酮， 是由核桃楸产生的一类重  要的次生代谢产 物， 具有广泛的药 理活性， 如抗肿瘤、 抑菌、 抗炎和抗氧化等， 已成  为国内外的研究热点。 其 中， 黄酮类化合物已被证实对多种类型肿瘤均有效。 然而，  黄酮类化合物因溶解度小、 代谢 快、 口服吸 收差等特点限制了其 抗肿瘤活性的发挥。 [0004]近年来， 纳米技术的发展大大促进了难溶性药物在医药领域的应用发展。 纳米乳   是一种新型口服载药系统， 它是将两种互不相溶 的溶液在乳化剂/助乳化剂的作用下，  形 成外观透明或半透明， 粒径在1 ‑100nm的分散体系。 这一载药系统可提高包埋药  物稳定性、 难溶性药物溶解度、 大分子水溶性药物的生物利用率、 药物缓释作用等优  点。 虽然已有研 究人员对部分黄酮类化合物进行了相应剂型改良研究， 然而关于核桃  楸总黄酮的纳米制 剂研究未 见报道。 发明内容 [0005]本发明提供了一种核桃楸黄酮提取及纯化工艺， 及所制备的黄酮组分纳 米乳在癌   症治疗中应用。 本发明中， 核桃楸废枝黄酮类组分纳米乳的制备工艺较为简单， 所得  纳米 制剂的平均粒径 为20‑35nm， 解决了核桃楸黄酮类化合物水溶性低、 生物利用度  差等不足。 此外该纳米乳还具有较好的稳定性和抗肝癌活性， 在肿瘤治疗等领域具有  良好的应用前 景。 [0006]为达到上述目的， 本发明提供如下技 术方案： [0007]1.一种核桃楸 黄酮提取及纯化工艺， 包括如下步骤： [0008](1)将筛选得到 的表面活性剂与助表面活性剂按一定比例均匀混合后， 加入适宜   的油相， 磁力搅拌1h使之完全混匀， 在磁力搅拌的状态下逐滴加入蒸馏水， 直至体  系变为 清澈透明， 即得空白纳米乳液。 向10 mL空白纳米乳液中加入228mg核桃楸  废枝黄酮组分， 磁 力搅拌至 完全溶解， 即得核桃楸废枝黄酮组分纳米乳 。 [0009](2)所述的核桃楸废枝黄酮组分纳米乳的制备方法， 其特征在于： 表面活性剂(吐  说　明　书 1/4 页 3 CN 115089627 A 3