(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210611813.9 (22)申请日 2022.05.31 (71)申请人 中山大学 地址 510275 广东省广州市海珠区新港西 路135号 (72)发明人 张小雷　张启怡　丁文　徐世庆　 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 专利代理师 陈娟 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/712(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一类反义寡核苷酸分子及其在制备治疗恶 性肿瘤药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了一类反义寡核苷酸分子及其 在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用。 本发明发现 特定核苷酸序列的反义寡核苷酸分子能够特异 性地抑制STAT3蛋白的活性， 降低肿瘤细胞中 STAT3mRNA水平和蛋白质表达， 显著抑制肿瘤细 胞增殖并诱导肿瘤细胞 发生凋亡， 进而在在研发 和制备恶性肿瘤治 疗药物上 具有广泛的用途。 权利要求书1页 说明书9页 序列表4页 附图2页 CN 114908094 A 2022.08.16 CN 114908094 A 1.一类反义寡核苷酸分子， 其特 征在于， 其序列为如下核苷酸序列中的一条或几条： STAT3 ASO‑1： 5’ ‑TGACGCCTCCTTCTTTGCTG‑3’； STAT3 ASO‑2： 5’ ‑CTCTGCCAGTGTAGTCAGCT ‑3’； STAT3 ASO‑3： 5’ ‑GCGGGGGGACATCGGCAGGT‑3’； STAT3 ASO‑4： 5’ ‑TTTCCGAATGCCTCCTCCTT‑3’； STAT3 ASO‑5： 5’ ‑GTGATTCTTTGCTGGCCGC‑3’； STAT3 ASO‑6： 5’ ‑ATTCCCACATCTCTGCTC C‑3’； STAT3 ASO‑7： 5’ ‑TTTATAGTTGAAATCAAAG‑3’。 2.一种表达载体， 其特 征在于， 含有如权利要求1所述反义寡核苷酸分子 。 3.一种宿主细胞， 其特征在于， 含有如权利要求1所述反义寡核苷酸分子， 或含有如权 利要求2所述表达载体。 4.权利要求1所述反义寡核苷酸分子或其药学上可以接受的盐在制备治疗恶性肿瘤药 物中的应用。 5.根据权利要求4所述应用， 其特征在于， 所述恶性肿瘤为肺癌、 胰腺癌、 乳腺癌、 胃癌、 卵巢癌、 前列腺癌、 肠癌、 头 颈癌、 白血病或淋巴癌中的一种或几种。 6.权利要求1所述反义寡核苷酸分子或其药学上可以接受的盐在制备抑制肿瘤的生长 和/或增殖的药物中的应用。 7.权利要求1所述反义寡核苷酸分子或其药学上可以接受的盐在制备诱导肿瘤细胞凋 亡的药物中的应用。 8.权利要求1所述反义寡核苷酸分子或其药学上可以接受的盐在制备降低STAT3mRNA 的水平和/或抑制STAT3蛋白质表达的药物中的应用。 9.根据权利要求 4～8任一所述应用， 其特 征在于， 所述药物包括药 学上可接受的载体。 10.根据权利要求4～8任一所述应用， 其特征在于， 所述药物的剂型为注射剂、 胶囊剂、 片剂、 丸剂或颗粒剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908094 A 2一类反义寡核 苷酸分子及其在制备治疗恶性肿瘤药物中的 应用 技术领域 [0001]本发明涉及医药技术领域， 具体涉及一类反义寡核苷酸分子及 其在制备治疗恶性 肿瘤药物中的应用。 背景技术 [0002]恶性肿瘤由于分化不成熟并且生长不受控， 严重危害当代人类 的健康。 随着人口 增长和全球老龄化， 恶性肿瘤成为许多国家过早死亡和预期寿命降低的主要原因。 目前临 床上肿瘤的治疗策略是手术治疗、 化疗、 放疗、 免疫治疗等， 但是治疗阶段仍会存在许多问 题， 比如肿瘤化疗耐药、 转移、 药物响应率低和毒副作用等问题。 目前， 肿瘤的治疗正朝着精 准靶向治疗的方向前进， 核酸药物治疗就是其中一种靶向治疗手段。 [0003]信号转导及转录激活因子3(Signal  transducer  and activator  of  transcription  3,STAT3)在正常细胞中受到各种负性调 控因子严格调 控， 从而STAT3的活 性被维持在较低状态。 然而， 在信号分子的刺激下， STAT3会发生活化， 进而 可以调节细胞增 殖、 转移和免疫抑制相关基因的表达， 参与一系列重要生理过程。 当STAT3与磷酸化酪氨酸 残基结合后， 其主要通过705位点的酪氨酸和727位点的丝氨酸残基发生磷酸化效应， 随后 发生二聚化， 两分子STAT3形成STAT3 ‑STAT3二聚体转入细胞核内。 STAT3二聚体能够结合到 特定靶基因的启动子序列， 从而发挥信号传导和调节靶基因的表达的功能。 在大部分实体 瘤和血液肿瘤中， STAT3会处于不受调控的异常激活状态， 比如肝癌、 乳 腺癌、 胃癌、 肺癌、 前 列腺癌、 头颈癌、 胰腺癌、 白血病等。 过度活化的STAT3 可上调其下游S urvivin、 Bcl ‑xL、 Bcl‑ 1、 Mcl‑1等相关抗凋亡蛋白的表达， 增加血管内皮生长因子的表达， 上调基质金属蛋白酶1 型、 基质金属蛋白酶2型、 基质金属蛋白酶9型蛋白水平以及转录因子Snail、 Twist等的表 达， 能够导致癌症增殖、 生存、 血管生成、 转移和化疗耐药。 因此， STAT3被认 为是肿瘤 治疗的 有力靶点。 [0004]目前靶向STAT3的药物开发策略主要包括靶向STAT3上游激活分子和直接靶向 STAT3， 其中直接靶向STAT3的主要是通过作用于重要功能区域， 如介导STAT3 ‑STAT3二聚化 的SH2结构域或与启动子序列结合的DBD结构域。 然而， SH2结构域在STAT家族中十分保守， 使得药物的设计开 发难以实现高选择性。 其次， STAT3和靶基因上启动子的结合位点通常很 大且不一定依赖于二聚化， 利用小分子阻断其相互作用也非常困难。 此外， STAT3在肿瘤中 容易发生突变， 在 临床癌症患者中就检测到几种 不同类型的STAT3突变， 特别是SH2结构域 中的突变， 这可能会导致靶向特定结构域的STAT3抑制剂治疗作用减弱， 产生脱靶效应。 目 前迫切开发选择性 好、 药效高、 副作用低的STAT3分子靶向药物。 [0005]反义寡核苷酸是最早应用的一类核酸药物， 通常由16 ‑20个核苷酸 组成， 能够与 靶 RNA链以碱基互补配对原则 结合， 然后反义寡核苷酸会通过不同的机制 去调节mRNA的水平 和翻译， 主要分为诱导mRNA切割降解和立体阻断， 这主要取决于反义寡核苷酸的设计和化 学修饰。 反义寡核苷酸作为肿瘤治疗药物最大的优点是能高特异 性地抑制靶点mRNA的表达说　明　书 1/9 页 3 CN 114908094 A 3