(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210583373.0 (22)申请日 2022.05.25 (71)申请人 广州医科 大学 地址 511436 广东省广州市番禺区新造镇 景秀路 (72)发明人 梁璐　徐文艳　张灵敏　余细勇　 申翱　岑慧裕　 (74)专利代理 机构 广州广典知识产权代理事务 所(普通合伙) 44365 专利代理师 万志香 (51)Int.Cl. C07K 7/08(2006.01) C07K 19/00(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/62(2017.01)A61K 31/7088(2006.01) A61K 31/7105(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种MMP酶响应型肿瘤靶向多肽载体及其应 用 (57)摘要 本发明提供一种递送核酸药物的多肽载体， 其氨基酸构成如SEQ  ID NO.1所示； 或其氨基酸 构成如SEQ  ID NO.2所示； 或其氨基酸构成如SEQ   ID NO.3所示。 本发明还提供了上述多肽载体的 应用以及相应的治疗肿瘤的核酸药物， 以及其制 备方法。 本发 明所设计的核酸递送载体可以提高 药物递送到肿瘤部位的效率， 提高对肿瘤的靶向 性， 另外， 当药物递送到肿瘤部位之后， 能够高效 释放， 确保治其在肿瘤部位发挥作用， 可 以减少 因靶向性不强而导致的药物对正常组织毒副作 用。 权利要求书1页 说明书8页 序列表2页 附图3页 CN 115385988 A 2022.11.25 CN 115385988 A 1.一种递送核酸药物的多肽载体， 其特征在于， 其氨基酸构成如SEQ  ID NO.1所示； 或 其氨基酸构成如SEQ  ID NO.2所示； 或其氨基酸构成如SEQ  ID NO.3所示。 2.权利要求1所述的多肽载体在递送MicroRNA药物中的应用。 3.一种治疗肿瘤的核酸药物， 其特征在于， 包括权利要求1所述的多肽载体和靶向肿瘤 的MicroRNA药物。 4.根据权利要求3所述的核酸药物， 其特 征在于， 所述肿瘤是M MP酶响应型肿瘤。 5.根据权利要求 4所述的核酸药物， 其特 征在于， 所述肿瘤是肺癌。 6.根据权利要求3所述的核酸药物， 其特征在于， 所述MicroRNA药物为miR ‑148a‑3p  mimics。 7.根据权利要求3所述的核酸药物， 其特征在于， 所述多肽载体与所述靶向肿瘤的 MicroRNA药物的质量用量比为3 0‑100： 1。 8.根据权利要求7所述的核酸药物， 其特征在于， 所述多肽载体与所述靶向肿瘤的 MicroRNA药物的质量用量比为5 0‑90： 1。 9.权利要求3 ‑7任一项所述治疗肿瘤的核酸药物的制备方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： (1)将所述多肽载体溶解于PBS， 得到多肽载体溶 液； (2)将靶向肿瘤的MicroRNA药物溶解于无核酶水， 得到 MicroRNA药物溶 液； (3)按照多肽载体与所述靶向肿瘤的MicroRNA药物的质量比比例为30 ‑100： 1的比例， 将多肽载体溶液与核酸药物溶液混合均匀， 室温静置10 ‑20min,静置过程中， 多肽与核酸通 过体外自组装初步形成纳米颗粒； (4)将制得的纳米颗粒通过梯度挤压得到粒径均一的纳米粒， 获得核酸药物。 10.根据权利要求9所述的制备方法， 其特征是， 所述步骤(4)包括： 先将所得纳米颗粒 使用挤膜器挤压通过孔径为 1 μm碳酸脂膜， 来回挤压过膜二十次， 再以相同方法依次挤压通 过孔径分别为 400nm、 200nm、 100nm的碳酸脂膜。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115385988 A 2一种MMP酶响应型肿瘤靶向多肽载体及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药领域， 涉及一种MMP响应型肿瘤靶向多肽纳米载体和其在抗 肿瘤领域的应用。 背景技术 [0002]肺癌是严重影响国民身体健康和生活质量的癌症之一， 据报道， 我国肺癌发病率 位居男性癌症发病率的首位， 在女性群体中， 肺癌发病率位居第二， 仅次于乳腺癌。 而肺癌 的死亡率在男性和女性患者中均位居 所有癌症死亡率之首， 由此可见肺癌对人类健康的危 害之大。 约85％的肺癌为非小细胞肺癌(non ‑ small cell lung cancer,NSCLC)， 其中约 60％为肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)。 肺腺癌常见于非吸烟者及女性， 由于早期无 明显症状， 肺腺癌确诊患者多为中晚期， 又由于转移和恶化、 缺乏有效的治疗靶点和治疗策 略导致肺腺癌患者预后较差、 死亡率较高。 因此， 迫切需要深入研究导致肺癌转移与恶化的 分子机制， 为肺癌的治疗提供新靶点、 新策略。 [0003]基质金属蛋白酶(matrix  metalloproteinase,MMP)， 是一个大家族， 包括MMP1、 MMP2、 MMP3、 MMP7、 MMP9等， 目前人们对MMP2的研究比较深入，  MMP酶能够降解细胞外基质中 的特定蛋白成分,破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障， 在肿瘤侵袭转移中起关键性作用， 其在 肿瘤浸润转移 中的作用日益受到重视。 研究表明， 在恶性肿瘤中， MMP2酶高表达， 而在正常 组织中低表达， 其 能够特异性识别并催化裂解Pro ‑Leu‑Gly‑Leu‑Ala‑Gly(PLGLAG)氨基酸 序列， 从而使含有PLGLAG序列的蛋白质或肽链断裂， 这使得使用含PLGLAG氨基酸序列的多 肽作为纳米载体能够 在肿瘤组织中释放药物。 [0004]肿瘤的发生与发展与原癌基因和抑癌基因的突变和表达异常密切相关， 通过核酸 药物沉默致癌基因或激活抑癌基因从而发挥抗肿瘤作用被广泛研究。 其中研究最多的是核 酸药物如siRNA和miRNA。 [0005]MicroRNA(miRNA)是一类内生的、 长度约为20 ‑24个核苷酸的小RNA， 其在细胞内具 有多种重要的调节作用。 每个 miRNA可以有多个靶基因， 而几个  miRNA也可以调节同一个基 因。 这种复杂的调节网络既可以通过一个miRNA来调控多个基因的表达， 也可以通过几个 miRNA的组合来精细调控某个基因的表达。 据推测， miRNA调节着人类三分之一的基因。 miRNA在进化上高度保守。  miRNA高度的保守性与其功能的重要性有着密切的关系 。 miRNA 作为药靶， 或是模拟这 一分子进行新药研发， 给 人类疾病的治疗提供一种新的手段。 [0006]使用miRNA用于癌症治疗的方法包括两类： (1)若肿瘤中的特定miRNA 过表达， 则采 取miRNA抑制疗法； (2)若肿瘤中miRNA表达被抑制， 则采取  miRNA替代疗法。 但如何实现 miRNA的高效递送是癌症基因治疗必须解决的问题之一。 由于将核酸药物递送至肿瘤部位 是其发挥抗肿瘤作用的前提， 但由于核酸药物分子量大， 电负性 强， 难以有效递送至肿瘤部 位， 且在体内易被降解， 从而导致治疗作用大幅降低。 因此， 需要使用特定的载体以提高核 酸药物的递送效率、 延长其在体内的滞留时间， 从而达到更好的疗效。 目前， 用于核酸递送 的载体主要有脂质体、 有机聚合物、 无机纳米颗粒等， 虽然这些核酸递送载体被广泛研究，说　明　书 1/8 页 3 CN 115385988 A 3