ICS 67.050 SN C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0337—2019 代替SN/T0037—1995 出口植物源性食品中克百威及其代谢物 残留量的测定液相色谱一质谱／质谱法 Determination of carbofuran and its metabolite residues in plant-derived food forexport -HPLC-MS/MS method 业标准信息服务平台 以正式出 2019-12-27发布 2020-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 业标准信息服务平台 以正式出版文本为准 SN/T00372019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN0337一95《出口水果和蔬菜中克百威残留量检验方法》 本标准与SN0337一95相比，主要技术性变化如下： 标准名称由《出口水果和蔬菜中克百威残留量检验方法》修改为《出口植物源性食品中克百 威及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法》； -增加了克百威代谢物3-羟基克百威的检测； -扩大了标准检测的适用范围； 删减了抽样部分； 改进了样品前处理技术； 仪器方法由气相色谱法变更为液相色谱-质谱/质谱法。 降低了定量限，针对不同样品基质给出了克百威及其代谢物的添加回收率范围， 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。 、王超、李淑娟。 本标准主要起草人：李晓娟、吴玉平、张洋、方 施鹏斐、 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 SN0337—1995。 业标准信息服务平台 以正式出版文 业标准信息服务平台 以正式出版文本为准 SN/T00372019 出口植物源性食品中克百威及其代谢物残留量的测定 液相色谱一质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口植物源性食品中克百威及其代谢物3-基克百威残留量的测定方法 本标准适用于大米、小麦、大豆、花生、洋葱、油菜、菠菜、番茄、黄瓜、马铃薯、橙子、苹 果、香蕉和茶叶中克百威及其代谢物3-羟基克百威残留量的检测和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T2763-2016食品安全国家标准食品中农药最大残留量 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3原理 方法对提取液进行净化，采用液相色谱-质谱/质谱法测 定，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 业标准信： 4.1乙腈：色谱纯。 4.2 甲酸：色谱纯。 4.3乙酸。 4.4氯化钠。 4.5 无水硫酸镁。 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：40μm~60μm 4.6 4.7 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：40μm~60μm。人 石墨化炭黑（GCB）：40μm~120μm 4.9 0.5%乙酸－乙睛溶液：准确量取2.5mL乙酸于500mL容量瓶中，加人乙睛（4.1）定容，混匀。 4.10 0.5%甲酸溶液：准确量取2.5mL甲酸于500mL容量瓶中，加入一级水定容，混勾。 4.11 0.1%甲酸溶液：准确量取0.5mL甲酸于500mL容量瓶中，加人一级水定容，混勺。 4.12 乙睛－水溶液（30+70,体积比）：取30mL乙（4.1）和70mL一级水混合均勺 4.13 30.1%甲酸－乙腈溶液：准确量取0.5mL甲酸于500mL容量瓶中，加人乙腈（4.2）定容，混匀。 4.14 克百威标准物质：Cz2HjsNO3，CAS号：1563-66-2，纯度大于等于90%。 4.153-羟基克百威标准品：C/2Hj5NO4，CAS号：16655-82-6，纯度大于等于90%。 4.16克百威标准储备液：准确称取10mg（精确至0.1mg）克百威标准品于10mL容量瓶中，用乙睛 1 SN/T0037—2019 （4.2）溶解并定容，配制成浓度约为1mg/mL的标准储备液，于0℃~4℃冰箱内避光保存。 4.173-基克百威标准储备液：准确称取10mg（精确至0.1mg）克百威标准品于10mL容量瓶中，用 乙睛（4.1）溶解并定容，配制成浓度约为1mg/mL的标准储备液，于0℃~4℃冰箱内避光保存。 4.18克百威标准中间液：准确吸取适当体积的克百威标准储备液，用乙睛（4.1）配制成浓度为10.0 mg/L的标准中间液，于0℃～4℃冰箱内避光保存。 4.193-羟基克百威标准中间液：准确吸取适当体积的3-羟基克百威标准储备液，用乙睛（4.1）配制 成浓度为10.0mg/L的标准中间液，于0℃~4℃冰箱内避光保存。 4.20克百威和3-羟基克百威混合标准工作液：取适量的克百威标准中间液（4.18）和3-羟基克百威 （4.19）标准中间液，用乙睛－水溶液（4.12）配制成标准工作液，该工作液需现用现配。 5仪器设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2电子天平：感量0.01mg和0.01g 5.3振荡器。 5.4旋涡混合器。 5.5离心机：最高转速不低于10000r/min。 5.6氮吹浓缩仪。 5.7 高速离心管：规格为50mL和5mL。 6试样制备与保存 6.1试样制备 出版文本为准 内，密封并标明标记。 6.2试样保存 以正 粮谷、油料及茶叶类试样于0℃～4℃保存；水果及蔬菜类试样于-18℃以下冷冻保存。在抽 你准信息 样及制样的过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1蔬菜和水果类：称取5g试样（精确至0.01g于50mL离心管中，加人10mL0.5%乙酸-乙腈溶 液（4.9），涡旋混匀后振荡提取30min，加人约2g氯化钠和约2g无水硫酸镁，涡旋混匀，20000r/min 条件下离心3min，取上清液待净化 7.1.2粮谷、油料类和茶叶类：称取2g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人5mL0.5%乙酸溶 液（4.10），涡旋混匀静置30min，加人10mL0.5%乙酸－乙腈溶液（4.9），涡旋混匀后振荡提取30min， 加人约2g氯化钠和约2g无水硫酸镁，涡旋混匀，于10000r/min条件下离心3min，取上清液待净化。 7.2净化 准确称取250mg无水硫酸镁、100mgPSA、100mgC18和50mgGCB净化材料加入5mL高速 2 SN/T 0037—2019 离心管中。准确移取2mL上清液（7.1）加入5mL高速离心管中，涡旋混匀，于10000r/min离心 3min，取1mL上清液置于玻璃管中，于40℃下氮气吹至近干，再加人1.0mL乙腈－水溶液（4.12） 充分溶解定容，过0.2μm尼龙滤膜，待LC-MS/MS测定。 7.3液相色谱一质谱/质谱测定 7.3.1液相色谱条件 7.3.1.1 色谱柱：Ci，100mm×2.1mm×1.7μm，或性能相当者。 7.3.1.2 柱温：45℃。 7.3.1.3 进样量：5μL。 7.3.1.4 流动相及梯度洗脱条件见表1。 表 1. 流动相及梯度洗脱条件 时间 /min 流速/mL/min 流动相A/%（0.1%甲酸-乙睛） 流动相B/%（0.1%甲酸溶液） 0.00 0.4 5.0 95.0 0.50 0.4 5.0 95.0 2.00 0.4 95.0 5.0 3.00 0.4 5.0 3.50 0.4 95.0 7.3.2质谱条件 仪器质谱条件参见附录 7.3.3定性测定 按照7.3.1的条件测定标准溶液及样液，如果样液与标准溶液质量色谱峰保留时间相差不超过 土2.5%，在扣除背景后的质谱图中，所选择的监测离子全部出现，且定性离子的相对丰度（用相对 于最强离子丰度的强度百分比表示）与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差 不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。 表2定性确证时相对离子丰度最大容许误差 相对离子离子（基峰） >50 10 ~ 20 ≤10 允许的相对偏差 ± 20 ± 25 ±30 ± 50 7.3.4定量测定 在7.3.1仪器最佳工作状态下，对标准工作溶液进样，以待测物色谱峰峰面积为纵坐标，标准工 作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应 值应在仪器测定的线性范围内；如果超出线性范围，应进行适当稀释后进样测定。在上述色谱条件下， 克百威和3-羟基克百威的保留时间分别约为2.2min和1.9min，克百威和3-基克百威标准品的选 3