SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4672—2016 进出口棉花中烟碱类农药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of neonicotinoid pesticides residuesin cotton for import and export-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4672—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局丝类检测中心、中华人民共和国浙江出入 境检验检疫局检验检疫技术中心。 本标准主要起草人：谢文、陆勋元、黄超群、钱艳、潘璐璐、侯建波、谢韵第、陆顺。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4672—2016 进出口棉花中烟碱类农药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口棉花中烟碱类农药残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法 本标准适用于棉花中呋虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫咪和噻虫啉残留量的定量测 定和确证。 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样用乙睛超声提取，提取液浓缩后，采用液相色谱质谱/质谱检测和确证，内标或外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1乙腈：色谱纯。 4.2 甲酸：色谱纯。 4.3 30.15%甲酸溶液：量取1.5mL甲酸，加水定容至1L。 4.4 味虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、虫胺、吡虫啉、啶虫咪、噻虫啉标准品：纯度97.5%，见附录A。 吡虫啉-D4标准品：纯度大于等于97.5%。 4.6 标准储备溶液：分别准确称取适量标准品（4.4），用乙睛配制成1.0mg/mL的标准储备液，于 0℃～4℃冰箱内储存，有效期6个月。 4.7吡虫啉-D4标准储备溶液：准确称取适量标准品（4.5），用乙睛配制成1.0mg/mL的标准储备液， 于0℃～4℃冰箱内避光储存，有效期6个月。 4.8混合标准中间液：取上述标准储备液适量（4.6），用乙睛配制成10μg/mL的混合标准溶液，于 0℃～4℃冰箱内避光储存，有效期3个月。 4.9标准工作溶液：吸取适量的混合标准中间液，用空白样品基质配制成浓度分别为0μg/L、 2.5g/L、5.0g/L、10ug/L、20g/L的标准工作溶液，使用前配制。 4.10微孔滤膜：0.22μm，有机相型。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 1 SN/T 4672—2016 5.2 2分析天平：感量0.0001g和0.01g。 5.3涡旋混合器。 5.4超声波清洗器。 5.5离心机：最大转速10000r/min。 5.6旋转蒸发仪。 6试样制备与保存 取10g以上有代表性的试样,剪碎至2mm×2mm以下，混匀。 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 7测定步骤 7.1样品处理 称取1g棉花样品（精确到0.01g）置于50mL塑料离心管中，加入0.2mL吡虫啉-D4（100ng/mL） 和25mL乙睛，超声20min，以8500r/min，离心5min，取上清液转移至浓缩瓶中，加人10mL乙睛至 样品残渣中，超声10min，重复上述操作，合并乙睛提取液，再加人10mL乙晴至样品残渣中，重复上述 操作，合并乙睛提取液，在45℃以下水浴减压浓缩至近干，加4mL乙睛-0.15%甲酸溶液（3+7，体积 比）的混合溶液溶解，过0.22um滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 7.2测定 7.2.1 液相色谱参考条件 由于测试结果与所使的仪器和条件有关，因此不可能给出仪器分析的普通参数，采用下列参数已被 证明对测试是合适的。 a) 色谱柱：Cs，150mmX4.6mm（内径），5μm，或相当者； b) 流动相：梯度洗脱程序见表1； 表1流动相梯度洗脱程序 时间/min 0.15%甲酸溶液/% 乙腈/% 0 75 25 3 20 80 5 20 80 8 75 25 务平台 15 75 25 c) 流速：0.4mL/min； d) 进样量：20μL。 7.2.2质谱参考条件 质谱参考条件如下： a） 离子源：电喷雾离子源； b) 扫描方式：正离子； 检测方式：多反应监测（MRM)； 2 SN/T4672—2016 d）雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度 达到检测要求，参考条件参见附录B； e) 喷雾电压、去簇电压、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度，参考条件参见附录B 7.3液相色谱-质谱/质谱检测 7.3.1定量测定 根据试样中被测物的含量，选取响应值适宜的标准工作溶液进行分析。标准工作液和待测样液中 烟碱类农药的响应值均应在仪器线性响应范围内，如果含量超过标准曲线范围，应稀释到合适浓度后分 析。在上述色谱条件下烟碱类农药的参考保留时间和标准溶液的多反应监测色谱图参见附录C 中图 C.1。 7.3.2定性测定 在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在土2.5%之内； 每种化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中各组分定性离子的相对丰 度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定 的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。 表2相对离子丰度最大容许误差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 7.4空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 7.5 5结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式（1)外标法计算试样中虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、啶虫咪和噻虫 啉的残留量，内标法计算试样中吡虫啉的残留量，计算结果须扣除空白值： C;XVX1000 X:= ........(1) m×1000 式中： X；——试样中待测物的残留量，单位为微克每千克（μg/kg）； 从标准曲线上得到的待测物质的溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； 服务平台 V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 最终样液所代表的试样质量，单位为克（g） m 注：计算结果保留至整数。 8测定低限和回收率 测定低限 本方法的测定低限均为10μg/kg。 8.2 2回收率 本方法添加水平及回收率数据参见附录D中表D.1。 3 SN/T 4672—2016 附录A （规范性附录） 标准物质信息 标准物质的基本信息见表A.1。 表 A.1 标准物质的基本信息 中文名称 英文名称 CAS编号 分子式 相对分子质量 呋虫胺 C,H.N,O; Dinotefuran 165252-70-0 202.21 烯啶虫胺 Nitenpyram 120738-89-8 Cu Hi, N, O, Cl 270.72 噻虫嗪 Thiamethoxam 153719-23-4 CH.CIN,O,S 291.71 噻虫胺 Clothianidin 210880-92-5 C,H,CIN, O,S 249.7 吡虫琳 Imidacloprid 138261-41-3 C, Hio CIN, Oz 255.7 啶虫咪 Acetamiprid 135410-20-7 Cro HinCIN 222.68 噻虫啉 Thiacloprid 111988-49-9 CrH,CIN,S 252.72 行业标准信息服务平台 4 SN/T 4672—2016 附录B （资料性附录） 仪器参数与监测离子对信息1) 仪器参数与监测离子对信息： a) 电喷雾电压（IS)：4800V； b) 离子源温度（TEM）：540℃； 雾化气压力（GS1)：0.289MPa(42psi)； c) d) 气帘气压力（CUR)：0.172MPa(27psi)； 辅助气压力（GS2）：0.316MPa45psi； ( f) 碰撞气（CAD)：0.034MPa（5)； g) 定性离子对、定量离子对、碰撞能量、去簇电压、碰撞室出口电压、保留时间等参数见表B.1。 表B.1 定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞气能量和碰撞室出口电压 离子对 去簇电压（DP)/ 碰撞气 碰撞室出口 参考保留时间/ 名称 m/z V 能量（CE)/V 电压(CXP)/V min 203.2/129.0 18 6 呋虫胺 4.9 203.2/113.2 16 9 271.1/224.1 22 12 烯啶虫胺 50 5.2 271.1/125.9 39 10 292.1/211.0* 19 11 噻虫嗪 61 7.3 292.1/181.0 9 250.1/169.0* 19 6 噻虫胺 61 7.6 250.1/131.9 25 6 256.0/209.3* 22 18 吡虫啉 62 7.8 256.0/175.2 22 12 223.1/126.1* 31 啶虫 68 10 7.9 223.1/56.0 37 2