ICS 67.040 SN CCS X 04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2231—2021 代替SN/T2231—2008 出口食品中呋虫胺及其代谢物残留量的 测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of dinotefuran and its metabolites reduces in foods for export HPLC- MS/MS method 2021-11-22发布 2022-06-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T 2231—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规则 起草。 本文件代替SN/T2231一2008《进出口食品中虫胺残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》， 与SN/T2231—2008相比，主要技术变化如下： 增加了两种呋虫胺代谢物残留量的检测； 一扩大了适用范围，检测基质由9种增加至19种； 改进了样品的提取和净化方法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：青岛海关技术中心、中国检验检疫科学研究院、山东杰诺检测服务有限公司。 本文件主要起草人：孙利、张禧庆、王建华、池连学、冷蕾，李立 本文件所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T2231—2008。 1 SN/T 2231—2021 出口食品中呋虫胺及其代谢物残留量的 测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口食品中呋虫胺及其代谢物1-甲基-3-（四氢-3-呋喃甲基）脲和1-甲基-3-（四氢-3- 呋喃甲基）二氢胍残留量检测和确证方法。 本文件适用于小麦、大米、玉米、花生、大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝 卜、苹果、鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲮鱼、牛奶中呋虫胺及其代谢物1-甲基-3-（四氢-3-呋喃甲基)脲和1-甲基 3-（四氢-3-呋喃甲基）二氢胍残留量的测定和确证。 2 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB2763—2019食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 4方法提要 试样用乙睛超声提取，提取液经C18固相萃取（SPE）小柱净化，初始比例流动相定容，液相色谱-串 准信息 联质谱测定，外标法定量。 5 试剂和材料 5.1乙腈：色谱纯。 5.2正已烷：色谱纯。 5.3甲酸：色谱纯。 5.4针式滤器：亲水PTFE膜，0.22μm。 5.50.1%甲酸乙睛溶液：取1.0mL甲酸（5.3）至1000mL容量瓶中，并用乙睛（5.1)定容至刻度，充 分混匀，备用。 5.60.1%甲酸水溶液：取1.0mL甲酸（5.3），至1000mL容量瓶中，并用水定容至刻度，充分混匀， 备用。 5.7定容液：分别吸取0.1%甲酸乙睛溶液（5.5）和0.1%甲酸水溶液（5.6）按照体积比5：95混合均 1 SN/T 2231—2021 匀，备用。 5.8C18SPE柱：500mg，3mL，或相当。使用前需用3.0mL乙睛，3.0mL水，3.0mL提取液活化， 保持柱体湿润。 5.9虫胺标准物质（Dinotefuran，CAS登记号：165252-70-0，分子式：C7H14N4O4）：纯度≥99.9%。 5.101-甲基-3-（四氢-3-呋喃甲基）标准物质（DinotefuranmetaboliteUF，CAS登记号：457614-34 5，分子式：C7H14N202）：纯度≥99.9% 5.111-甲基-3-（四氢-3-喃甲基）二氢胍标准物质（DinotefuranmetaboliteDN，CAS登记号： 457614-32-3，分子式：C7H15N30)：纯度≥97.6%。 5.12标准储备溶液：分别精确称取适量三种标准物质（精确至0.1mg）于50mL容量瓶中，用乙睛配 制成200μg/mL的标准储备液，0℃～4℃保存，可使用1年。 5.13标准工作溶液：根据需要用定容液（5.7）稀释配制成适当浓度的标准工作液，现用现配。 5.14乙睛饱和的正已烷溶液：分别取适量等体积的乙睛和正已烷，混合均勾，静置分层后，上层溶液即 为乙睛饱和的正已烷溶液。 6仪器和设备 6.2分析天平：感量分别为1mg和0.1mg。 6.3超声波清洗器。 6.4涡旋混合器 6.5固相萃取装置，含真空泵。 6.6比色管：25mL。 6.7 移液器：100μL~1000μL。 出版文本 6.8聚丙烯离心管：50mL和2.0mL。 6.9低速冷冻离心机：5500r/min，可控温4℃。 6.10 高速离心机：10000r/min。 6. 11 刻度定容管：3.0mL或5.0mL，精度为0.1mL。 业标准1 7 试样的制备与保存 7.1制样要求 制样操作过程中必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 7.2样品制备 7.2.1将小麦、大米、玉米、花生样品充分搅拌，均质，分出0.5kg作为试样，置于清洁样品容器中，密 封，并做好标记。将制备好的试样于0℃～4℃冷藏保存。 7.2.2将大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝卜、苹果、鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲮 鱼、牛奶样品，按照GB2763附录A中食品类别及测定部位进行制样处理。样品置于清洁样品容器中， 密封，并做好标记。将制备好的试样于一18℃冷冻保存。 2 SN/T 2231—2021 8测定步骤 8.1提取 8.1.1小麦、大米、玉米、花生样品 称取5g样品（精确至0.01g）至50mL离心管中，加8.0mL水浸润30min，加人10mL乙睛 （5.1），涡旋混合2min，超声提取15min，于4000r/min离心5min，上清液转移至25mL比色管 （6.6）中，残留物再用10mL乙（5.1），涡旋混合2min，于4000r/min离心5min，合并提取液于 25mL比色管（6.6）中，并用乙睛（5.1)定容至刻度，混合均匀，所得提取液待净化。 8.1.2、大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝卜、苹果样品 称取5g样品（精确至0.01g）至50mL离心管中，加人10mL乙睛（5.1），涡旋混合2min，超声提 取15min，于4000r/min离心5min，上清液转移至25mL比色管（6.6）中，残留物再用10mL乙 (5.1)定容至刻度，混合均匀，所得提取液待净化。 8.1.3鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲮鱼、牛奶样品 称取5g样品（精确至0.01g）至50mL离心管中，加人10mL乙睛（5.1），迅速涡旋混合2min，超 10mL乙腈（5.1），涡旋混合2min，于4℃下4000r/min离心5min，合并提取液于25mL比色管 （6.6）中，并用乙（5.1)定容至刻度，混合均匀，所得提取液待净化。 8.2净化 8.2.1小麦、大米、玉米、花生、鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲮鱼、牛奶样品 吸取7.1.1和7.1.3提取液2.0mL，直接过预先处理好的C18SPE柱（5.8），直接收集。准确吸取 1.0mL净化液于刻度定容管（6.12）中，40℃水浴氮气吹至近干，用定容液（5.7）定容至1.0mL刻度， 混匀后转移至2.0mL塑料离心管中，加人1.0mL乙睛饱和正已烷溶液（5.14），涡旋震荡1min，于 10000r/min离心2min，吸取下层溶液，过针式滤器（5.4），供上机检测。 8.2.2大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝卜、苹果样品 吸取7.1.2提取液2.0mL，直接过预先处理好的C18SPE柱（5.8），直接收集。准确吸取1.0mL 净化液于刻度定容管（6.12)中，40℃水浴氮气吹至近干用定容液（5.7)定容至1.0mL刻度，混匀后 服务平台 过针式滤器（5.4)，供上机检测。 8.3测定 8.3.1液相色谱参考条件 液相色谱参考以下条件： a）色谱柱：高强度硅胶键合C18液相色谱柱（1.8μm，2.1mm×100mm），或相当者。 b）流动相：A：含0.1%甲酸的水溶液（5.6）；B：含0.1%甲酸的乙（5.5），梯度洗脱条件见 表 1。 c）流速：0.30mL/min;； 3 SN/T 2231—2021 d) 柱温：35℃； e） 进样量：1.0μL。 表1 梯度洗脱条件 时间（min） 流速（mL/min） %A %B 曲线 initial 0.30 95 5 6 0.6 0.30 95 5 6 4. 0 0.30 5 95 6 6.0 0.30 5 95 6 6. 1 0.30 95 5 1 8. 0 0.30 95 5 1 8. 3.2 质谱参考条件 质谱参考以下条件： 离子化模式：电喷雾电离正离子模式（ESI十）； a) b) 质谱扫描方式：多反应监测（MRM）； c) 分辨率：单位分辨率； d) 8. 3. 3 定性测定 中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，其 偏差不超过表2规定的范围，则可确定为样品中存在对应的待测物。 表 2 定性时相对离子丰度的最大允许偏差 >50% 相对离子丰度 >20%~50% >10%~20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 8.3.