(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210615705.9 (22)申请日 2022.06.01 (71)申请人 中山大学附属第一医院 地址 510080 广东省广州市越秀区中山 二 路58号 (72)发明人 谢显彪　沈靖南　黄纲　尹军强　 李洪波　吕东明　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 专利代理师 蒋斌 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/113(2010.01) G01N 33/574(2006.01)A61K 31/203(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 MN1在诊治骨肉瘤中的应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及 MN1在诊治骨 肉瘤中的应用。 本发明首次公开了 METTL14、 MN1和/或I GF2BP2在骨肉瘤诊断或预后 评估中的应用， 通过METTL14、 MN1和/或IGF2BP2 与总生存率、 无肺转移生存曲线图 和/或 METTL14、 MN1和/或IGF2BP2的5年生存 率ROC曲线 图可知： METTL14、 MN1和/或IGF2BP2可作为骨肉 瘤诊断或预后评估的标志 物。 权利要求书3页 说明书32页 序列表7页 附图18页 CN 115161397 A 2022.10.11 CN 115161397 A 1.(a1)～(a3)中至少一种、 至少两种或至少三种在制备骨肉瘤诊断或预后 评估的产品 中的应用； (a1)检测M ETTL14的物质； (a2)检测MN1的物质； (a3)检测IGF2BP2的物质。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于： 所述检测M ETTL14的物质包 含在基因水平和/或蛋白质水平上检测M ETTL14的物质； 优选地， 所述检测METTL14的物质包含用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中 的物质： 免疫组织 化学法、 Western印迹法、 N orthern印迹法、 PCR、 生物芯片法； 优选地， 所述检测METTL14的物质选自下组中的至少一种： 对METTL14具有特异性的物 质、 METTL14特异性的探针、 基因芯片、 PCR引物； 优选地， 所述检测M ETTL14的物质选自： M ETTL14抗体； 和/或 METTL14特异性的PCR引物； 优选地， 所述M ETTL14特异性的PCR引物的序列如SEQ  ID NO.3、 SEQ ID NO.4所示； 优选地， 所述检测MN1的物质包 含在基因水平和/或蛋白质水平上检测MN1的物质； 优选地， 所述检测MN1的物质包含用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物 质： 免疫组织 化学法、 Western印迹法、 N orthern印迹法、 PCR、 生物芯片法； 优选地， 所述检测MN1的物质选自下组中的至少一种： 对MN1具有特异性的物质、 标志物 特异性的探针、 基因芯片、 PCR引物； 优选地， 所述检测MN1的物质选自： MN1抗体； 和/或 MN1特异性的PCR引物； 优选地， 所述MN1特异性的PCR引物的序列如SEQ  ID NO.25、 SEQ  ID NO.26所示； 优选地， 所述检测IGF2BP2的物质包含在基因水平和/或蛋白质水平上检测IGF2BP2的 物质； 优选地， 所述物质是用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质： 免疫组织 化学法、 Western印迹法、 N orthern印迹法、 PCR、 生物芯片法； 选地， 所述检测IGF2BP2的物质选自下组中的至少一种： 对IGF2BP2具有特异性的物质、 IGF2BP2特异性的探针、 基因芯片、 PCR引物； 优选地， 所述检测IGF2BP2的物质选自： IGF2BP2抗体； 和/或 IGF2BP2特异性的PCR引物； 优选地， 所述 IGF2BP2特异性的PCR引物的序列如SEQ  ID NO.27、 SEQ  ID NO.28所示。 3.一种标志 物组合， 包 含： (b1)～(b3)中的至少两种或至少三种； (b1)METTL14； (b2)MN1； (b3)IGF2BP2。 4.一种诊断产品， 包 含： (n1)或(n2)： (n1)： (a1)～(a3)中至少两种或至少三种； (a1)检测M ETTL14的物质； (a2)检测MN1的物质；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 115161397 A 2(a3)检测IGF2BP2的物质； (n2)： METTL14特异性的PCR引物， 所述METTL14特异性的PCR引物的序列如SEQ  ID  NO.3、 SEQ ID NO.4所示； 和/或 MN1特异性的PCR引物， 所述MN1特异性的PCR引物的序列如SEQ  ID NO.25、 SEQ  ID  NO.26所示； 和/或 IGF2BP2特异性的PCR引物， 所述IGF2BP2特异性的PCR引物的序列如SEQ  ID NO.27、 SEQ   ID NO.28所示。 5.(c1)～(c 3)中的至少一种在(d1)～(d7)中任一项中的应用； (c1)METTL14抑制剂； (c2)MN1抑制剂； (c3)IGF2BP2抑制剂； (d1)制备防治骨肉瘤的药物； (d2)制备抑制骨肉瘤 细胞增殖的试剂； (d3)制备抑制骨肉瘤 细胞迁移的试剂； (d4)制备抑制骨肉瘤 细胞侵袭的试剂； (d5)制备抑制骨肉瘤 细胞生长的试剂； (d6)制备降低骨肉瘤 细胞干性的试剂； (d7)制备提高骨肉瘤对ATRA敏感性的药物。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特 征在于： 所述METTL14抑制剂包含抑制METTL14活性的物质、 降解METTL14的物质和降低METTL14 表达水平的物质中的至少一种； 优选地， 所述MN1抑制剂包含抑制MN1活性的物质、 降解MN1的物质和降低MN1表达水平 的物质中的至少一种； 优选地， 所述IGF2BP2抑制剂包含抑制IGF2BP2活性的物质、 降解IGF2BP2的物质和降低 IGF2BP2表达水平的物质中的至少一种。 7.一种RNA， 包 含： (k1)～(k6)中的至少一种： (k1)shMETTL14#32， 所述shMETTL14#32的正义链的序列如SEQ  ID NO.31所示， 所述 shMETTL14#32的反义链的序列如SEQ  ID NO.32所示； (k2)shMETTL14#33， 所述shMETTL14#33的正义链的序列如SEQ  ID NO.33所示， 所述 shMETTL14#33的反义链的序列如SEQ  ID NO.34所示； (k3)shMN1#a， 所述shMN1#a的正义链的序列如SEQ  ID NO.35所示， 所述shMN1#a的反义 链的序列如SEQ  ID NO.36所示； (k4)shMN1#b， 所述shMN1#b的正义链的序列如SEQ  ID NO.37所示， 所述shMN1#b的反义 链的序列如SEQ  ID NO.38所示； (k5)siIGF2BP2#1， 所述siIGF2BP2#1为反向互补的双链RNA， 其中的一条链的序列如 SEQ ID NO.39所示； (k6)siIGF2BP2#2， 所述siIGF2BP2#2为反向互补的双链RNA， 其中的一条链的序列如 SEQ ID NO.40所示。 8.与权利要求7 所述的RNA相关的生物材 料， 其特征在于，权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 115161397 A 3