SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4034—2014 进出口化妆品中萘酚的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of naphthols in cosmetics for import and export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4034—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：康明芹、李爱军、牟峻、张代辉、胡婷婷、赵韫慧。 行业标准信息服务平台 SN/T4034—2014 进出口化妆品中萘酚的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本标准规定了化妆品中α-萘酚与β-萘酚的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于染发剂、烫发水、弹力素、啫喱水、指甲油、粉底等化妆品中α-萘酚与β-萘酚的测定和 确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样用甲醇溶液提取，经固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水， 4.1甲醇：HPLC级。 4.2乙腈:HPLC级。 4.3标准物质：α-萘酚（α-naphthol,CASNo.90-15-3,CloH.O）,β-萘酚（β-naphthol,CASNo.135-19-3, C1.HO）。纯度均≥98%。 4.450%甲醇溶液（体积分数）：取500mL甲醇，用水稀释并定容至1000mL。 4.5标准储备溶液：1.0mg/ml。准确称取适量标准品（精确至0.0001g），用甲醇分别配制成浓度为 1.0mg/mL的标准储备溶液，0℃～4℃保存。 4.6标准工作溶液：从标准储备溶液（4.5）中准确吸取1.0mL于100mL容量瓶中，用甲醇稀释成 10.0μg/mL混合标准中间溶液。使用时再根据需要用空白基质液（4.7）稀释配制适当浓度的标准工作 溶液，现用现配。 4.7空白基质液：选择不含萘酚且与待测试样同种类的试样，按照测定步骤7.1和7.2处理得到空白基 质液。 4.8固相萃取柱（SPE）：聚苯乙烯-二乙烯基苯-吡咯烷酮（PLS），150mg，6mL,或相当者；使用前依次 用5mL甲醇、5mL水活化。 4.9微孔滤膜：有机系，0.22μm。 5仪器与设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。 1 SN/T 4034—2014 5.2 2超声波发生器。 5.3天平：感量0.0001g和0.01g。 5.4离心机：最高转速不低于10000r/min。 5.5涡旋混合器。 5.6 5真空泵。 6 样品制备与保存 取有代表性样品，混匀，于0℃～4℃保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或 待测物发生含量的变化。 测定步骤 7 7.1提取 称取0.5g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人10ml50%甲醇溶液（4.4），涡旋混合 2min，超声5min，以10000r/min离心10min，上清液待净化。 7.2净化 （4.4)和5mL水洗涤，弃去淋洗液，负压抽干，用3mL甲醇洗脱，收集洗脱液至试管中，40℃以下氮气 浓缩至近干，用甲醇溶解并定容至1mL，经0.22μm滤膜（4.9）过滤，供LC-MS/MS测定。 7.3测定 7.3.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： a) 色谱柱C1s,2.1mm×150mm,3.5μm或相当者; b) 柱温：室温； c) 流速：0.25mL/mim； d) 进样量：10μL； e) 流动相及梯度洗脱条件见表1 表1流动相及梯度洗脱条件 时间/min 乙腈/% 水/% 0 20 80 6.00 80 20 8.00 80 20 8.01 20 80 20.0 20 80 7.3.2质谱参考条件 质谱参考条件如下： 2 SN/T4034—2014 电离方式：电喷雾电离（ESI)； a) b) 扫描方式：负离子扫描； c) 检测方式：多反应监测（MRM)； d) 气帘气（CUR)：30psi(0.75MPa)； e) 雾化气(GS1):50psi(1.25MPa)； f) 辅助气（GS2)：50psi(1.25MPa)； g) 电喷雾电压（IS)：—4500V； h) 碰撞气(CAD)：6.0psi(0.15MPa)； i) 离子源温度（TEM）：550.0℃； i) 定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表2。 表2目标化合物的监测离子对、去簇电压和碰撞能量 母离子 子离子 去簇电压 碰撞能量 化合物名称 m/ m/ V 115.0 90 68 α-萘酚 143.0 41.24 -90 -68 65.0 -90 35 β-萘酚 143.0 115.0a 90 35 为定量离子。 7.3.3 定量测定 根据试样中被测样液中被测组分的含量情况，选取响应值相近的标准工作液进行分析，对于高浓度 样品应适当进行系列稀释。标准工作液和样液中被测组分的响应值均应在仪器线性响应范围内。在上 述色谱条件下，β-萘酚和α-萘酚参考保留时间分别约为9.2min和9.5min，外标法定量。标准溶液的多 反应监测色谱图参见附录A 7.3.4定性测定 标准溶液及样液均按7.3.1和7.3.2规定的条件进行测定，如果样液中与标准溶液相同的保留时间 有峰出现，则对其进行确证。如经确证分析被测组分质量色谱峰保留时间与标准物质相一致，所选择的 离子均出现；同时所选择离子的丰度比与标准样物质相关离子的相对丰度一致且在允许偏差之内（见 表3），被确证的样品则可判定为阳性检出。 表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 7.3.5空白试验 除不称取试样外，均按上述步骤进行。 3 SN/T 4034—2014 结果计算和表述 按式(1)计算试样中β-萘酚和α-萘酚含量，计算结果应扣除空白值： p,XV×1000 1m m×1000 式中： 试样中被测组分含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； w; p; 从标准曲线读出的被测组分溶液浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； m 最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。 9 测定低限和回收率 9.1 测定低限 本方法的测定低限均为0.20mg/kg。 9.2 回收率 不同基质在不同添加水平下的回收率实验数据参见附录B。 行业标准信息服务平台 SN/T4034—2014 附录A （资料性附录） 标准溶液多反应监测(MRM)色谱图1) 9.26 3.6e51 β-萘酚、 度2.0e5 α-萘酚 1.0e5 19.51 0.0V 1.02.03.04.05.06.07.0 8.09.010.011.012.013.014.015.016.017.018.019.020.0 t/min 0.51 143.0/41.2 2000 1.02.03.04.0 5.0 6.07.0 9.010.011.012.013.014.015.016.017.018.019.020.0 t/min 9.26 3.6e5 33.0e5 143.0/115.0 9.53 0.00 1.02.03.04.0 6.07.0 8.09.010.011.012.013.014.015.016.017.018.019.020.0 5.0 t/min 9. 25 2500 2000 9.51 143.0/65.0 度1500 1000 500 1.26 04 t/min 图A.1α-萘酚和β-萘酚标准溶液多反应监测（MRM)色谱图及提取离子流图（0.2mg/L） 息服务平台 1) 非商业性声明：附录A所列参数是在API4000质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考， 并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。 5