ICS 67.050 B 050 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 9420—2015 水产养殖环境（水体、底泥）中多溴联苯醚 的测定 气相色谱一质谱法 Determination of polybrominated diphenyl ethers in water and sediment from the aquaculture environment by GC-MS 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-05-01实施 中华人民共和国农业部 发布 SC/T9420—2015 前言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由农业部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会渔业资源分技术委员会（SAC/TC156/SC10)归口。 本标准起草单位：农业部水产种质与渔业环境质量监督检验测试中心（青岛）、中国水产科学研究院 黄海水产研究所。 本标准主要起草人：周明莹、曲克明、陈碧鹃、马绍赛、夏斌、乔向英、冷凯良、邢丽红、孙伟红。 行业标准信息服务平台 I SC/T 9420—2015 水产养殖环境（水体、底泥）中多溴联苯醚的测定 气相色谱一质谱法 1范围 本标准规定了水产养殖环境（水体、底泥）中BDE-3、BDE-15、BDE-28、BDE-47、BDE-99、 BDE-100、BDE-153、BDE-154、BDE-183、BDE-203、BDE-206和BDE-20912种多溴联苯醚的气 相色谱一质谱测定方法 本标准适用于水产养殖环境（水体、底泥）中12种多溴联苯醚的测定 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3样品保存 采集的水样置于棕色玻璃瓶中，在0℃5℃条件下避光保存，一周内完成分析。 采集的底泥样品置于广口棕色玻璃瓶中，在一10℃以下避光保存，一月内完成分析。 4测定方法 4.1方法原理 水体中的多溴联苯醚用二氯甲烷提取，底泥样品中的多溴联苯醚用正已烷和丙酮混合溶剂超声提 取。提取后的溶液用酸性硅胶柱净化，用配有EI源的气相色谱一质谱联用仪测定，内标法定量。 4.2试剂和材料 以下所用试剂，除另有说明外，均为色谱纯试剂；所有试剂经气相色谱一质谱联用仪测定不得检出 多漠联苯醚。 准信息服务的 4.2.1实验用水：GB/T6682规定的一级水。 4.2.2二氯甲烷。 4.2.3正已烷。 4.2.4内酮。 4.2.5异辛烷。 4.2.6甲苯。 4.2.7无水硫酸钠：分析纯，550℃高温灼烧4h，冷却后存放于具有螺旋瓶盖的玻璃瓶中 4.2.8氯化钠：分析纯。 4.2.9浓硫酸（含量98%）：优级纯。 4.2.10铜粉（200目，纯度99.8%）：分析纯，用（1十+1)的盐酸溶液浸洗10min，倾去酸，用水洗至中性， 用丙酮洗涤数次，置于盛有丙酮的具塞瓶中，使用时用氮气吹干。 4.2.11活化硅胶（80目～100目）：将层析硅胶用二氯甲烷清洗，150℃下烘干2h，干燥器中冷却后，存 放于具有螺旋瓶盖的玻璃瓶中。 SC/T 9420—2015 4.2.12去活硅胶：在活化硅胶（4.2.11)中加人10%水降活，用玻璃棒搅拌使分散均勾，存放于具有螺 旋瓶盖的玻璃瓶中，放置过夜后使用。 4.2.13酸化硅胶（30%)：称取活化好的硅胶（4.2.11)100g，逐滴加人44g浓硫酸（4.2.9)，玻璃棒搅 拌至无块状物后，存放于具有螺旋瓶盖的玻璃瓶中。 4.2.14氮气：纯度≥99.99%。 4.2.15高纯氨气：纯度≥99.999%。 4.2.16标准溶液和标准物质 BDE-CSM混合标准溶液（溶剂为异辛烷）：BDE-28、BDE-47、BDE-99、BDE-100、BDE- 153、BDE-154、BDE-183各单体的浓度均为20μg/mLBDE-209浓度为200μg/mL。 b) BDE-3和BDE-15标准溶液（溶剂为异辛烷）：浓度均为50μg/mL。 c) BDE-203和BDE-206标准溶液（溶剂为异辛烷）：浓度均为50μg/mL。 d) 内标物：十氯联苯（PCB-209）（纯度99.5%）。 4.2.17 储备液 a) BDE-CSM混合标准溶液：准确移取4.2.16a)溶液，用异辛烷作溶剂，将4.2.16a)中各单 体配成浓度为0.4μg/mL、BDE-209浓度为4.0μg/mL的溶液。 b) BDE-3和BDE-15混合标准溶液：准确移取4.2.16b)溶液，用异辛烷作溶剂，配成浓度为 2. 0μg/mL的溶液。 BDE-203和BDE-206混合标准溶液：准确移取4.2.16c)溶液，用异辛烷作溶剂，配成浓度 为2.0μg/mL的溶液。 d）内标物储备液：100μg/mL。准确称取PCB-209内标物[4.2.16d)J10.0mg（精确至0.1 mg），用甲苯溶解，并定容到100mL容量瓶中。 以上溶液置于一18℃冰箱中，避光密封保存，有效期3个月。 4.2.18标准使用液 a）多溴联苯醚混合标准使用液：分别准确移取一定体积的各种多溴联苯醚标准储备液[4.2.17 a）,4.2.17b），4.2.17c)，置于10mL容量瓶中，用异辛烷稀释至刻度，配成BDE-3、 BDE-15、BDE-28、BDE-47、BDE-99、BDE-100、BDE-153、BDE-154、BDE-183各单体的 浓度为0.2ug/mL，BDE-203、BDE-206各单体的浓度为0.4μg/mL，BDE-209浓度为2.0 μg/mL的溶液。一18℃冰箱中密封保存，有效期1个月。 b）PCB-209内标使用溶液：0.2μg/mL。准确移取20uLPCB-209内标溶液[4.2.17d)7于 10ml.容量瓶中，用异辛烷稀释至刻度。一18℃冰箱中密封保存，有效期1个月。 注：从冰箱里取出的标准溶液，要恢复到室温，摇匀后使用。标准储备液可以重复使用，标准使用液只能使用一次。 4.3仪器和设备 4.3.1气相色谱一质谱联用仪（GC-MS)：配有电子轰击源（EI），质量数的检测范围上限应至少为 1000m/z 4.3.2分析天平：感量0.00001g。 4.3.3天平：感量0.01g。 4.3.4旋转蒸发仪。 4.3.5离心机：4000r/min。 4.3.6超声波清洗器。 4.3.7涡旋混合器。 4.3.8冷冻干燥机。 2 SC/T 9420—2015 4.3.9净化柱：20.0cm×1.5cm(i.d)带沙板的玻璃层析柱，依次填入1g去活硅胶、2g酸化硅胶、1g 去活硅胶、2g无水硫酸钠。使用前用20mL正已烷预淋洗。 4.3.10棕色容量瓶：10mL、25mL50mL、100mL。 4.3.11分液漏斗：2000mL，带有聚四氟乙烯活塞。 4.3.12棕色浓缩瓶：50mL、150mL、250mL，带有空心塞。 4.3.13离心管：100mL。 4.4测定步骤 4.4.1试样的制备 a）水样：经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤，于5℃冰箱内保存，24h内提取。 b）底泥样品：分析前将样品冷冻干燥，剔除沙砾和石头，用瓷研钵磨细后过80目金属筛，贮存在 棕色磨口玻璃瓶中，于5℃冰箱内保存，24h内提取。 4.4.2提取 氯化钠，再加入50mL二氯甲烷，剧烈振荡2min，静置，使有机相与水相完全分离，将有机相通过一个装 有10g无水硫酸钠的漏斗转移到250mL浓缩瓶中，重复萃取两遍，合并有机相，待浓缩净化。 沉积物样品：称取10g干样品（精确至0.01g），置于100mL离心管中，加人50μLPCB-209内标 使用溶液[4.2.18b)],40mL正已烷一丙酮（1：1)混合溶剂，控制水浴25℃以下，超声提取20min， 4000r/min下离心10min，上清液转移到另一个100mL离心管中。在沉积物中再加入30mL正已 烷一丙酮（1：1）混合溶剂，重复提取一次。合并提取液，加人1g铜粉，超声5min，4000r/min下离心 5min，上清液转移到150mL浓缩瓶中，待浓缩净化。 4.4.3净化 将4.4.2所得有机相在40℃水浴中减压旋转蒸发至约1mL，浓缩液用15mL正已烷分数次溶解， 并经净化柱（4.3.9)转移至50mL浓缩瓶中，20mL正已烷洗脱净化柱，洗脱液合并于浓缩瓶中。旋转 蒸发至1mL左右，用平稳的氮气气流吹干，准确加人0.5mL异辛烷，涡旋溶解残留物，供GC-MS测 定。 4.4.4基质加标标准曲线的绘制 按照4.4.2和4.4.3的操作步骤分别对阴性试样进行处理，得到净化后的基质溶液。参照附录A 所示的浓度，准确移取适量多溴联苯醚混合标准使用液[4.2.18a]和内标使用溶液[4.2.18b)]于 50mL浓缩瓶中，用柔和的N2顶吹至近干，将净化后的基质溶液全部加人吹干的浓缩瓶，涡旋，GC- MS分析，绘制标准曲线。 4.4.5测定 4.4.5.1气相色谱参考条件 a）色谱柱：DB-5ms，15mX0.25mmX0.1um，或性能相当者 色谱柱温度：起始温度90℃，保持1min，以10℃/min梯度升温至320℃，保持6min； b) c) 进样口温度：280℃； P 载气：高纯氨气（纯度≥99.999%）； e) 流速：1.0mL/min； f）进样方式：脉冲无分流； g）进样体积：1μL。 4.4.5.2质谱参考条件 a）离子源：EI源，电离能量为70eV； b）离子源温度：230℃； 3