SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4321—2015 食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中 N,N'-二 (2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Food contact materials-Polymer-Determination of bis (2,6-disopropylphenyl) carbodimide in food simulants- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 标准信息服务平台 2015-09-02发布 2016-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4321—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：韩伟、于艳军、熊中强、胡新功、张颖、杜宇。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4321—2015 食品接触材料：高分子材料 食品模拟物中 N,N'-二 （2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了食品模拟物中N,N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的液相色谱-质谱/质谱测定 方法。 本标准适用于3%（质量浓度）乙酸、10%（体积分数）乙醇溶液、20%（体积分数）乙醇溶液、50%（体 积分数）乙醇溶液和橄榄油五种食品模拟物中N,N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T23296.1食品接触材料塑料中受限物质 塑料中物质向食品及食品模拟物特定迁移试 验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南 3方法提要 样品经食品模拟物浸泡后，取一定量食品模拟物试液（其中橄榄油试液需进行超声辅助液液萃取）， 在弱酸性条件下N,N二（2.6-二异丙基苯基）碳二亚胺与水反应生成相应的脲衍生物，通过采用液相 色谱-质谱/质谱仪测定衍生物的含量来间接测定N,N'-二（26-二异丙基苯基）碳二亚胺的含量，外 标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水 4.1N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺［bis（2，6-disopropylphenyl）carbodiimide］标准品，CAS 号：[2162-74-5]，纯度≥98.0% 4.2冰乙酸。 4.3无水乙醇。 4.4 乙腈：色谱纯。 4.5 甲醇：色谱纯。 4.6甲酸：色谱纯。 4.7 食品模拟物，根据要求从以下模拟物中选择若干种进行迁移试验： a）3%（质量-体积浓度）乙酸溶液：称取30.0g（精确到0.1g）冰乙酸（4.2），用水稀释并转移到1L 1 SN/T4321—2015 容量瓶中，水定容至刻度。 c)2 20%（体积分数）乙醇溶液：量取200mL无水乙醇（4.3）于1L容量瓶中，水定容至刻度。 d）50%（体积分数）乙醇溶液：量取500mL无水乙醇（4.3）于1L容量瓶中，水定容至刻度。 e）精制橄榄油。 4.9N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准储备液：准确称取N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二 亚胺0.05g（精确至0.1mg），使用甲醇溶解并转移至500mL棕色容量瓶中后用甲醇（4.5）定容至刻度， 充分混匀，得到浓度为100mg/L的标准储备液，4℃下保存，备用。 准中间液，4℃下保存，备用。 4.11微孔滤膜：孔径0.2μm。 5仪器和设备 5.1液相色谱串联四级杆质谱仪（LC-MS/MS）：配有电喷雾离子源（ESI源）。 5.2超声波萃取仪。 5.3具塞试管：10ml。 5.4注射器：2mL。 5.5微量注射器：10μL，100μL,1000μL。 5.6 分析天平：感量0.1mg和0.01g 6试液的制备 6.1 标准工作溶液的制备 6.1.1水基食品模拟物标准工作溶液 用微量注射器分别准确量取10μL、20μL、50μL、100μL、500μL、1000μ的N，N-二（2.6-二异 丙基苯基）碳二亚胺标准中间液（4.10）于6个10ml容量瓶中，分别在每个容量瓶中加人0.1mL的甲 酸（4.6），再分别用迁移试验中选用的水基食品模拟物定容，摇匀后室温下静置24h，得到相应介质中 N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的浓度分别为0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、 0.10mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L的标准工作溶液 6.1.2橄榄油标准工作溶液 分别准确称取2g（精确至0.01g)橄榄油至6个具塞试管中，用微量注射器分别移取2uL、4μL、 10μL、20μL、40μL、100μL的N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准中间液（4.10）于试管中，得 到浓度分别为0.01mg/kg.0.02mg/kg、0.05mg/kg、0.10mg/kg.0.20mg/kg、0.50mg/kg的标准工作 溶液。分别在每个试管中加人4mL甲醇-水混合液（4.8）和40μL的甲酸（4.6），40℃超声提取30min 后，静置分层，用注射器吸取下层水溶液，得到不同浓度的脲衍生物标准工作溶液，经0.2um滤膜过滤 后，供液相色谱-质谱/质谱测定。 2 SN/T 4321—2015 6.2食品模拟物试液的制备 6.2.1试样预处理 清洁剂洗净试样，用自来水冲洗干净，再用超纯水冲洗三遍后晾干，备用。 6.2.2迁移实验 根据待测样品的预期用途和使用条件，按GB/T23296.1的迁移试验方法及试验条件，用适当的模 拟物（4.7）进行N，N-二（2，6-二异内丙基苯基）碳二亚胺的迁移试验。 6.2.3食品模拟物试液的处理 对于水基食品模拟物试液，根据模拟液实际体积加入适量甲酸（4.6），使其浓度为1%，然后摇匀静 置24h。取适量模拟液经0.2um滤膜过滤后，供液相色谱质谱仪检测。对于橄榄油试液，称取2.0g （精确至0.01g）橄榄油试液于10mL具塞玻璃试管中，加人4mL甲醇-水混合液（4.8）和40μL的甲酸 （4.6），在40℃超声提取30min后，静置分层，用注射器吸取下层水溶液，经0.2μm滤膜过滤后，供液 相色谱-质谱/质谱仪测定。 6.3空白试液的制备 按照6.2的操作处理未与食品接触材料接触的食品模拟物。 7定量测定 7.1 仪器参考条件 由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出液相色谱-质谱/质谱分析的通用参数。设定的 参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，下列给出的参数证明是可行的： a)1 色谱柱：Cs柱，柱长50mm，内径2.1mm，填料粒径1.9um或相当者。 b) 流动相：水（0.1甲酸）十乙（30+70，体积比）。 标准信息服务平台 c) 流速：0.2mL/min。 d)林 柱温：25℃。 e) 进样量：5μL。 离子源：电喷雾离子源（ESI）。 离子模式：正离子模式。 h) 检测方式：多反应监测（MRM）。 i) 定性离子对：380.99-296.71。 定量离子对：380.99254.85。 k） 其他质谱参数参见附录A。 7.2 2绘制标准工作曲线 按照7.1所列测定条件，对标准工作溶液（6.1)进行检测。以食品模拟物标准工作液中N，N-二 （2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物浓度为横坐标，单位以毫克每千克或毫克每升（mg/kg或者 mg/L)表示，以对应的峰面积平均值为纵坐标，绘制标准工作曲线。食品模拟物中N,N-二（2,6-二异 内基苯基）碳二亚胺衍生物的总离子流图参见附录B。 3 SN/T4321—2015 7.3液相色谱质谱分析及阳性结果确证 按照上述液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果样品的质量色谱峰保留时间与 标准品一致，所有选择离子均应出现，则根据定性选择离子对的种类及其相对丰度比，对其进行阳性确 证。定性时，其相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ± 50 谱峰面积，每个溶液平行进样两次，计算峰面积平均值。在检测标准样品与测试样品的整个过程中确保 操作条件一致。采用外标法定量。 7.4试液测定 对空白试液（6.3）和食品模拟物试液（6.2）按照6.2～7.3的步骤等体积进样进行测定。 8结果计算 8.17 水基食品模拟物中N,N'-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺浓度的计算 水基食品模拟物中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的含量可由计算机工作站直接计算，也 可由式(1)计算： (1) A. 式中： 食品模拟物中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的含量，单位为毫克每升（mg/L）； A——试液中N,N-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺脲衍生物的峰面积； A。—空白液中N,N'-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺脲衍生物的峰面积； A。—标准工作溶液中N,N-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺脲衍生物的峰面积； (mg/L)。 橄榄食品模拟物中N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的含量可由计算机工作站直接计算