(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210582283.X (22)申请日 2022.05.26 (71)申请人 南京医科 大学 地址 211166 江苏省南京市江宁区龙眠大 道101号 (72)发明人 陈云　孙硕　魏良念　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 吴爽　徐冬涛 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 9/06(2006.01) A61K 31/7076(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61K 47/32(2006.01)A61K 47/34(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种辐射敏感性水凝胶及其制备方法和应 用 (57)摘要 本发明公开了一种辐射敏感性水凝胶及其 制备方法和应用， 所述水凝胶的制备包括如下步 骤： 在常温条件下， 向质量浓度3~9%PVA溶液中加 入药物， 混匀， 然后将质量浓度6~9%TSPBA快速加 入到该混合液中混合， 静止， 即可。 在药物为AAV ‑ PD1和ADU ‑S100时， 将含有AAV ‑PD1和ADU ‑S100的 水凝胶和 RT联合治疗胶质母细胞瘤 （GBM） 时， 对 比传统的免疫治疗联合放射治疗能显著抑制胶 质母细胞瘤 （GBM） 复发， 经联合治疗的小鼠组未 发生肿瘤复发； 本发明的联合治疗 方案对比传统 的免疫治疗联合放射治疗能延长术后小鼠生存 期， 60%的小鼠实现了 长期生存。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 115006528 A 2022.09.06 CN 115006528 A 1.一种辐射敏感性水凝胶的制备方法， 其特征在于， 包括如下步骤： 在常温条件下， 向 质量浓度3~9% PVA溶液中加 入药物， 混匀， 然后将质量浓度6~9% TSPBA快速加 入到该混合 液中混合， 静止， 即可。 2.根据权利要求1所述的一种辐射敏感性水凝胶的制备方法， 其特征在于， 所述药物为 AAV‑PD1和/或ADU ‑S100。 3.根据权利要求2所述的一种辐射敏感性水凝胶的制备方法， 其特征在于， 所述AAV ‑ PD1的浓度为3 ×107 IU/mL。 4.根据权利要求2所述的一种辐射敏感性水凝胶的制备方法， 其特征在于， 所述ADU ‑ S100的质量浓度为0.04%。 5.根据权利要求1 ‑4任一所述的一种辐射敏感性水凝胶的制备方法， 其特征在于， 包括 如下步骤： 常温条件下， 向质量浓度6%  PVA溶液中加入3 ×107 IU/mL AAV‑PD1和质量浓度 0.04%的ADU ‑S100， 涡旋使其充分混匀， 然后将质量浓度6%TSPBA快速加入到该混合液中混 合， 静止10秒钟， 构建成治疗药物 ADU‑AAV‑PD1@Gel药物。 6.根据权利要求1 ‑4任一所述的一种辐射敏感性水凝胶的制备方法， 其特征在于， 所述 TSPBA的制备如下： 将PBA加入过量 4‑（溴甲基） 苯硼酸进行 季铵化反应， 即可。 7.权利要求1 ‑6任一制备 方法制备 得到的辐射敏感性水凝胶。 8.权利要求7所述的辐射敏感性水凝胶在制备治疗多形性胶质母细胞瘤的药物中的应 用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115006528 A 2一种辐射敏感性水凝胶及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明属于肿瘤治疗领域， 具体涉及一种辐射敏感性水凝胶及其制备方法和应 用。 背景技术 [0002]尽管免疫治疗改变了许多肿瘤的治疗格局， 但仍不能提高多形性胶质母细胞瘤 (GBM)患者的生存率。 手术和术后辅助放化疗仍是GBM的主要治疗 方法。 放疗(RT)是预防GBM 术后复发的第一种治疗方法， 但临床疗效仍然很差。 大多 数GBM患者在放疗过程中由于抗辐 射而发生肿瘤复发。 因此， 如何有效地抑制GBM术后复发仍是一个令人困惑的临床问题。 [0003]近年来， 依赖于RT对肿瘤微环境(TME)的调节作用的放射免疫治疗已成为治疗各 种恶性肿瘤的一种有 前途的方法。 RT诱导免疫原性细胞死亡(ICD)  并促进肿瘤CXCL10的转 录， 从而将更多T细胞招募到TME中。 然而， 大量证据表 明， GBM的免疫原性明显较差， 仅RT只 能诱导低水平的ICD， 这不足以诱导免疫应答。 此外， GBM独特的免疫抑制 TME进一步限制了 RT治疗后T细胞的浸润。 [0004]重组腺相关病毒(rAAV)是一种新兴的高效基因治疗载体， 能够将治疗基因有效地 携带到宿 主细胞中， 并持续表达治疗蛋白。 克服血脑屏障(BBB)的阻断和抗PD ‑1药物的靶向 效应， 提高脑肿瘤部位的药物效率。 我们将治疗性PD ‑1 基因引入rAAV， 并希望治疗性rAAV (AAV‑PD1)能够有效地转运肿瘤细胞并稳定表达治疗性PD ‑1蛋白， 其可以结合到肿瘤细胞 的PD‑L1受体， 从而阻断肿瘤细胞与T细胞之间的PD ‑1/PD‑L1相互作用。 这只是提高GBM放射 免疫治疗效果的第一 步。 另一个问题是如何招募更多的T细胞进入GBM的TM E。 [0005]ADU‑S100， 一种STING激动剂， 可激活STING通路并诱导趋化因子的产生， 以促进T 细胞渗入TME。 STING通路 的激活还可以激活固有免疫系统， 从而产生强大的抗肿 瘤免疫反 应。 [0006]为了更好地发挥药物的治疗效果。 我们开发了一种辐射敏感性水凝胶药物组合， 凝胶作为AAV ‑PD1和ADU ‑S100的药物库， 可以持续释放药物， 提高药物效率。 肿瘤微环境中 的ROS浓度相对较低， 可能难以触发药物从水凝胶中释放。 但是RT 可以诱导活性氧的持续产 生， 活性氧被用来触发药物释放。 发明内容 [0007]针对现有问题的不足， 本发明的目的是提供一种辐射敏感性水凝胶及 其制备方法 和应用。 [0008]本发明解决其 技术问题采用的技 术方案是： [0009]本发明首先保护一种辐射敏感性水凝胶的制 备方法， 包括如下步骤： 在常温条件 下， 向质量浓度3～9％PVA溶液中加入药物， 混匀， 然后将质量浓度6～9 ％ TSPBA快速加入 到该混合液中混合， 静止， 即可。 [0010]作为本申请的优选技 术方案， 所述药物为A AV‑PD1和/或ADU ‑S100。说　明　书 1/4 页 3 CN 115006528 A 3