(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210627179.8 (22)申请日 2022.06.01 (71)申请人 辽宁省海 洋水产科 学研究院 地址 116023 辽宁省大连市沙河口区黑石 礁街50号 (72)发明人 周遵春　王继红　蒋经伟　吕莉　 肖蓉　孙红娟　陈仲　潘泳嘉　 姜苹哲　 (74)专利代理 机构 北京知汇林知识产权代理事 务所(普通 合伙) 11794 专利代理师 杨华 (51)Int.Cl. C07K 14/435(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/70(2006.01)C12N 1/21(2006.01) C12Q 1/02(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61K 49/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 基因重组海参肽rAj-HRP在抗肿瘤药物中的 应用 (57)摘要 本申请属于生物 技术领域， 具体涉及一种基 因重组海参肽rAj ‑HRP及其在抗肿瘤中应用， 本 申请证实重组海参肽 rAj‑HRP通过以EGF R为靶点 而强效抑制肿瘤细胞的发生与发展， 可应用于靶 向肿瘤药物制备 领域。 权利要求书1页 说明书12页 序列表1页 附图6页 CN 114891084 A 2022.08.12 CN 114891084 A 1.一种重组海参肽， 其特 征在于， 其氨基酸序列为如下任一： 1)包含SEQ ID NO.2所示序列； 2)满足氨基酸保守替代基础上， 与SEQ  ID NO.2具有至少90％以上同源性； 优选的， 所述重组海参肽是分离的， 或合成的。 2.一种核苷酸， 其特 征在于， 其编码权利要求1所述的重组海参肽； 优选的， 所述核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 3.一种重组序列， 其特征在于， 其连接有权利要求1或2任一所述重组海参肽序列或核 苷酸序列。 4.一种组合物， 其特 征在于， 包 含权利要求1 ‑2任一所述的重组海参肽或核苷酸。 5.一种重组载体， 其特 征在于， 包括权利要求2所述的核苷酸序列； 优选的， 所述载体为克隆载体或表达载体； 更优选的， 所述表达载体为真核表达载体或原核表达载体。 6.一种重组细胞， 其特 征在于， 包 含权利要求要求5所述的重组载体。 7.权利要求1所述重组海参肽的制备方法， 其特征在于， 包含利用权利要求5所述重组 载体进行表达的步骤； 优选的， 所述方法进一 步包括分离和纯化 步骤。 8.权利要求1所述的重组海参肽的如下任一应用： 1)在抗肿瘤活性中的应用； 2)在抗肿瘤 细胞增殖、 迁移或侵染中的应用； 3)在制备抗肿瘤药物中的应用； 优选的， 在制备以EGFR为靶点的抗肿瘤药物中的应用； 4)在筛选肿瘤抑制中的应用； 优选的， 以EGFR为靶点的肿瘤抑制剂中的应用； 5)在抗肿瘤活性评价中的应用。 9.权利要求2所述的核苷酸的如下任一应用： 1)在抗肿瘤活性中的应用； 2)在抗肿瘤 细胞增殖、 迁移或侵染中的应用； 3)在制备抗肿瘤药物中的应用； 优选的， 在制备以EGFR为靶点的抗肿瘤药物中的应用； 4)在筛选肿瘤抑制中的应用； 优选的， 以EGFR为靶点的肿瘤抑制剂中的应用； 5)在抗肿瘤活性评价中的应用。 10.一种在体外或体内抑制肿瘤细胞的方法， 其特征在于， 包括给予或表达权利要求1 所述重组海参肽的步骤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114891084 A 2基因重组海参肽 rAj‑HRP在抗肿瘤药物中的应用 技术领域 [0001]本申请属于生物技术领域， 具体涉及基因重组海参肽rAj ‑HRP的制备及其通过抑 制肿瘤细胞EGFR细胞信号 通路在抗肿瘤药物制备中的应用。 背景技术 [0002]癌症目前已经成为全球性第一大致死因素， 到2020年每年死于癌症的人数超过 1200万人， 到2030年， 预计每年新发癌症病例数将增加到2360万。 而就癌症的发病情况来 看， 肺癌、 胃癌、 食 管癌、 肝癌、 乳 腺癌、 宫颈癌最为多 见， 约占全部恶性肿瘤的70％ ‑80％。 因 此， 寻找并研发安全强效的抗肿瘤药物已刻不 容缓。 [0003]目前， 抗癌药物分为三大类别， 包括： 常规化疗药物、 激素治疗药物、 分子靶向药 物。 在这三大类抗癌药物中， 化疗药物和激素治疗药物因其毒副作用强而限制 了其治疗效 果， 而分子靶向药物则因其疗效好、 副作用小的优势成为抗肿瘤药物市场的发展趋势， 其已 占全球抗肿瘤药物市场的60％份额。 但不容忽视的是， 靶向药物大多 数为单抗类产品， 具有 拮抗肿瘤类型单一、 研发代价高、 生产成本高、 销售价格高的特点， 这严重限制 了患者的广 泛使用。 因此， 寻找新型抗癌药物成为全球相关领域科研工作者的神圣使命。 由于陆地资源 有限， 向海洋要药俨然成为寻找新型抗肿瘤药物的热点。 由于本课题组一直致力于海洋生 物活性研究， 因此我们把抗癌 药物寻找的目光聚焦到了仿刺参(Apostichopus  japoicus) 这一物种。 [0004]仿刺参属棘皮动物门、 海参纲、 楯手目、 刺参科， 是辽宁地区重要的海珍品经济养 殖品种， 关于其活性成分的研究还处于起 步阶段， 在抗肿瘤研究领域更 是一片空白。 [0005]有鉴于此， 提出本发明。 发明内容 [0006]本申请的第一目的在于提供一种全新重组海参肽r Aj‑HRP； [0007]本申请的第二目的在于提供一种所述重组海参肽r Aj‑HRP的制备 方法； [0008]本申请的第三目的在于提供 所述重组海参肽r Aj‑HRP在抗肿瘤中的应用； [0009]本申请的第四目的在于提供所述重组海参肽rAj ‑HRP在制备抗肿瘤药物中的应 用。 [0010]为实现上述目的， 本申请具体提供如下技 术方案： [0011]本申请首 先提供一种重组海参肽， 其氨基酸序列为如下任一： [0012]1)包含SEQ ID NO.1所示序列； [0013]2)满足氨基酸保守替代的基础上， 与SEQ  ID NO.2具有至少80％以上同源性； [0014]优选的， 至少80％、 90％、 95％或9 9％的序列同源性。 [0015]3)如SEQ ID NO.1所示序列。 [0016]优选的， 所述重组海参肽是分离的， 或合成的。 [0017]本申请还提供一种分离的核苷酸序列， 其编码上述任一所述的重组海参肽。说　明　书 1/12 页 3 CN 114891084 A 3