(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210590472.1 (22)申请日 2022.05.27 (66)本国优先权数据 202110595203.X 2021.0 5.28 CN (71)申请人 百奥赛图江苏基因生物技 术有限公 司 地址 226133 江苏省南 通市海门市临江新 区生物医药 科创园B10楼 申请人 百奥赛图 （北京） 医药 科技股份有限 公司 (72)发明人 周小飞　尚诚彰　刘重慧　 (74)专利代理 机构 北京领科知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 11690 专利代理师 徐丹丹　杨晞(51)Int.Cl. C07K 14/715(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/85(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A01K 67/027(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01) C12Q 1/02(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61K 49/00(2006.01) A61K 45/00(2006.01) (54)发明名称 IL1RAP基因人源化非人动物的构建方法及 应用 (57)摘要 本发明提供了一种IL1RAP基因人源化的非 人动物及其构建方法、 一种人源化IL1RAP蛋白、 一种人源 化IL1RAP基因、 一种IL1RAP基因的靶向 载体和其在生物医药领域的应用， 利用同源重组 的方式将编码人IL1RAP蛋白的核苷酸序列导入 非人动物基因组中， 该动物体内能正常表达人或 人源化IL1RAP蛋白， 可以作为人IL1RAP信号机理 研究、 肿瘤及自身免疫性疾病药物筛选的动物模 型， 对免疫靶点的新药研发具有重要的应用价 值。 权利要求书4页 说明书23页 序列表20页 附图3页 CN 114835799 A 2022.08.02 CN 114835799 A 1.一种人源化IL1RAP蛋白， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP蛋白包含人IL1RAP蛋白 的全部或部分。 2.根据权利 要求1所述的人源化IL1RAP蛋白， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP蛋白包 含人IL1RAP蛋白的胞外区， 优选还包含人IL1RAP蛋白的信号肽， 进一步优选还包含非人动 物IL1RAP蛋白的跨膜区和胞质区； 再进一步优选的， 所述的人IL1RAP蛋白的胞外区包含SEQ  ID NO： 2第21 ‑367位所示氨 基酸序列； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 2第21 ‑367位所示氨基酸序列同一性至少为90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％； 再进一步优选的， 所述 的人IL1RAP蛋白的信号肽包含SEQ  ID NO： 2第1‑20位所示氨基 酸序列； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 2第1 ‑20位所示氨基酸序列同一性至少为90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％； 再进一步优选的， 所述的非人动物IL1RAP蛋白的跨膜区和胞质区包含SEQ  ID NO： 1第 368‑570位所示氨基酸序列； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 1第368 ‑570位所示氨基酸序列同一性 至少为90％、 91％、 9 2％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％。 3.根据权利要求1 ‑2任一所述的人源化IL1RAP蛋白， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP 蛋白的氨基酸序列包 含下列组中的任一种： A)SEQ ID NO： 8所示氨基酸序列； B)与SEQ ID NO： 8所示氨基酸序列同一性至少为85％、 90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％； C)与SEQ ID NO： 8所示氨基酸序列差异不超过10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2或不超过1个氨基 酸； 或 D)与SEQ ID NO： 8所示的， 包括取代、 缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基 的氨基酸 序列。 4.一种人源化IL1RAP基因， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP基因包含人IL1RAP基因 的部分； 优选的， 所述的人源化 IL1RAP基因编码权利要求1 ‑3任一所述的人源化 IL1RAP蛋白。 5.根据权利 要求4所述的人源化IL1RAP基因， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP基因包 含人IL1RAP基因的2号至9号外显子的全部或部分核苷酸序列， 优选包含人IL1RAP基因的2 号外显子的部分至9号外显子的部分核苷酸序列， 其中， 2号外显子的部分至少 包含20bp的 核苷酸序列， 9号外 显子的部分至少包 含20bp的核苷酸序列； 进一步优选的， 所述的人源化IL1RAP基因包含SEQ  ID NO： 5所示的核苷酸序列； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 5所示的核苷酸序列的同一性至少为90％、 91％、 92％、 9 3％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少99％； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 5所示的核苷酸序列差异不超过10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2或不超过 1个核苷酸； 或者， 包含具有SEQ  ID NO： 5所示的核苷酸序列所示 的， 包括取代、 缺失和/或插 入一个或多个核苷酸的核苷酸序列。 6.根据权利要求4 ‑5任一所述的人源化IL1RAP基因， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP 基因包含非人动物IL1RAP基因的9号外显子的部分至11号外显子的部分， 其中， 9号外显子 的部分至少包 含30bp的核苷酸序列， 1 1号外显子的部分至少包 含100bp的核苷酸序列； 优选的， 所述的人源化IL1RAP基因包含SEQ  ID NO： 6所示的核苷酸序列； 或者， 包含与权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 114835799 A 2SEQ ID NO： 6所示的核苷酸序列的同一性至少为90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少99％； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 6所示的核苷酸序列差异不超 过10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2或不超过1个核苷酸； 或者， 包含具有SEQ  ID NO： 6所示的核苷酸序列所示的， 包 括取代、 缺失和/或插 入一个或多个核苷酸的核苷酸序列。 7.根据权利要求4 ‑6任一所述的人源化IL1RAP基因， 其特征在于， 所述的人源化IL1RAP 基因的核苷酸序列包 含下列组中的任一种： A)转录的mRNA包 含SEQ ID NO： 7所示核苷酸序列； B)转录的mRNA与SEQ  ID NO： 7所示核苷酸序列的同一性至少为85％、 90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％； C)转录的mRNA与SEQ  ID NO： 7所示核苷酸序列差异不超过10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2或不超 过1个核苷酸； D)转录的mRNA具有SEQ  ID NO： 7所示核苷酸序列的， 包括取代、 缺失和/或插入一个或 多个核苷酸的核苷酸序列； 或， E)SEQ ID NO： 35所示核苷酸序列； F)与SEQ ID NO： 35所示核苷酸序列的同一性至少为85％、 90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％； G)与SEQ ID NO： 35所示核苷酸序列 差异不超过10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2或不超过1个核苷 酸； H)具有SEQ  ID NO： 35所示核苷酸序列的， 包括取代、 缺失和/或插入一个或多个核苷酸 的核苷酸序列。 8.一种靶向载体， 其特 征在于， 所述的靶向载体包 含下列组中的一种： A)编码权利要求1 ‑3任一所述的人源化 IL1RAP蛋白的核苷酸序列； B)编码人IL1RAP蛋白的胞外区的核苷酸序列， 优选还包含编码人IL1RAP蛋白的信号肽 的核苷酸序列， 进一步优选包含编码SEQ  ID NO： 2第1‑20、 21‑367或1‑367位所示氨基酸序 列； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 2第1 ‑20、 21‑367或1‑367位所示氨基酸序列同一性至少为 90％、 91％、 9 2％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％的核苷酸序列； C)权利要求 4‑7任一所述的人源化 IL1RAP基因； 或， D)人IL1RAP基因的2号外显子的部分至9号外显子的部分， 其中， 2号外显子的部分至少 包含20bp的核苷酸序列， 9号外显子的部分至少包含20bp的核苷酸序列； 优选包含SEQ  ID  NO： 5所示核苷酸序列； 或者， 包含与SEQ  ID NO： 5所示的核苷酸序列的同一性至少为90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或至少9 9％。 9.根据权利要求8所述的靶向载体， 其特征在于， 所述的靶向载体还包含5 ’臂和/或3 ’ 臂， 其中， 所述的5 ’臂与NCBI登录号