(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210599193.1 (22)申请日 2022.05.30 (71)申请人 华南师范大学 地址 510631 广东省广州市天河区中山大 道西55号华南师范大学 (72)发明人 黄儒强　刘思思　王艺　张彤赫　 江志文　 (74)专利代理 机构 广州市华学知识产权代理有 限公司 4 4245 专利代理师 郭炜绵 (51)Int.Cl. A61K 31/715(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 8/73(2006.01)A61Q 19/00(2006.01) C08B 37/00(2006.01) (54)发明名称 覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制 剂中的应用 (57)摘要 本发明公开了覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤 药物和抗炎制剂中的应用， 所述的覆盆子多糖R2 由以下步骤制得： 取覆盆子干果粉碎、 过筛， 然后 加水加热浸提， 将浸提液浓缩和过滤， 得覆盆子 粗多糖； 将覆盆子粗多糖脱蛋白， 然后上DEAE琼 脂糖凝胶柱， 先用去离子水洗脱， 再用0.3mol/L 的NaCl溶液洗脱， 最后用0.4mol/L的NaCl溶液洗 脱， 直至洗脱液不再含有多糖， 合并0.4mol/L的 NaCl溶液洗脱液， 经透 析后， 得到覆盆子多糖R2 。 采用本发明的提取方法不影响覆盆子多糖的生 物活性， 所得到的多糖纯品在抗肿瘤、 抗炎、 保湿 方面具有显著效果， 且细胞毒性试验证明多糖在 测试范围内无毒， 可进一步用于保健品、 药品及 化妆品的开发。 权利要求书1页 说明书7页 附图5页 CN 114917246 A 2022.08.19 CN 114917246 A 1.覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用， 其特 征在于： 所述的覆盆子多糖R2由以下步骤制得： (1)取覆盆子干果粉碎、 过筛， 然后加水加热浸提， 将浸提液浓缩和过滤， 得覆盆子粗多 糖； (2)将覆盆子粗多糖脱蛋白， 然后上DEAE琼脂糖凝胶柱， 先用去离子水洗脱至少三个柱 体积， 再用0.3mol/L的NaCl溶液洗脱3 ‑5个柱体积， 最后用0.4mol/L的NaCl溶液洗脱， 直至 洗脱液不再含有 多糖， 合并0.4mo l/L的NaCl溶 液洗脱液， 经透析后， 得到覆盆子多糖R2； 所述的肿瘤为宫颈癌、 肝癌和结肠癌。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 所述覆盆子多糖R2 的单糖组成为： 阿拉伯 糖(Ara)： 半乳糖醛酸(Gal ‑UA)： 半乳糖(Gal)： 鼠李糖(Rha)： 木糖(Xyl)： 葡萄糖醛酸(Glc ‑ UA)： 葡萄糖(Glc)： 甘露糖(Man)： 岩藻糖(Fuc)： 古罗糖醛酸(Gul ‑UA)： 核糖(Rib)＝33.74： 24.53： 19.03： 11.96： 4.09： 3.14： 1.40： 0.87： 0.71： 0.41： 0.12(质量百分比 )。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 步骤(1)所述的过滤是在浓缩液中加入无 水乙醇或乙醇溶液， 使多糖醇沉后形成棕色絮状沉淀， 静置后抽滤， 所得沉淀为覆 盆子粗多 糖。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于： 步骤(1)所述的加热浸提是在80℃下浸提。 5.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于： 步骤(2)所述的脱蛋白包括以下步骤： 将覆盆子粗多糖加入超纯水溶解， 在冰浴中缓慢加入三氯乙酸溶液， 充分混合后静置； 接着调pH值至 7； 5000～10000r/min离心5～10min， 去除胶状蛋白沉淀， 得多糖滤液； 浓缩后 加入95％乙醇溶液， 不断搅拌使多糖均匀沉淀， 随后于4℃下静置8～24h， 取出， 真空抽滤得 沉淀， 得到脱蛋白后的覆盆子多糖。 6.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于： 步骤(2)所述的透析包括以下步骤： 将NaCl溶液洗脱液浓缩后转入透析袋中于4℃透析24～96h， 去除小分子杂质， 透析袋 内的保留液含有纯化后的覆盆子多糖R2。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于： 所述透析袋的截留分子量 为3000Da。 8.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 所述的覆盆子为掌叶覆盆子(Rubus   idaeus L.)。 9.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 所述的抗肿瘤药物和抗炎制 剂还含有其他 活性成分和辅料。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于： 所述的辅料为缓释剂、 赋形剂、 填充剂、 粘 合剂、 湿润剂、 崩解剂、 吸 收促进剂、 吸附载体、 表面活性剂或润滑剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114917246 A 2覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用 技术领域 [0001]本发明属于植物活性成分领域， 具体涉及覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎 制剂中的应用。 背景技术 [0002]掌叶覆盆子为蔷薇科悬钩子属藤状灌木， 因其叶片(多为五裂或七裂)形似手掌而 得名， 是一种药食同源植物。 [0003]2020版 《中国药典》 规定： 覆盆子(Rubus  idaeus L.)为蔷薇科植物华东覆盆子(又 称掌叶覆 盆子)的干燥果 实， 具有益肾固精缩尿、 养肝明目的作用， 可用于治疗遗精滑精、 遗 尿尿频、 阳痿早泄、 目暗昏花等证。 覆盆子富含维生素A、 维生素C、 维生素E、 17种氨基酸及 锌、 镁、 钙等多种微量元素。 覆 盆子红熟果的平均可溶性固形物、 可溶性总糖、 可滴定酸含量 分别为13.68％、 111.8mg/g和1.27％， 不仅含糖量高， 风味佳， Vc含量远远高于同期上市的 枇杷、 杨梅 等水果， 还富含鞣 花酸、 山奈酚 ‑3‑O‑芸香糖苷等活性成分。 [0004]在我国， 覆盆子在中药制剂和饮食中被长期广泛使用， 是珍贵的药食同源物质。 历 代记载中覆盆子植株缺乏考证， 品种不尽相同， 以及地理原因， 导致覆盆子成分具有差异 性， 功效不稳定， 相关研究较少。 目前关于覆盆子生物活性成分的研究还较少， 相关药理作 用及其机制研究不够深入充分。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用， 利用 水提醇沉法对覆盆子进行多糖提取， 并通过离子交换层析法对多糖进行分离纯化， 透析冻 干， 由此提取分离出 纯度较高、 具有生物活性的多糖组分。 [0006]本发明的目的通过 下述技术方案实现： [0007]覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用； [0008]所述的覆盆子多糖R2由以下步骤制得： [0009](1)取覆盆子干果粉碎、 过筛， 然后加水加热浸提， 将浸提液浓缩和过滤， 得覆盆子 粗多糖； [0010](2)将覆盆子粗多糖脱蛋白， 然后上DEAE琼脂糖凝胶柱， 先用去离子水洗脱至少三 个柱体积， 再用0.3mol/L的NaCl溶液洗脱3 ‑5个柱体积， 最后用0.4mol/L的NaCl溶液洗脱， 直至洗脱液不再含有多糖， 合并0.4mol/L的NaCl溶液洗脱液， 经透析后， 得到覆盆子多糖 R2； [0011]步骤(1)所述的加热浸提是在80℃下浸提； [0012]步骤(1)所述的过滤是在浓缩液中加入无水乙醇或乙醇溶液， 使多糖醇沉后形成 棕色絮状沉淀， 静置后抽滤， 所 得沉淀为覆盆子粗多糖； [0013]步骤(2)所述的脱蛋白包括以下步骤： [0014]将覆盆子粗多糖加入超纯水溶解， 在冰浴中缓慢加入三氯乙酸溶液， 充分混合后说　明　书 1/7 页 3 CN 114917246 A 3