(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210629347.7 (22)申请日 2022.05.31 (71)申请人 国家纳米科 学中心 地址 100190 北京市海淀区中关村北一条 11号 申请人 中国科学院大学 (72)发明人 陈春英　胡栩豪　王亚玲　 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 王艳斋 (51)Int.Cl. A61K 39/39(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/04(2006.01) (54)发明名称 一种糖修饰的锰基纳米佐剂、 锰基纳米疫苗 及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明涉及一种糖修饰的锰基纳米佐剂、 锰 基纳米疫苗及其制备方法和应用， 所述糖修饰的 锰基纳米佐剂包括磷酸锰内核和表面修饰有甘 露糖且带有正电荷的磷脂双分子层外壳。 该锰基 纳米佐剂能够有效吸附免疫抗原； 能够有效地将 免疫抗原递送至抗原递呈细胞， 并极大地增强抗 原递呈细胞摄取免疫抗原， 靶向改善肿瘤微环 境， 从而高效地激活免疫细胞， 通过使用较低的 剂量吸附较少的抗原时获得更加优异的免疫治 疗效果。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 114949199 A 2022.08.30 CN 114949199 A 1.一种糖修饰的锰基纳米佐剂， 其特征在于， 所述糖修饰的锰基纳米佐剂包括磷酸锰 内核和表面 修饰有甘露糖且带有正电荷的磷脂双分子层外壳。 2.根据权利要求1所述的糖修饰的锰基纳米佐剂， 其特征在于， 所述磷脂双 分子层外壳 的制备原料包括磷脂材 料和胆固醇； 所述磷脂材料包括二油酰磷脂酸钠盐、 (2,3 ‑二油酰基 ‑丙基)‑三甲胺和甘露糖修饰的 磷脂材料； 优选地， 所述甘露糖修饰的磷脂材 料包括甘露糖修饰的D SPE‑PEG。 3.根据权利要求1或2所述的糖修饰的锰基纳米佐剂， 其特征在于， 所述二油酰磷脂酸 钠盐、 (2,3 ‑二油酰基 ‑丙基)‑三甲胺、 甘露糖修饰的磷脂材料与胆固醇的摩尔比为1:(1 ‑ 5):(0.1‑1):(1‑5)； 优选地， 所述锰 元素与磷元 素的摩尔比为5:(0.25 ‑5)。 4.根据权利要求1 ‑3中任一项所述的糖修饰的锰基纳米佐剂的制备方法， 其特征在于， 所述制备 方法包括： (1)将二价锰盐水溶液与油相混合， 形成第一油包水型乳液； 将磷酸盐或磷酸氢盐的水 溶液与油相混合， 再与二油酰磷脂酸钠盐溶 液混合， 形成第二油包水 型乳液； (2)将第一油包水型乳液与第二油包水型乳液混合， 形成共沉淀纳米颗粒， 然后加入有 机溶剂破坏油相， 离心得到沉淀， 沉淀再次溶于有机溶剂中； (3)将步骤(2)产物与(2,3 ‑二油酰基 ‑丙基)‑三甲胺、 甘露糖修饰的磷脂材料、 胆固醇 混合， 然后进行薄膜水化法， 得到所述糖修饰的锰基纳米佐剂。 5.根据权利要求4所述的糖修饰的锰基纳米佐剂的制备方法， 其特征在于， 所述二价锰 盐包括氯化锰、 硝酸锰或硫酸锰中的任意 一种或至少两种的组合； 优选地， 所述 二价锰盐水 溶液的浓度为5 ‑1000mmol/L； 优选地， 所述 二价锰盐水 溶液与油相的体积比为1:(10 ‑1000)； 优选地， 所述磷酸盐或磷酸氢盐的水 溶液的浓度为1 ‑200mmol/L； 优选地， 所述磷酸盐或磷酸氢盐的水 溶液与油相的体积比为1:(10 ‑1000)。 6.根据权利要求4或5所述的糖修饰的锰基纳米佐剂的制备方法， 其特征在于， 所述油 相包括环己烷、 环戊烷、 苯或石油醚中的任意 一种或至少两种的组合； 优选地， 所述油相中添加有非离 子型表面活性剂； 优选地， 所述非离子型表面活性剂包括烷基酚聚氧乙烯醚、 辛基酚聚氧乙烯醚、 聚氧代 乙烯壬基苯基醚中的任意 一种或至少两种的组合； 优选地， 所述油相与非离 子型表面活性剂的体积比为1:(1 ‑5)； 优选地， 步骤(2)所述混合在搅拌条件下进行， 搅拌的温度 为37‑60℃， 搅拌的时间为1 ‑ 30min， 搅拌的转速为20 0‑500r/min。 7.根据权利要求4 ‑6中任一项所述的糖修饰的锰基纳米佐剂的制备方法， 其特征在于， 所述有机溶剂包括甲醇、 乙醇、 丙醇、 甲醚、 乙醚中的任意 一种或至少两种的组合； 优选地， 所述薄膜水化法包括： 将步骤(3)的混合溶液用旋转蒸发仪挥发有机溶剂形成 一层脂膜， 加入缓冲液或去离 子水， 超声， 即得； 优选地， 所述超声在40 ‑60℃下进行5 ‑10min。 8.一种糖修饰的锰基纳米疫苗， 其特征在于， 所述糖修饰的锰基纳米疫苗是将抗原分权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114949199 A 2子与权利要求1 ‑3中任一项所述的糖修饰的锰基纳米佐剂进行静电吸附组装形成的。 9.根据权利要求8所述的锰基纳米疫苗， 其特征在于， 所述糖修饰的锰基纳米疫苗的粒 径为10‑100nm； 优选地， 所述 抗原分子包括肿瘤相关抗原分子； 优选地， 所述抗原分子中锰元素与权利要求1 ‑3中任一项所述的糖修饰的锰基纳米佐 剂的质量比1:(0.5 ‑10)， 优选1:(0.5 ‑2)； 优选地， 所述静电吸附组装在25 ‑37℃的缓冲液中孵 育30‑90min。 10.根据权利要求1 ‑3中任一项所述的糖修饰的锰基纳米佐剂 或权利要求8 ‑9中任一项 所述的糖修饰的锰基纳米疫苗在制备肿瘤免疫 治疗药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114949199 A 3