(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210571890.6 (22)申请日 2022.05.25 (71)申请人 中国医学 科学院放射医学研究所 地址 300192 天津市南 开区白堤路238号 (72)发明人 刘鉴峰　任春华　王志龙　杨翠红　 王忠彦　杨丽军　肖萌　张嘉敏　 (74)专利代理 机构 天津市杰盈专利代理有限公 司 12207 专利代理师 朱红星 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 47/60(2017.01) A61K 31/196(2006.01) A61K 38/08(2019.01) A61K 41/00(2020.01)A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 一种激活Hippo通路的超分子纳米药物及其 制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向激活癌细胞内Hippo 通路的超分子纳米药物与应用。 它是将含有双重 药物组分的疏水性短肽片段与亲水性聚乙二醇 片段， 通过二硫键连接得到的两亲性化合物 Fmoc‑S(FA)FFYS V‑SS‑PEG(FASP)。 该化合物能够 通过分子间非共价相互作用自组装形成无活性 的纳米前药， 被癌细胞摄取后发生形态转变， 原 位形成活性肽纳米纤维 并释放出氟灭酸 （FA） ， 从 而激活失调的Hippo通路用于肿瘤放化疗联合治 疗及转移抑制， 其特点是： 合成简单， 可重复性 高， 生物相容性好， 临床转化潜力大。 同时， 与游 离FA相比， 本发明得到的超分子纳米药物能够通 过共价连接递送和响应性原位释放， 显著提高FA 对肿瘤细胞的生长抑制 效果并降低其对正常细 胞的毒副作用， 具有良好的临床转化和应用前 景。 权利要求书2页 说明书9页 附图5页 CN 114788875 A 2022.07.26 CN 114788875 A 1.一种靶向激活癌细胞内Hippo通路的超分子纳米药物， 其特征在于它是将含有双重 药物组分的疏水性短肽片段与亲水性聚乙二醇片段通过二硫键共价连接， 得到的两亲性化 合物能够在水溶液中通过分子间非共价键相互作用自组装形成微观形貌为球形胶束的纳 米前药， 其化学结构如下： 其中Fmoc ‑S(FA)为侧链羟基修饰小分子药物FA， 氨基端修饰Fmoc的丝氨酸； FFYSV为苯 丙氨酸‑苯丙氨酸‑酪氨酸‑丝氨酸‑缬氨酸残基构成的短肽， SS为二硫键， P EG为聚乙二醇片 段。 2.权利要求1所述靶向激活癌细胞内Hippo通路的超分子纳米药物的制备方法， 其特征 在于按如下的步骤进行： 以Fmoc‑Wang‑Gly树脂为载体， 在定制的合成管里加入10 ‑20 mL DMF使其充分溶胀后 切除Fmoc保护 基， 按照多肽Fmoc固相合成标准方法， 先后依次加入Fmoc ‑PEG、 Fmoc ‑SS以及 Fmoc保护的氨基酸 （Val、 Ser、 Tyr、 Phe） ， 最后加入Fmoc ‑Ser(FA)‑COOH， 反应完成后， 加入 10‑20 mL的95%三氟乙酸反应1 ‑2 h从树脂上将多肽衍生物切割， 通过反相HPLC分离纯化得 到目的产物； 其中， 所述的Fmoc ‑Ser(FA)‑COOH制备方法如下： 将2 mmol FA和2 mmol Fmoc‑Ser‑OtBu溶于10 ‑25 mL无水二氯甲烷中， 加入3  mmol  EDCI和0.3  mmol DMAP （室温下搅拌反应24 ‑48 h； 旋蒸除去二氯甲烷后， 浓缩液通过硅胶层 析柱分离得到浅黄色中间产物Fmoc ‑Ser(FA)‑OtBu； 在中间产物中加入5 ‑10 mL三氟乙酸， 室温搅拌 反应1‑2 h脱去保护基团， 无 水乙醚溶解干燥后得到产物Fmoc ‑Ser(FA)‑COOH； 。 3.权利要求1所述靶向激活癌细胞内Hippo通路的超分子纳米药物在提高抗肿瘤药物 方面的应用： 其中激活Hippo通路， 指的是纳米前药在癌细胞内高表达的谷胱甘肽和酯酶的 作用下发生结构转变， 原位形成Fmoc ‑SFFYSV纳米纤维从Hippo通路上游调控MST1激酶的活 性， 促进YAP磷酸化失活； 原位释放的游离小分子药物氟灭酸 （FA） 则进入细胞核与Hippo通 路下游转录因子家族TEAD结合， 进而上下游协同作用有效抑制YAP ‑TEAD相互作用， 最终抑 制促存活基因的转录表达； 其中提高抗肿瘤药物指的是相较于游离小分子药物FA， 纳米前 药递送系统能够提高FA的溶解性和细胞利用度， 并通过YSV的协同作用最终提高其对肿瘤权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114788875 A 2细胞的生长抑制效果。 4.权利要求3所述应用， 其中提高抗肿瘤药物方面的应用指的是FASP联合放疗后显著 提高三阴性乳腺癌的存活率。 5.权利要求3所述应用， 其中提高抗肿瘤药物方面的应用指的是FASP显著抑制肿瘤肝 脏的转移。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114788875 A 3