(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210627416.0 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 中国科学院昆明植物研究所 地址 650201 云南省昆明市盘龙区蓝黑路 132号 (72)发明人 陈纪军　何小凤　李天泽　耿长安　 马云保　张雪梅　黄晓燕　胡敬　 (74)专利代理 机构 昆明祥和知识产权代理有限 公司 53114 专利代理师 马晓青 (51)Int.Cl. C07D 311/96(2006.01) C07D 493/20(2006.01) C07D 493/10(2006.01) C07D 493/08(2006.01)C07D 307/94(2006.01) C07C 69/738(2006.01) C07C 69/757(2006.01) C07C 67/56(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 31/366(2006.01) A61K 31/365(2006.01) A61K 31/215(2006.01) (54)发明名称 南牡蒿素及其药物组合物和其制备方法与 应用 (57)摘要 本发明提供南牡蒿素及其药物组合物和其 制备方法与应用， 属于药物技术领域。 本发明的 结构式 （I） 所示36个倍半萜二聚体， 南牡蒿素 （arteriopodins， 1 –36） 对人肝癌细胞株HepG2、 Huh7和SK‑Hep‑1具有细胞毒活性， 能够与可药用 载体或赋型剂组成药物组合物， 可用于制备抗肝 癌药物。 权利要求书3页 说明书41页 附图2页 CN 114957190 A 2022.08.30 CN 114957190 A 1.如下结构式(I)所示的南牡蒿素化 合物1–36， 2.权利要求1所述的结构式(I)所示的南牡蒿素化合物1 –36的制备方法： 取干燥的南牡权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114957190 A 2蒿地上部分， 粉碎， 用3倍量的90％乙醇提取两次， 合并提取液减压浓缩后得到的粗浸膏分 散于水中， 用乙酸乙酯萃 取得到乙酸乙酯萃 取部分； 随后， 将乙酸乙酯萃 取部分过硅胶柱层 析， 并用丙酮 ‑石油醚体积比0:100、 5:95、 10:90、 20:80、 40:60和100:0梯度洗脱得到8个流 分Frs.A‑1～A‑6； Fr.A‑4过MCI gel CHP 20P柱层析， 用甲醇 ‑水50:50、 70:30、 90:10和100: 0洗脱得到了四个亚流分Frs.A ‑4a‑A‑4d； Fr.A‑4c再使用硅胶柱层析， 以丙酮 ‑石油醚5:9 5、 10:90和20:80划分成五个流 分Frs.A‑4c‑1‑A‑4c‑5； Fr.A‑4c‑4首先经过Sepha dex LH‑20用 甲醇‑氯仿50:50洗脱， 再用Rp ‑C18柱层析， 以甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30和80:20处理， 最后 经半制备高效液相HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱上以55:45的乙腈 ‑水和80:20甲醇 ‑水纯化得到 化合物1、 2和3； Fr.A ‑4c‑5经过Rp‑C18反相柱层析， 甲醇 ‑水50:50、 60:40和70:30梯度洗脱得 到了流分Frs.A ‑4c‑5a‑A‑4c‑5f； Fr.A‑4c‑5a经半制备HPLC在安捷 伦XDB‑C18柱上以60:40的 乙腈‑水和82:18甲醇‑水反复纯化得到了化合物11、 12、 13、 28、 29和36； 化合物14、 16、 17和 18是流分Fr.A ‑4c‑5c经过反复的Sephadex  LH‑20柱层析， 用甲醇 ‑氯仿50:50洗脱处理之 后， 再使用半制备HPLC在Agilent  XDB‑C18柱， 用以50:50的乙腈 ‑水和75:25洗脱甲醇 ‑水纯 化得到； Fr.A ‑4c‑5e经过Sephadex  LH‑20柱层析， 用甲醇 ‑氯仿50:50洗脱处理之后， 再用半 制备HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱上以48 :52的乙腈 ‑水和78:22甲醇‑水纯化得到化 合物6和15； Fr.A‑5经MCI gel CHP 20P柱层析， 甲醇 ‑水50:50、 70:30、 90:10和100:0洗脱得到了四 个流分Frs.A ‑5a‑A‑5d； Fr.A‑5c进一步用反相Rp ‑C18柱层析， 用甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30 和100:0梯度洗脱得到四个亚流分Frs.A ‑5c‑1‑A‑5c‑4； Fr.A‑5c‑1经反复的Sephadex  LH‑ 20柱层析， 用甲醇 ‑氯仿50:50 处理之后， 再用半制备HPLC在Agilent  XDB‑C18柱， 用以50:50 的乙腈‑水和73:27洗脱甲醇 ‑水纯化得到了化合物4、 5、 7、 8、 9和10； Fr.A ‑5c‑2经过硅胶柱 层析， 以丙酮 ‑氯仿5:95和10:90洗脱得到了五个流分Frs.A ‑5c‑2a‑A‑5c‑2e； Fr.A‑5c‑2a经 过反复的硅胶柱层析以乙酸乙酯 ‑氯仿5:95和10:90洗脱， 在过Sephadex  LH‑20柱层析， 用 甲醇‑氯仿50:50处理之后， 在使用半制备HPLC在Agilent  XDB‑C18柱用以47:53的 乙腈‑水和 75:25洗脱甲醇 ‑水分离纯化得到化合物22、 23和24； Fr.A ‑5c‑2b经过Seph adex LH‑20柱层 析用甲醇 ‑氯仿50:50处理后， 再使用半制备高效液相在安捷伦XDB ‑C18柱以乙腈 ‑水55:45和 甲醇‑水80:20为流动相纯化得到化合物27、 30、 31和33； Fr.A ‑5c‑2c经过Sepha dex LH‑20柱 层析用甲醇 ‑氯仿50:50处理之后， 再半制备HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱以乙腈 ‑水48:52和甲 醇‑水76:24为流动相分离纯化得到化合物19、 20和25； Fr.A ‑5c‑3经反复的硅胶柱层析以丙 酮‑氯仿10:9 0和20:80洗脱之后， 再过Sephadex  LH‑20柱层析用甲醇 ‑氯仿50:50处理， 最后 使用半制备HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱以乙腈 ‑水50:50和甲醇 ‑水75:25为流动相纯化得到化 合物21、 26、 32、 34和3 5。 3.权利要求1所述的结构式(I)所示的南牡蒿素化合物1 –36在制备抗肝癌药物中的应 用。 4.包括权利要求1所述的结构式(I)所示的南牡蒿素化合物1 –36的至少一种和药学上 可接受的载体或赋 型剂的药物组合物。 5.权利要求 4所述的药物组合物在制备抗 肝癌药物中的应用。 6.权利要求4所述的药物 组合物的制备方法： 取干燥的南牡蒿地上部分， 粉碎， 用3倍量 的90％乙醇提取两次， 合并提取液减压浓缩后得到的粗浸膏分散于水中， 用乙酸乙酯萃取 得到乙酸乙酯萃取部分； 随后， 将乙酸乙酯萃取部分过硅胶柱层析， 并用丙酮 ‑石油醚体积权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114957190 A 3