SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4147—2015 进出口化妆品中利多卡因、丁卡因、 辛可卡因的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of lidocaine,tetracaine and dibucaine in cosmetics for import and export-LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4147—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：张曼、张海滨、肖亚兵、何佳、林安清、许泓、刘煊、章骅 行业标准信息服务平台 1 SN/T4147—2015 进出口化妆品中利多卡因、丁卡因、 辛可卡因的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了化妆品中利多卡因、丁卡因和辛可卡因的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于洗面奶、面霜、爽肤水中利多卡因、丁卡因和辛可卡因的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 用甲醇提取化妆品中的利多卡因、丁卡因和辛可卡因，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法 定量。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：液相色谱级。 4.2甲醇水溶液（1+9，体积比）：10mL甲醇加水稀释至100mL。 4.3利多卡因标准品（lidocaine，CAS号137-58-6，C14H22NO）：纯度大于等于98%。 4.4丁卡因标准品（tetracaine，CAS号94-246.C,HN2Oz）：纯度大于等于97%。 4.5辛可卡因（dibucaine，CAS号85-79-0.C2HzN，Oz）：纯度大于等于97%。 4.6标准储备溶液：分别准确称取适量的标准品用甲醇溶解，配制成0.1mg/mL标准储存溶液，4℃冷 藏保存。保存期6个月。 4.7混合标准储备溶液：分别移取适量标准储备溶液（4.6），用甲醇稀释，溶液浓度为1ug/mL。4℃冷 藏保存。保存期6个月。 4.8混合标准工作溶液：根据需要用甲醇将混合标准储备溶液稀释成标准工作溶液，4℃冷藏保存。 保存期3个月。 4.9滤膜：孔径0.22μm，有机相。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪，配有电喷雾离子源。 1 SN/T 4147—2015 5.2 2分析天平：感量分别为0.01g和0.0001g 5.3 3高速离心机：10000r/min。 5.4涡旋混合器。 5.5超声波水浴。 5.6 氮气吹干仪。 6测定步骤 6.1试样处理 称取1.0g化妆品试样（精确到0.01g），于50mL具塞离心管中，加人20mL甲醇，涡旋30s，在超 声波水浴内超声20min，于4℃10000r/min下离心5min，移取上清液1.0mL。移取液用甲醇水溶 液（4.2）定容至5.0mL，混匀，过0.22um滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱测定。 6.2测定 6.2.1 色谱条件 6.2.1.1 色谱柱：Cis100mm×4.6mm柱或相当者。 6.2.1.2 流动相：甲醇-水（90十10，体积比）。 6.2.1.3 流速：0.5mL/min。 6.2.1.4 柱温：25℃。 6.2.1.5 进样量：20uL。 6.2.2 质谱条件 6.2.2.1 离子化方式：电喷雾电离。 6.2.2.2 扫描方式：负离子扫描。 6.2.2.3 检测方式：多反应监测（MRM） 6.2.2.4 雾化气、气帘气、辅助气使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件见附录A。 6.2.2.5 监测离子对参见附录 A中表 A.1。 6.2.2.6 电喷雾电压：4500V。 6.2.3 液相色谱串联质谱测定 根据试样中被测样液的含量情况，选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如 超出仪器线性响应范围应进行稀释。在上述色谱条件下利多卡因、丁卡因和辛可卡因参考保留时间约 为3.4min,3.8min和4.3min，标准溶液的选择性离子流图参见附录B中图B.1。 6.2.4液相色谱-质谱/质谱确证 按照液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品中待测物质的保留时间与标准溶液 中待测物质的保留时间偏差在土2.5%之内。定量测定时采用标准曲线法测定。定性时应当与浓度相 当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围，则可判断样品中存在对应 的被测物。 2 SN/T 4147—2015 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 6.2.5 空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 7 结果计算 用色谱数据处理机或按式（1)计算试样中所测成分含量，计算结果需扣除空白值： (1) m X1 000 式中： X, 试样中所测成分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 从标准曲线上得到的所测成分的溶液浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； Ci V 试样最终定容体积，单位为毫升（mL）； m 最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。 8 测定低限及回收率 8.1 测定低限 利多卡因、丁卡因和辛可卡因测定低限均为0.5mg/kg。 8.2 回收率 标准添加利多卡因丁卡因和辛可卡因回收率的实验数据见表2。 表2 标准添加利多卡因、丁卡因和辛可卡因回收率的实验数据 回收率/% 化合物名称 添加浓度/（mg/kg） 洗面奶 面霜 爽肤水 0.5 85.6~103.9 87.2~107.2 80.3~101.3 利多卡因 1.0 78.3~105.1 81.7~101.7 86.3~101.5 5.0 83.2~99.5 82.5~101.3 87.3~102.5 0.5 83.3~99.8 79.8~102.1 83.2~106.8 丁卡因 1.0 88.4~98.9 83.0~99.8 84.0~98.9 81.0~107.9 89.9~105.5 5.0 82.8~105.5 0.5 83.3~101.2 88.9~105.5 81.6~103.3 辛可卡因 1.0 87.6~99.5 81.0~99.2 87.6~98.4 5.0 90.6~100.2 88.4~108.8 89.9~102.4 3 SN/T 4147—2015 附录A （资料性附录） 质谱参考条件 监测离子对及电压参数： a) 雾化气：高纯氮气； b) 电喷雾电压（IS)：-4500V； c) 扫描方式：负离子扫描； d) 检测方式：多反应监测（MRM)； e) 离子源温度（TEM)：700℃； f) 雾化气压力（GS1）：68.950kPa（10psi)； g) 气帘气压力（CUR）：241.325kPa（35psi)； h) 辅助气压力（GS2）：241.325kPa（35psi)； i) 监测离子对、去簇电压（DP）、碰撞能量（CE)和碰撞室出口电压（CXP)见表A.1。 表 A.1 离子对、去簇电压（DP）、碰撞能量（CE）和碰撞室出口电压（CXP） 碰撞能量 碰撞室出口电压 待测物 离子对 m/z 去簇电压(DP)/V (CE)/V (CXP)/V 233.2→120.1" 60 28 20 利多卡因 233.2-215.2 65 24 20 262.8-148.0* 60 31 29 丁卡因 262.8-142.9 60 28 -24 341.8→200.0 -80 24 25 辛可卡因 341.8→142.9 80 -40 25 业标准信息服务平台 定量离子对 4 SN/T 4147—2015 附录B （资料性附录) 利多卡因、丁卡因和辛可卡因混合标准溶液总离子流图 3. 40 Max.3.2ecps 0.0 6 t/min 图B.1利多卡因、丁卡因和辛可卡因（1μg/mL）混合标准溶液的总离子流图 行业标准信息服务平台 5