(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210614250.9 (22)申请日 2022.06.01 (71)申请人 南京中医药大学 地址 210023 江苏省南京市栖霞区仙林大 道138号 (72)发明人 王若宁　李金铬　杜蓥江　王笑红　 狄留庆　 (74)专利代理 机构 南京中律知识产权代理事务 所(普通合伙) 32341 专利代理师 沈振涛 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 47/46(2006.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 47/64(2017.01)A61K 33/36(2006.01) A61K 31/337(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61K 31/12(2006.01) A61K 33/243(2019.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 49/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 25/00(2006.01) (54)发明名称 一种人参皂苷修饰的共载多元复合物的多 功能纳米囊泡及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种人参皂苷修饰的共载多 元复合物的多功能纳米囊泡及其制备方法和应 用， 所述多功能纳米囊泡是由外泌体载体外壳包 载纳米形式的药物内核， 进一步经人参皂苷修饰 所形成的。 本发明材料易得且低廉、 制备条件温 和、 操作简单， 设计并成功制备的人参皂苷修饰 的多功能纳米囊泡， 具有高度内源性、 生物安全 性及高载药性， 能够实现病灶部位精 准靶向并高 效浓集。 该纳米囊泡递送系统能够实现化学治 疗、 光动力治疗联合免疫治疗的 “多模式联合治 疗”， 可用于脑肿瘤等脑部疾病的协同治 疗。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115040494 A 2022.09.13 CN 115040494 A 1.一种人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡， 其特征在于， 所述多功能 纳米囊泡是由外泌体载体外壳包载纳米形式的药物内核， 进一步经人参皂苷修饰所形成 的。 2.根据权利要求1所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡， 其特征 在于， 所述人参皂苷选自人参皂苷Rh2、 人参皂苷R g3、 人参皂苷R g5中的一种或几种； 所述外 泌体选自血液来源、 巨噬细胞来源、 干细胞来源、 树突细胞来源、 肿瘤细胞来源中的一种或 几种。 3.根据权利要求1所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡， 其特征 在于， 所述纳米形式的药物内核为白蛋白与化疗药物和/或光敏剂 /成像剂构成的多 元复合 物。 4.根据权利要求3所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡， 其特征 在于， 所述白蛋白选自卵清蛋白、 人血清白蛋白、 牛血清白蛋白、 α ‑乳清蛋白的一种或几种； 所述化疗药物选自三氧化二砷、 紫杉醇、 阿霉素、 姜黄素、 顺铂中的一种或几种； 所述光敏 剂/成像剂选自二氢卟吩e6、 吲哚菁绿、 IR780中的一种或几种。 5.权利要求1所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡的制备方法， 其特征在于， 包括如下步骤： (1)制备纳米形式的药物内核； (2)提取分离获得外泌体； (3)将步骤(1)所得纳米形式的药物内核与 步骤(2)所得外泌体混合， 超声或挤出， 制得 共载多元复合物内核的纳米囊泡； (4)将步骤(3)所 得共载多元复合物内核的纳米囊泡与人参皂苷溶 液共孵育； (5)除去游离药物， 即得。 6.根据权利要求5所述的靶向修饰共载多元复合物的多功能纳米囊泡的制备方法， 其 特征在于， 步骤(1)中， 所述纳米形式的药物内核的制备方法， 包括如下步骤： 将白蛋白与活 化的光敏剂/成像剂混合， 搅拌， 用谷胱甘肽还原后， 加入化疗药物， 搅拌， 除游离， 即得； 或 将白蛋白与活化的光敏剂/成像剂混合， 搅拌， 除游离， 即得； 或将白蛋白用谷胱甘肽还原， 加入化疗药物， 搅拌， 除游离， 即得。 7.根据权利要求5所述的靶向修饰共载多元复合物的多功能纳米囊泡的制备方法， 其 特征在于， 步骤(3)中， 当固体质量为mg时， 液体质量以mL计， 所述纳米形式的药物内核1份， 外泌体1～5份， 所述超声时间为5 ‑10min。 8.根据权利要求5所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡的制备方 法， 其特征在于， 步骤(4)中， 当固体质量为mg时， 液体质量以mL计， 所述共载多元复合物 内 核的纳米囊泡1份， 所述人参皂苷1～5份， 所述共孵 育时间为1 ‑2h。 9.权利要求1所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡在制备肿瘤诊 断试剂或脑部疾病诊断试剂中的应用。 10.权利要求1所述的人参皂苷修饰的共载多元复合物的多功能纳米囊泡在制备抗肿 瘤药物或治疗脑部疾病药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115040494 A 2一种人参皂苷修饰的共 载多元复合物的多功能纳米囊泡及其 制备方法和应用 技术领域 [0001]本发明属于纳 米制剂技术领域， 具体涉及 一种人参皂苷修饰的共载多元复合物的 多功能纳米囊泡及其制备 方法和应用法。 背景技术 [0002]脑胶质瘤是中枢神经系统(centr al nervous system,CNS)最常见的最具侵袭性 的肿瘤之一， 约占成人所有恶性脑肿瘤的50％， 预后差， 复发率高， 死亡率高。 目前胶质瘤的 标准治疗方式是最大限度的手术切除联合放疗和化疗。 但基于生理病理屏障及脑胶质瘤复 杂免疫抑制微环境的阻碍， 其总体预后仍然很差， 长期生存率仍然很低。 胶质瘤患者的治疗 效果受到多种因素的影响： ①血脑屏障(blood ‑brain barrier,BBB)、 血脑肿瘤屏障 (blood‑brain tumor barrier,BBTB)等生理病理屏障阻碍成像剂、 治疗剂等大分子在脑部 的渗透和蓄积； ②胶质瘤具有高度耐药性， 阻碍替莫唑胺等一线化疗 药物的临床药物疗效； ③脑胶质瘤 免疫抑制微环境导致化疗药物预后差甚至产生耐药性； ④药物水溶性差、 体内 半衰期短以及非靶向毒性作用仍阻碍药物治疗效果。 因此亟需开发高靶向性、 高安全性的 新型多功能药物递送 平台。 [0003]了解胶质瘤微环境的复杂结构为探索干预免疫抑制肿瘤微环境(tumor   microenvironment,TME)的联合治疗以改善胶质瘤治疗提供了前所未有的机会。 受胶质瘤 细胞招募肿瘤相关巨噬细胞(tumor ‑associated  macrophages,TA Ms)进入胶质瘤微环境的 作用启发， 将TAM从肿瘤支持性M2表型重新编程为抗肿瘤M1表型以调节免疫抑制性TME提供 了诱人的胶质瘤 免疫治疗策略。 人参皂苷是一组天然存在的化学物质， 主要从人参根中提 取获得， 具有悠久人类使用历史。 人参皂苷Rg3作为人参的主要活性成分， 具有抗氧化、 抗 炎、 抗衰老以及抗癌等多种药理活性， 在临床上得到广泛应用。 此外， 人参皂苷R g3通过诱导 M2巨噬细胞极化为M1表型并加 速炎症消退， 对TME重塑具有显著的免疫调节作用。 然而， 由 于其在血液和胃肠道中迅速降解， 且不能到达实体瘤部位， 其抗肿瘤临床应用受到极大限 制。 [0004]三氧化二砷(arsenic  trioxide,ATO)是传统中药砒霜的主要成分， 经砒石升华而 得， 常温下为白色粉末， 性酸， 热， 有大毒， 入脾、 肺、 肝经。 早在20世纪70年代， 就被用于治疗 急性早幼粒细胞白血病(acute  promyelocytic  leukemia， APL)并取得了良好效果， 并于 2000年被美国食品药品监督管理局(FDA)批准为治疗APL的一线 药。 近年来的研究表明， ATO 可通过诱导肿瘤细胞凋亡、 自噬及影响肿瘤血管生成等 发挥抗肿瘤作用， 有效抑制肝癌、 乳 腺癌等癌细胞在体外或体内实体瘤的生长。 但是， 作为水溶性药物， ATO经静脉注射进入血 液循环后广泛分布于血液及各脏器， 肾脏清除快速， 抑制了其在肿瘤部位的积累， 递送效率 低。 因此， 迫切需要开发一种新的递送策略来增加ATO在脑胶质瘤部位的蓄积， 并在保持高 生物相容 性的同时提高其治疗效果。 [0005]光动力疗法(photodynamic  therapy,PDT)是一种侵袭性小、 全身毒性低、 无初始说　明　书 1/7 页 3 CN 115040494 A 3