(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210580260.5 (22)申请日 2022.05.25 (71)申请人 郑州大学 地址 450000 河南省郑州市高新 技术开发 区科学大道100号 (72)发明人 伊娟娟　刘永奇　鲁吉珂　康巧珍　 王小龙　李雪　高航　刘可可　 (74)专利代理 机构 哈尔滨龙 科专利代理有限公 司 23206 专利代理师 李智慧 (51)Int.Cl. A61K 9/14(2006.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 31/216(2006.01) A61P 31/04(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61P 39/06(2006.01) (54)发明名称 一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制 备方法 (57)摘要 一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制 备方法， 属于食品与医药领域， 具体方案包括以 下步骤： 步骤一、 将咖啡酸苯乙酯和积雪草酸共 同溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶剂中， 得到溶液 A； 步骤二、 将溶液A加入到聚乙烯醇水溶液 Ⅰ中， 超声处理， 形成乳 液B； 步骤 三、 将乳液B逐滴加入 聚乙烯醇水溶液 Ⅱ中， 并于室温下搅拌得到悬液 C； 步骤四、 将悬液C离心分离， 洗涤沉淀物， 得到 咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型。 本发明制备的 咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型呈球状， 具有水 溶性好、 稳定性强、 在模拟胃肠消化环境中能够 缓释、 体外抗癌活性强等优点， 可 以有效地解决 脂溶性天然小分子咖啡酸苯乙酯在食品与医药 领域中水 溶性差和生物利用度低等问题。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 114948880 A 2022.08.30 CN 114948880 A 1.一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 步骤一、 将咖啡酸苯乙酯和积雪草酸共 同溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶剂中， 得到溶 液A， 其中， 所述积雪草酸和咖啡酸苯乙酯的质量比为1:0.1 ‑1:0.5， 所述积雪草酸与二氯甲 烷和甲醇的混合溶剂的质量体积比为5mg/ml， 二氯甲烷与甲醇的体积比为9:1； 步骤二、 将溶液A加入到聚乙烯醇水溶液 Ⅰ中， 搅拌均匀， 使用超声细胞破碎仪超声处 理， 形成乳液B， 聚乙烯醇水溶液 Ⅰ的浓度为0.025g/ml， 其中溶液A与聚乙烯醇水溶液 Ⅰ的体 积比为1:3； 步骤三、 将乳液B逐滴加入聚乙烯醇水溶液 Ⅱ中， 并于室温下搅拌得到悬液C， 其中， 聚 乙烯醇水 溶液Ⅱ的浓度为0.0 03g/ml， 乳液B与聚乙烯醇水 溶液Ⅱ的体积比为2:15； 步骤四、 将悬 液C离心分离， 洗涤沉淀物， 得到咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型。 2.根据权利要求1所述的一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方法， 其特征在 于： 步骤一中， 所述积雪草 酸和咖啡酸苯乙酯的质量比为1:0.45 。 3.根据权利要求1所述的一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方法， 其特征在 于： 步骤二中， 超声细胞破碎仪的功率为40W， 在超声的过程中， 开5s， 关5s， 依次交替进行共 处理1min。 4.根据权利要求1所述的一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方法， 其特征在 于： 步骤二中， 通过涡旋1mi n使溶液A与聚乙烯醇水 溶液Ⅰ充分混合。 5.根据权利要求1所述的一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方法， 其特征在 于： 步骤三中， 40 0rmp搅拌16 h， 将乳液B与聚乙烯醇水 溶液Ⅱ混合均匀。 6.根据权利要求1所述的一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方法， 其特征在 于： 步骤四中， 离心的转速为120 00rmp， 时间为3 0min， 温度为 4℃。 7.根据权利要求1所述的一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方法， 其特征在 于： 步骤四中， 使用蒸馏水洗涤沉淀物若干次。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114948880 A 2一种咖啡酸 苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于食品与医药领域， 具体涉及一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制 备方法。 背景技术 [0002]咖啡酸苯乙酯(CAPE)是一种从蜂胶中提取的天然多酚类化合物， 由于其毒性低和 生物活性高等优点， 被广泛应用于食品和生物行业。 CAPE具有广泛的药理活性， 如抗氧化、 抗肿瘤、 抗菌等， 但 其作为脂溶性多酚化合物的代表， 水溶性较差， 生物利用度低， 在生物体 内容易被降解。 以上缺点使这类脂溶性活性物质难以在体内充分发挥生物活性， 阻碍了其 实际应用的进程。 为解决疏水性小分子水溶性差、 生物利用度低等问题， 现有研究主要将目 光聚焦于化学改性、 脂质体包裹等方向。 虽然这些方法在一定程度上解决了小分子的水溶 性问题， 但是化学改性副作用较大， 安全性不 足； 脂质体装载率较低， 其重量远远大于 芯材， 在生物体内降解和代谢 过程中可能会给身体带来 额外的负担 。 [0003]天然小分子是指从天然产物中提取的分子量较小的活性化合物， 具有生物安全性 好、 稳定性 强、 毒性低等优点。 其中天然萜类化合物(如齐墩果酸、 熊果酸、 松 香酸、 积雪草酸 等)独特的多 羟基结构使其可以通过自组装或共组装(依靠分子间氢键或疏水作用力)形成 不同形状和大小的纳米颗粒， 可用于递送疏水性化合物。 由于这些反应不涉及化学键的改 变， 因此无预期之外的副产物产生。 并且相比于脂质体、 蛋白质等递送体系， 天然小分子自 组装或共组装体系还 具有装载率高、 安全性好等优点。 积 雪草酸(ASA)是从天然草药积雪草 中提取的五环三萜化合物， 具有抗炎、 抗肿瘤、 创面愈合等药理活性， 并且对神经和肝脏细 胞具有保护作用。 积雪草酸特殊的多 羟基结构使其可以通过自组装或与其他小分子共组装 的方式形成外 部亲水， 内部疏 水的纳米结构， 进 而提升它 们的水溶性和生物利用度。 [0004]因此， 为了有效地改善CAPE的水溶性、 稳定性和生物利用度， 通过绿色制备技术， 依靠小分子间的非共价键作用制备一种亲水性的CAP E纳米稳定剂型是非常有吸引力的。 然 而， 迄今为止， 还未有相关报道涉及CAPE通过小分子共组装形成纳米稳定剂型以改善其体 内生物活性， 因此这方面的研究具有重要意 义。 发明内容 [0005]本发明为了解决CAPE体内稳定性差、 生物利用度低及现有药物运载体系的不足的 问题， 提供一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型(ASA ‑CAPE NPs)的制备 方法。 [0006]为实现上述目的， 本发明采取的技 术方案如下： [0007]一种咖啡酸苯乙酯纳米稳定缓释剂型的制备 方法， 包括以下步骤： [0008]步骤一、 将咖啡酸苯乙酯和积雪草酸共同溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶剂中， 得 到溶液A， 其中， 所述积 雪草酸和咖啡酸苯乙酯的质量比为 1:0.1‑1:0.5， 所述积 雪草酸与二 氯甲烷和甲醇的混合溶剂的质量体积比为5mg/ml， 二氯甲烷与甲醇的体积比为9:1； [0009]步骤二、 将溶液A加入到聚乙烯醇水溶液 Ⅰ中， 搅拌均匀， 使用超声细胞破碎仪超声说　明　书 1/6 页 3 CN 114948880 A 3