(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210578560.X (22)申请日 2022.05.26 (71)申请人 苏州大学 地址 215123 江苏省苏州市苏州工业园区 仁爱路199号 (72)发明人 杨凯　施秀敏　 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 马欢欢 (51)Int.Cl. C07K 14/47(2006.01) C07K 1/13(2006.01) C07K 1/16(2006.01) A61K 51/08(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61P 35/04(2006.01) A61K 103/30(2006.01) A61K 103/00(2006.01) (54)发明名称 一种核素标记的抑制肽及其制备方法和应 用 (57)摘要 本发明涉及肿瘤预后技术领域， 尤其涉及一 种核素标记的抑制肽及其制备方法和应用。 本发 明所述核素标记的抑制肽通过DOTA将68Ga/177Lu 标记ASF1a肽； 所述ASF1a肽的氨基酸序列为 YGRKKRRQRRRCASTEEKWARLARRIAGAGGVTLDGFGGCA。 本发明所述的68Ga标记的ASF1a抑制肽， 通过 PET/CT显像显示肿瘤ASF1a表达水平， 显像灵敏 度好， 能够特异性的筛选高表达及低表达个体， 实现无创预测肿瘤免疫治疗疗效。177Lu标记的 ASF1a抑制肽对高表达ASF1a而免疫治疗无效的 肿瘤提供一种新的有效的治 疗策略。 权利要求书1页 说明书10页 序列表1页 附图7页 CN 114874308 A 2022.08.09 CN 114874308 A 1.一种核素标记的抑制肽， 其特征在于， 所述核素标记的抑制肽通过DOTA将68Ga/177Lu 标记ASF1a肽； 所述ASF1a肽的氨基酸序列 为YGRKKRRQRRRCASTEEKWA RLARRIAGAGGVTLD GFGG CA。 2.权利要求1所述核素 标记的抑制肽的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)将DOTA偶联的ASF1a肽与核素溶液混合， 得混合液， 将混合液与醋酸钠混合， 调整 pH， 水浴， 得反应液； (2)将步骤(1)得到的反应液 过色谱柱， 收集产物。 3.根据权利要求2所述的一种核素标记的抑制肽的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)所 述核素溶液为68GaCl3溶液或177LuCl3/HCl溶液； 所述68GaCl3溶液或177LuCl3/HCl溶液的放射 量独立为111～185MBq。 4.根据权利 要求3所述的一种核素标记的抑制 肽的制备方法， 其特征在于， 所述68GaCl3 溶液的制备 方法为： 用盐酸淋洗68Ge‑68Ga发生器， 收集中间产物68GaCl3； 盐酸用量 为4mL， 所述中间产物为68Ge‑68Ga发生器流出的第2 ～3mL。 5.根据权利要求4所述的一种 核素标记的抑制肽的制备方法， 其特征在于， 所述盐酸的 浓度为0.04～0.0 6M； 所述68Ge‑68Ga发生器的流速为0.8～1.2mL/mi n。 6.根据权利要求2所述的一种核素标记的抑制肽的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)所 述DOTA偶联的ASF1a肽的浓度为0.8～1.2mg/mL； 所述DOTA偶联的ASF1a肽与核素溶液的体 积比为0.01～0.0 3： 1.00～3.00。 7.根据权利要求2所述的一种核素标记的抑制肽的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)所 述DOTA偶联的ASF1 a肽与醋酸钠的体积比为15～25:250～350； 所述醋酸钠的浓度为0.23～ 0.27M； 所述调整pH为3.8～4.2。 8.根据权利要求2所述的一种核素标记的抑制肽的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)所 述水浴的温度为93～ 97℃； 步骤(2)所述色谱柱为C18小柱。 9.根据权利要求3所述的一种 核素标记的抑制肽的制备方法， 其特征在于， 当核素溶液 为68GaCl3溶液时， 所述水浴的时间为8～12min； 当核素溶液为177LuCl3/HCl溶液时， 所述水 浴的时间为25～3 5min。 10.权利要求1所述的核素标记的抑制肽、 权利要求2～9任一项所述的一种 核素标记的 抑制肽的制备方法制备得到的核素标记的抑制肽在制备抗肿瘤药物或PET/CT显像剂中的 应用， 其特 征在于， 所述肿瘤为 黑色素瘤、 肺癌、 肺转移癌和乳腺癌中的一种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114874308 A 2一种核素标记的抑制肽及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及肿瘤预后技术领域， 尤其涉及 一种核素标记的抑制肽及其制备方法和 应用。 背景技术 [0002]近年来， 免疫疗法通过利用免疫系统的力量来抗击癌症， 从而彻底改变了癌症研 究领域。 免疫治疗已成为当今癌症治疗的重要手段， 但事实上只有少数(不到20％)的患者 可以从抗PD ‑1/PD‑L1免疫治疗中受益， 而且这些患者中有20～40％发生了严重的不良事 件。 识别哪些患者更有 可能从免疫检查点阻断(ICB)中受益， 并将疗效最大化和毒性降至最 低， 具有重要意 义。 [0003]ASF1a促进了肿瘤 免疫的抑制 。 ASF1a在包括黑色素瘤、 LUAD在内的多种原发人类 肿瘤中过度表达。 已有研究表明在肝细胞癌患者中， ASF1a的高表达与显著较差的预后相 关。 ASF1a是一个潜在的治疗 靶点。 [0004]ASF1是一种组蛋白H3 ‑H4伴侣， 从酵母到人类细胞都是保守的。 ASF1a和ASF1b是哺 乳动物的异构体， 参与DNA复制偶联和DNA复制非复制的核小体组装途径。 ASF1还在基因转 录调控中发挥作用。 例如， ASF1 a在胚胎干细胞分化过程中解析二价 染色质结构域以诱导谱 系特异性基因。 功能和机制研究表明， ASF1a缺陷通过促进M1样巨噬细胞极化和增强T细胞 活化， 使LUAD肿瘤对抗PD ‑1治疗增敏。 ASF1 a是免疫治疗的负性调节因子， 通过设计的PET探 针可视化动态监测肿瘤ASF1a表达水平， 并根据ASF1a表达水平来制定癌症患者的治疗策 略。 [0005]因此， 如何针对ASF1a靶点， 设计并提供一种靶向ASF1a的核素标记的多肽， 并将 其 应用在肿瘤免疫 治疗的预后当中， 是本领域 技术人员亟需解决的问题。 发明内容 [0006]本发明的目的在 于针对ASF1a靶点， 设计并提供一种靶向ASF1a的镓标记的多肽在 预测肿瘤免疫治疗耐药的PET/CT显像剂的应用。 通过1.11～3.7MBq给药即可清晰显影， 预 测免疫治疗疗效， 可在短期内重复显像， 动态监测免疫治疗， 同时针对筛选出的ASF1a高表 达的免疫耐药个体进行同位素标记多肽靶向治疗， 提供一种有效的治疗策略， 本发明方法 不仅限于皮肤 黑色素瘤， 更适用于ASF1a 高表达的肿瘤， 如肺癌、 肺转移癌、 乳腺癌等。 [0007]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0008]本发明提供了一种核素标记的抑制肽， 所述核素标记的抑制肽通过DOTA将68Ga/ 177Lu标记ASF1a肽； 所述ASF1a肽的氨基酸序列 为YGRKKRRQRRRCASTEEKWA RLARRIAGAGGVTLD GFGGCA(如SEQ  NO:1所示)(ASF1a  Peptide， AP1)， 分子量(MW)4952.62。 核素标记位置是示 意图1中 代表的位置， DOTA的四氮杂环上。 [0009]本发明还提供了所述核素 标记的抑制肽的制备 方法， 包括如下步骤： [0010](1)将DOTA偶联的ASF1a肽与核素溶液混合， 得混合液， 将混合液与醋酸钠混合， 调说　明　书 1/10 页 3 CN 114874308 A 3