ICS 67.050 SN C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0654—2019 出口水果中克菌丹残留量的测定 气相色谱法和气相色谱-质谱/质谱法 Determination of captan residues in fruits for Export GC and GC-MS/MS method 代替标准SN0654—1997 2019-12-27发布 2020-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T0654—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN0654一1997《出口水果中克菌丹残留量检验方法》 本标准与SN0654一1997《出口水果中克菌丹残留量检验方法》相比，主要技术变化如下： 标准名称修改为《出口水果中克菌丹残留量的测定气相色谱法和气相色谱－质谱/质谱法》； 增加了梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、香蕉、火龙 果、西瓜、香瓜等基质，删除了抽样环节； 修改了样品前处理方法，固相萃取法改为基质分散固相萃取法； 一重新修订了方法的定量限：气相色谱法为0.02mg/kg，气相色谱-质谱/质谱联用法为 0.01mg/kg ; 采用气相色谱法替代了原标准中的高效液相色谱法； 增加了气相色谱－质谱/质谱法为确证方法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国郑州海关。 本标准主要起草人：张守杰、刘胜男、乔晴、华向美、孙武勇、祝伟霞、张淑霞、王素方、张 玉娟、庞文月、辛莹。 本标准所替代标准的历次版本发布情况 SN0654—1997 业标准信息服务平台 SN/T 0654—2019 出口水果中克菌丹残留量的测定 1范围 本标准规定了出口水果中克菌丹残留量的气相色谱和气相色谱一质谱/质谱检测方法 本标准适用于苹果、梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、 香蕉、火龙果、西瓜、甜瓜等水果中克菌丹的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准 CB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 文本为准 试样中的克菌丹经磷酸溶液浸泡，用乙涡旋振荡提取，基质分散固相萃取净化后，注入气相 色谱仪或气相色谱－质谱/质谱联用仪测定测定，外标法定量。 4试剂 除另有规定外，所有实验用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682中一级水的要求。 4.1正已烷：色谱纯 4.2乙：色谱纯。 4.3键合硅固相萃取吸附剂填料伯仲胺PSA（primarysecondaryamine）：粒度40μm~70μm。 4.4键合硅固相萃取吸附剂填料十八烷基硅烷键合硅胶C18（ostade-cylsilane）：粒度40μm~70μm。 4.5石墨化碳黑填料GCB（graphitizedcarbonblack）：粒度40μm～70μm。 4.6氯化钠。 4.7无水硫酸钠：550℃马弗炉内烘4h，200°℃时取出置于干燥器内冷却后装瓶备用。 4.8磷酸。 4.9磷酸溶液（10%）：量取10mL磷酸（4.8）溶于水中并用水定容至100mL。 4.10 克菌丹标准品（Captan，C,H.Cl,NO,S，CASNO：133-06-2）：纯度≥99%。 4.11 克菌丹标准储备溶液：准确称取适量克菌丹标准品，用正已烷配制成浓度为0.1mg/mL的标 准储备液，棕色瓶中于0℃~4℃冰箱中保存。 4.12克菌丹标准工作溶液：吸取适量标准储备溶液（4.11）用正已烷稀释成合适浓度的标准工作液。 4.13有机相滤膜：0.22μm。 5主要仪器和设备 5.1气相色谱仪：带电子捕获检测器 1 SN/T06542019 5.2气相色谱-质谱/质谱仪：配备EI源 5.3天平：感量为0.1mg和0.01g。 5.4氮吹仪。 5.5涡旋混合器。 5.6离心机：转速≥5000r/min。 5.7 超声波发生器。 5.8 刻度离心管：15mL。 6样品制备与保存 从所取全部样品中取出代表性样品约500g按照GB2763要求处理，用捣碎机全部磨碎混合均 匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃C以下冷冻存放。 在样品制备和保存过程中，应防止样品受到污染或者发生残留物含量的变化。 7测定步骤 7.1提取 称取5.0g试样（精确至0.01g），置于50mL离心管内。加5mL10%磷酸溶液（4.9）浸泡 5min，加人25mL乙腈（4.2）和7g氯化钠（4.6）剧烈涡旋振荡混勾提取10min，在5000r/min 下离心5min，取10mL上清液于15mL具塞试管内待净化。 7.2净化 在上述装有上清液的具塞试管内加人100mgPSA填料、50mgC18填料和30mgCCB填料，充 分涡旋1min，5000r/min离心1min，准确移取5ml净化液至15mL具塞试管内在40℃下氮吹至 近干，加人1.0mL正已烷（4.1）溶解残渣并超声15s后加入0.1g无水硫酸钠（4.7）除水，涡旋 1min，过0.22μm滤膜，注入气相色谱仪或气相色谱-质谱/质谱联用仪分析。 7.3测定 7.3.1仪器条件 7.3.1.1气相色谱参考条件如下： a）色谱柱：HP-5，柱长30m，内径0.32mm，膜厚0.25μm或同等性能的色谱柱； 慧服务平台 b）柱温度程序：初始温度50℃保持1min，以8℃/min升温至180℃，保持1min，再以 20℃C/min升温至300℃，保持2min； c）进样口温度：240℃； d）检测器温度：300℃； e）载气：氮气（纯度≥99.999%），1.0mL/min； f）尾吹气：氮气（纯度99.999%），30mL/min； g）进样方式：不分流进样； h）进样量：1.0μL。 7.3.1.2气相色谱－质谱/质谱参考条件如下： a）色谱柱：HP-5MS，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm或同等性能的色谱柱； 2 SN/T 0654—2019 b）柱温度程序：初始温度50℃保持1min，以10℃/min升温至200℃，保持1.5min，再以 20C/min升温至300℃，保持2min； c）进样口温度：260℃； d）色谱－质谱接口温度：280℃； e）离子源温度：180℃； f）载气：氨气（纯度≥99.999%），1.0mL/min； g）离子源：电子轰击源（EI源） h）进样方式：不分流进样，1.5min开阀； i）进样量：1.0μL； j）溶剂延迟：5min； k）扫描方式：多反应离子监测模式（SRM）；其母离子m/z147.97，子离子m/z分别为104.87* 78.97、69.93。 7.3.2气相色谱法测定 根据样液中待测物含量情况，选定含量相近的标准系列工作溶液。标准工作溶液和样液中待测 农药的相应值均应在仪器的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条 件下，克菌丹保留时间约为18.81min，标准品的色谱图参见附录A中图A.1。 7.3.3气相色谱-质谱/质谱法测定及确证 根据样液中被测物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中克菌丹 的响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。如果样液与标 准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间处有色谱峰出现，并且在扣除背景后的样品质量 色谱图中，所选离子均出现，所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内 （允许范围见表1），则可确定样品中存在对应的被测物。在7.3.1.2条件下，克菌丹的保留时间为 18.94min，其气相色谱-质谱/质谱MRM图见附录A中图A.2。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度1% > 50 > 20~50 > 10~20 ≤10 允许的相对偏差1% ± 20 ± 25 ± 30 ± 50 7.3.4空白试验 除不称取试样外，均按上述测定条件和步骤进行。 8结果计算与表述 用GC或GC-MS/MS数据处理系统或按式（1）计算试样中克菌丹的残留量 AxcxV (1) A,xm 式中： X一试样中克菌丹的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； *为定量离子。 3