SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0193.1—2015 代替SN/T0193.1—1993 出口皮革及皮革制品中五氯酚残留量检测 方法第1部分：液相色谱-质谱/质谱法 Determination of pentachlorophenol residue in leather and leather products for exportPart 1:HPLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 出口皮革及皮革制品中五氯酚残留量检测 方法第1部分：液相色谱-质谱/质谱法 SN/T 0193.12015 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 务平台 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 01/16 印张1.25字数34千字 2016年4月第一版2016年4月第一次印刷 印数1—1100 书号：155066·2-29847 定价21.00元 SN/T 0193.1—2015 前 言 SN/T0193《出口皮革及皮革制品中五氯酚残留量检测方法》共分为2个部分： 第1部分：液相色谱-质谱/质谱法 第2部分：气相色谱法 本部分为SN/T0193的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分代替SN/T0193.1一1993《进出口皮革及皮革制品中五氯酚残留量检验方法第1部分：乙 化气相色谱法》。 本部分与SN/T0193.1—1993主要技术差异如下： 一对前处理方法和检测仪器进行改进，降低了方法检出限。 略去了抽样步骤。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国新疆出入境检验检疫 局、嘉兴市质量技术监督局 本部分主要起草人：赵善贞、韩丽、曲栗、伊雄海、周瑶、曹晨、张新、张旖、姜苏杰。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 0193.1—1993. 行业标准信息服务平台 1 SN/T 0193.1—2015 出口皮革及皮革制品中五氯酚残留量检测 方法第1部分：液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 SN/T0193的本部分规定了出口质猪皮、牛皮、羊皮及其制品中五氯酚残留量的液相色谱-质谱 质谱测定方法 本部分适用于棘质猪皮、牛皮、羊皮中五氯酚残留量定性确证和定量测定 2 方法提要 试样中的五氯酚用1%氢氧化钠溶液提取，HILB小柱净化，液相色谱-质谱/质谱检测和确证，外标 法定量。 3试剂材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.1乙腈：高效液相色谱级。 3.2 甲醇：高效液相色谱级。 3.3甲酸：高效液相色谱级。 3.4 乙酸铵：高效液相色谱级。 3.5 氢氧化钠。 3.6 HLB固相萃取小柱（60mg，3mL），或相当者。 3.71 1%的NaOH溶液：称取1.0g氢氧化钠（精确至0.01g）（3.5），水溶解并定容至100mL 3.8 35mmol/L乙酸铵溶液，含0.1%的甲酸：精确称取0.385g乙酸铵（精确至0.01g）（3.4），加 1mL甲酸，水稀释定容至1L 3.9含0.1%甲酸的乙腈：移取1mL甲酸（3.3)于1L乙腈（3.1)中。 3.10水-甲醇（95+5,V+V²）：量取95mL水，加入5mL甲醇（3.2），混匀。使用前配制。 3.11水-乙腈（90十10，V+Vz）：量取90mL水，加人10mL乙腈（3.1），混勺。使用前配制。 3.12标准品：五氯酚（pentachlorophenolCAS号87-86-5）纯度95%。 3.13标准储备溶液的配制：称取0.01g五氯酚标准品（精确至0.0001g）（3.12），用甲醇溶解定容至 终浓度为1.0mg/mL，一18℃避光冷冻保存，有效期为12个月。 3.14标准中间溶液的配制：移取100μL五氯酚标准储备液（3.13），用甲醇稀释至终浓度约为1.0μg/mL， 4℃避光冷藏保存，有效期为6个月。 3.15基质标准工作液的配制：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液（3.14）用基质空白溶液 配制成适当浓度的基质标准工作溶液（参考线性浓度范围为1.0ng/mL～100.0ng/mL），临用前现配。 3.160.22μm有机相滤膜。 4仪器和设备 4.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 1 SN/T 0193.1—2015 4.2 2分析天平：感量0.0001g和0.01g。 4.3旋涡混匀器。 4.4离心机：10000r/min。 4.5[ 固相萃取装置。 4.6氮吹浓缩装置。 5试样制备与保存 取样品中有代表性的部分约500g，用剪刀绞碎成约为1cm的小块，均分成两份，分别装人洁净容 器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于一18℃避光保存。 注：在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 6测定步骤 6.1提取 称取0.5g样品（精确至0.01g）于50mL塑料离心管中，加入25mL氢氧化钠溶液（3.7），涡旋混 合5min，8000r/min离心5min。取上清液，待过固相萃取小柱。 6.2净化 固相萃取小柱依次用3mL甲醇、3mL水活化，转移提取液（6.1）至固相萃取柱的顶部，以0.5mL/min 流速过柱。用3mL的水-甲醇（3.10）溶液淋洗柱子：用6mL甲醇溶液洗脱小柱，收集洗脱液，于40℃土 5℃的温度下蒸发洗脱液至干，用1.0mL水-乙睛溶液（3.11）振荡溶解残渣后，过0.22μm有机相滤膜 （3.16），滤液供液相色谱-质谱测定。 测定 7.1 参考高效液相色谱条件 参考高效液相色谱条件如下： a) 色谱柱：Cis柱，50mmX2.1mm，粒径1.8μm或相当者； b) 流动相：A：5mmol/L乙酸铵水溶液，含0.1%甲酸，B：含0.1%甲酸的乙腈； 息服务平 c) 流速：0.4mL/min，梯度洗脱程序见表1； d) 柱温：常温； e) 进样量：10μL。 表1 梯度洗脱程序表 梯度时间/min 流动相A/% 流动相B/% 95 5 0 80 20 4 80 20 4.5 95 5 9 95 5 2 SN/T 0193.1—2015 7.2参考质谱条件 参考质谱条件如下： a) 离子源：电喷雾ESI，负离子模式； b）扫描方式：多反应监测MRM； c）其他参考质谱条件：参见附录A。 7.3定量测定 根据试样中被测物的含量情况，选取响应值适宜的标准工作液进行色谱分析，标准曲线工作液应有 5个浓度水平。基质标准工作液和待测液中五氯酚的响应值均应在仪器线性响应范围内，如果含量超 过线性范围，应用基质空白溶液稀释到合适浓度后分析。在上述色谱条件下的五氯酚的参考保留时间 为5.68min。标准溶液中待测物的多反应监测色谱图参见附录B中图B.1。 7.4定性测定 按照液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准 品一致，定性离子对的相对丰度用相对于最强离子丰度的强度百分比表示，应当与浓度相当标准工作溶 液的相对丰度一致，相对丰度充许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 >50% >20%~50% >10%~20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.5空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 7.6结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式（1）计算试样中五氯酚的残留含量，计算结果需扣除空白值： (1) 1000 m 式中： 试样中五氯酚残留量，单位为微克每千克（ug/kg）； 服务平台 从标准曲线上得到的五氯酚残留量的溶液质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。 m 8测定低限、回收率 8.1 测定低限（LOQ) 本方法中五氯酚的测定低限为50μg/kg。 由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出液相色谱-质谱/质谱分析的通用参数。设定的 参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，下列给出的参数证明是可行的。 3 SN/T 0193.1—2015 8.2 回收率 采用本方法对质猪皮、羊皮、牛皮等3种基质进行添加回收试验，五氯酚在3种基质中的回收率 资料参见附录C中表C.1。 行业标准信息服务平台