ICS 65.020 CCS B 05 22 吉林省 地方 标准 DB22/T 3503—2023 大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定 规程 Code of practice for outcrossing pollination characteristics of soybean three-line fertile germplasm 2023 - 09 - 28发布 2023 - 11 - 16实施 吉林省市场监督管理厅 发布 DB22/T 3503 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：吉林省农业科学院。 本文件主要起草人：张井勇、张春宝、赵丽梅、彭宝、闫昊、张伟、林春晶、王鹏年、丁孝羊 、孙 妍妍、关哲允、李慧、孙寰、刘大壮、姚福山。 DB22/T 3503 —2023 1 大豆"三系"可育种质异交传粉结实性鉴定规程 1 范围 本文件确立了大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定的程序，规定了待测可育种质准备、异交 传粉能力测试、异交传粉结实性鉴定分类等阶段的操作指示，描述了记录与档案等追溯方法。 本文件适用于在自然条件下北方春大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 DB22/T 2209—2014 杂交大豆种子 3 术语和定义 DB22/T 2209 —2014界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 可育种质 soybean fertile germplasm 雌蕊及雄蕊发育正常，雌蕊能接受正常花粉而受精结实，雄蕊能产生有功能正常花粉的普通栽培大 豆。 始花期 beginning stage of flowering 10% 大豆植株开花的日期 （月/日）。 盛花期 blooming stage of flowering 50% 大豆植株开花的时间（月 /日）。 终花期 ending stage of flowering 90% 大豆植株开花结束的日期（月 /日）。 花期 flowering period 从始花期到终花期的累计时间（天）。 雄性不育系 male sterility line 雄蕊发育退化或败育，不能产生正常可育的花粉，但雌蕊发育正常，能接受正常花粉而受精结实， 并能将雄性不育性遗传给后代的品系。 [来源：DB22/T 2209 —2014，3.1，有修改] DB22/T 3503 —2023 2 异交传粉结实性 outcrossing characteristics 大豆种质作为父本通过吸引传粉昆虫把花粉传给不育系母本花朵完成受精结实的能力。 注： 通过调查母本结荚数量，并与异交传粉结实性髙、中、低父本对照进行比较，分析结荚数差异显著性，以此鉴 定异交结实性高低。 4 鉴定流程 异交传粉 结实性鉴定过程见图 1。 图1 大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定流程图 5 待测可育种质准备 整理及编号 对待测种质进行去杂、去劣，登记种子的特征特性，进行统一编号。 种植 在田间播种待测种质，行长 3 m，株距 10 cm，行距 65 cm。 田间性状调查 出苗期至成熟期进行下列性状调查， 调查方法参照《中国大豆品种志》，大豆品种性状分级标准及 术语说明 ： a) 出苗后 7 天内观察并记载下胚轴颜色，开花前观察叶形； b) 花期观察花色，调查始花期、盛花期、终花期； c) 鼓粒期调查吉林省大豆主要病害抗病性（病毒病、灰斑病、霜霉病、细菌性斑点病、根腐病 和菌核病）； d) 成熟期调查成熟期、抗倒伏性、结荚习性、茸毛色、性状整齐度。 DB22/T 3503 —2023 3 考种 成熟后，在行中间位置不缺苗处连续选取 5 株进行考种，考种项目包括株高、主茎节数、底荚高 度、有效分枝数、荚形、荚皮色、单株有效荚数、单株粒数、单株粒重、百粒重、粒形、粒色、种脐色、 籽粒光泽等。 6 异交传粉能力测试 组合配制 6.1.1 测交母本 6.1.1.1 早-中早熟期母本 选用 RN 型高异交率雄性不育系 JLSCMS34A 作为母本，田间异交率超过 90.0%。 6.1.1.2 中熟-中晚熟期母本 选用 RN 型高异交率雄性不育系 JLSCMS82A 作为母本，田间异交率超过 90.0%。 6.1.2 测交父本 任一待测可育种质为父本。 6.1.3 测交父本对照 6.1.3.1 早熟-中早熟期组对照 分别以髙异交率可育系 JLSCMS34B 、中异交率可育系 JLCMS47B 、低异交率可育系 JLCMS31B 作为 父本异交结实性高、中、低对照。 6.1.3.2 中熟-中晚熟期组对照 分别以髙异交率可育系 JLSCMS82B 、中异交率可育系 JLCMS9B、低异交率可育系 JLCMS89B 作为父 本异交结实性高、中、低对照。 测交组合田间种植 6.2.1 试验地选择 在吉林省西部地区 ，选择 1 块～3 块试验田，试验地点应满足以下条件： 适合大豆生长 ，年降雨 量少于 400 mm，7 月～8 月大豆花期 ，平均降雨天数少于 10 天，无孢囊线虫等土壤传播病虫害、野 生传粉昆虫丰富的地区 。 6.2.2 田间设计 随机区组设计， 3 行区，行长 3 m，行距 0.65 m，相邻小区间空置 1 行（0.65 m），3 次重复， 相邻区组间空置 1.0 m。小区具体设计见 图 A.1。 6.2.3 亲本的播种 6.2.3.1 播种方式： 小区内 3 行按父本、母本、父本顺序播种，见图 A.1。 6.2.3.2 播种日期： 依据待测可育系开花期调整播种日期，使之与母本不育系开花期相遇。 DB22/T 3503 —2023 4 6.2.3.3 种植密度： 父母本均按穴播种，穴距 20 cm，每穴播 4 粒种子，出苗后每穴定苗 2 株。 6.2.4 田间去杂 6.2.4.1 母本田间去杂 出苗期依据下胚轴颜色（绿色或紫色）去杂，第二个复叶期依据叶形、茸毛色去杂，始花期依据花 色、茸毛色去杂，始花期对开放的花朵手检花粉育性，拔出可能混杂的花粉可育植株。 6.2.4.2 父本田间去杂 出苗期依据下胚轴颜色去杂， 第二个复叶期依据叶形、 茸毛色去杂， 始花期依据花色、 茸毛色去杂。 昆虫异交传粉 6.3.1 传粉环境 父母本开花前一周，喷施登记的、对蜂类毒性小的杀虫剂。为避免影响野生昆虫传粉，整个花期， 减少农事操作，不喷施杀虫剂。 6.3.2 花期昆虫传粉 父母本整个花期，利用野生传粉昆虫作为传粉媒介，完成花粉从父本到母本的异交授粉、结实。 杂交荚调查 成熟期在母本行不缺苗中间位置，连续取 5 株记录结荚个数。 7 异交传粉结实性鉴定分类 传粉能力评价 用待测种质异交传粉结荚数差异显著性评价异交传粉结实性能力。对 6.4 结荚数数据进行差异显 著性分析，按表 B.1 确定父本异交传粉结实性高低。 异交传粉结实性分类 按表 B.1 父本异交传粉结实性的高低，与 3 个对照父本比较分为高异交传粉结实性、中高异交传 粉结实性、中异交传粉结实性、中低异交传粉结实性、低异交传粉结实性 5 类种质。 8 记录与档案 对整个鉴定过程进行及时记录，并存档，档案至少保存 20 年，做到可以追溯。