(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210591054.4 (22)申请日 2022.05.27 (71)申请人 中山大学附属第三医院 地址 510630 广东省广州市天河路6 00号 申请人 中山大学 (72)发明人 李明强　郑跃　陶玉　雎恩国　 彭梦然　 (74)专利代理 机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 专利代理师 刘晓娟 (51)Int.Cl. A61K 33/242(2019.01) A61K 33/00(2006.01) A61K 33/34(2006.01) A61K 31/787(2006.01)A61K 31/7024(2006.01) A61K 33/26(2006.01) A61K 33/40(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 胞内自供给过氧化氢的纳米材料及其制备 方法和应用 (57)摘要 本申请属于生物医药技术领域， 尤其涉及胞 内自供给过氧化氢的纳米材料及其制备方法和 应用。 本申请提供了胞内自供给过氧化氢的纳米 材料的制备方法， 包括： 将纳米酶、 丹宁酸、 三价 铁盐和溶剂混合反应； 将得到的固体洗涤后为胞 内自供给过氧化氢的纳米材料； 所述纳米酶为具 有葡萄糖氧化酶活性的纳米酶。 本申请提供了胞 内自供给过氧化氢的纳米材料及其制备方法和 应用， 提供了一种具有化学动力学疗效的材料， 能有效解决现有化学动力学治疗方法中存在的 因过氧化氢含量不足导致的肿瘤治疗效率低的 问题。 权利要求书1页 说明书8页 附图17页 CN 114917248 A 2022.08.19 CN 114917248 A 1.胞内自供 给过氧化氢的纳米材 料的制备 方法， 其特 征在于， 包括： 将纳米酶、 丹宁酸、 三价铁盐和溶剂混合反应； 将得到的固体洗涤后为胞内自供给过氧 化氢的纳米材 料； 所述纳米酶为具有葡萄糖氧化酶活性的纳米酶。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述纳米材料为核壳结构的纳米颗 粒， 所述纳米颗粒的粒径范围为10～5 00nm。 3.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述纳米酶选自纳米金球、 石墨相氮 化碳、 氧化亚铜/聚吡咯复合物、 含纳米金球的复合材 料中的一种或多种。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述纳米金通过柠檬酸钠还原法制备 得到。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述三价铁盐选自氯化铁、 硝酸铁、 硫 酸铁等三价铁离子的溶液中的一种或多种； 所述溶剂选自水、 醇中的一种或多种。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述纳米酶、 所述丹宁酸和所述三价 铁盐的摩尔浓度比为1:(3 0～1500):(30～1500)。 7.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述制备方法具体包括： 将所述纳米 酶、 所述丹宁酸和所述溶剂混合反应， 离心洗涤后得到反应物； 将所述反应物、 所述三价铁 盐和所述溶剂混合反应， 离心洗涤后得到胞内自供 给过氧化氢的纳米材 料。 8.胞内自供给过氧化氢的纳米材料， 其特征在于， 包括如权利要求1～7任意一项所述 的制备方法制得的纳米材 料。 9.权利要求1～7任意一项所述的制备方法制得的纳米材料或权利要求8所述的纳米材 料在制备治疗恶性 黑色素瘤药物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述治疗恶性黑色素瘤药物的给药方式 选自原位注射、 静脉注射和肺部 雾化给药中的一种或多种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114917248 A 2胞内自供给过氧化氢的纳米材料及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本申请属于生物医药技术领域， 尤其涉及胞内自供给过氧化氢的纳米材料及 其制 备方法和应用。 背景技术 [0002]恶性黑色素瘤是临床上较为常见且发病率增长最快的恶性肿瘤之一， 年增长率为 3％‑5％。 其恶性程度高， 转移发生早， 死亡率高， 预后 极差， 对临床上的治疗提出了极大的 挑战。 临床上治疗恶性黑色素瘤主要有手术切除、 放疗、 化疗、 靶向治疗以及免疫疗法。 手术 治疗是恶性黑色素瘤的主要治疗方式， 通过病灶扩大切除和前哨淋巴结活检及淋巴结清扫 可以实现某些早期恶性黑色素瘤的治愈， 但存在着术后肿瘤残留、 复发、 转移及手术并发症 等风险。 放射治疗的效果仅局限在接受照射区域内的病灶部位， 且疗效对肿瘤含氧状态和 生长周期依赖性大， 疗程长， 副作用多。 化疗药物如达卡巴嗪、 替莫唑胺等可有效地杀灭肿 瘤细胞， 但其缺陷在于毒副作用大， 容易破坏患者的免疫功能， 进而造成体内残存的癌细胞 扩散加快。 靶向治疗主要 是针对恶性黑色素瘤中最常出现异常的MAPK通路和C ‑KIT通路， 相 应的两个突变位点为BRAF ‑V600E位点和C ‑KIT位点， BRAF抑制剂通过抑制BRAF蛋 白活性从 而有效抑制MAPK通路的异常活跃。 同理， MEK抑制剂也可以抑制BRAF下游的活性 从而抑制肿 瘤发展。 然而靶向治疗只适用于具有相应突变的肿瘤患者， 并非对所有患者适用。 免疫疗法 作为近年来癌症研究最热门的领域， 主要有白细胞介素、 干扰素、 免疫检查点抑制剂(抗 CTLA‑4抗体、 PD ‑1单抗和PD ‑L1单抗)， 其中免疫检查点抑制剂对恶性黑色素瘤有不错的治 疗效果， 但价格昂贵， 可能会出现免疫性肺炎、 免疫性心肌炎等副作用， 且可能出现耐药 的 情况。 基于活性氧自由基的抗癌疗法近年来得到了广泛的关注， 主要包括光动力学疗法、 声 动力学疗法以及化学动力学疗法。 单线态氧是光动力学和声动力学疗法的活性成分， 但需 要借助外部能量(光、 超声)来生成， 且具有暗毒性、 氧依赖性等问题。 而化学动力学疗法主 要利用过渡 金属离子(如铁、 铜、 锰、 钴等)作为催化剂， 催 化歧化癌细胞的内源过氧化氢， 产 生羟基自由基， 从而导致线粒体破坏、 细胞脂质氧化、 蛋白失活， 最终导致癌细胞凋亡或死 亡， 实现肿瘤微环 境特异性激活的高效杀伤肿瘤的目的。 相比化学治疗和放射疗法而言， 化 学动力学具有以下优势： (1)更具肿瘤特异性和选择性， 全身毒副作用低； (2)治疗过程无需 外场激发， 对设备要求低， 治疗费用低； (3)最 终产物为生物安全的金属离子， 避免了传统药 物载体在体内长期滞留引发的潜在毒性。 目前， 化学动力学在抗癌领域已有应用， 如博来霉 素、 蒽环类药物等DNA靶向药物， 其作用过程需要联合铁离子， 催化芬顿反应产生 自由基来 破坏DNA。 近年来， 科研人员借助于纳米技术和纳米材料， 并结合肿瘤独特的微环 境， 如弱酸 性、 过氧化氢过表达、 过氧化氢酶的低活性和乏氧等， 提高芬顿/类芬顿反应在肿瘤细胞内 的效率， 从而显著提升化学动力学的疗效， 为肿瘤高效治疗提供了新方案。 近年来， 尽管化 学动力学疗法在治疗肿瘤上取得了快速的发展， 但其在临床转化过程中仍面临着诸多挑 战。 其中最为关键问题在于， 由线粒体生成的内源过氧化氢在靠近芬顿催化剂前， 易被细胞 内过氧化氢酶和过氧化物酶等清除， 导致化学动力学效率低下。 因此， 研制开 发出过氧化氢说　明　书 1/8 页 3 CN 114917248 A 3