SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4673—2016 进出口棉花中乙烯利、噻苯隆、敌草隆农药 残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of ethephon,thidiazuron,diuron pesticides residues in cotton for import and export- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4673—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局丝类检测中心、中华人民共和国浙江出入 境检验检疫局检验检疫技术中心。 本标准主要起草人：潘璐璐、谢文、董锁拽、史颖珠、黄雷芳、何建敏、李杰、谢韵第。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4673—2016 进出口棉花中乙烯利、噻苯隆、敌草隆农药 残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口棉花中乙烯利、噻苯隆和敌草隆农药残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于棉花中乙烯利、噻苯隆和敌草隆残留量的定量测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样用甲醇-水振摇提取，采用液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：色谱纯。 4.2氢氧化钠。 4.35mol/L氢氧化钠溶液：称取100g氢氧化钠，加水溶液并定容至500mL。 4.4甲醇一水（6十4，体积比·pH=8）：量取300mL甲醇和200mL水，混勾，用5mol/L氢氧化钠溶 液调节pH=8。 4.5乙烯利、噻苯隆和敌草隆标准品.纯度大于等于99%，见附录A。 4.6 标准储备溶液：分别准确称取适量标准品（4.5），用甲醇配制成1.0mg/mL的标准储备液，于 一18℃冰箱内储存，有效期3个月。 4.7混合标准中间液：取上述标准储备液适量（4.6），用甲醇配制成10μg/mL的混合标准溶液，于 一18℃冰箱内储存，有效期1个月。 4.8标准工作溶液：吸取适量的混合标准中间液（4.7），用甲醇一水（6十4，体积比；用5mol/L氢氧化 钠溶液调节pH=8）配制成适当浓度的标准工作溶液（乙烯利的浓度分别为0ug/L、5.0uμg/L 10μg/L、20μg/L、25μg/L，噻苯隆的浓度分别为0μg/L、0.2μg/L、0.4μg/L、0.8μg/L、1.0μg/L,敌 草隆的浓度分别为0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L、8.0μg/L、10μg/L)，使用前配制。 4.9微孔滤膜：0.22μm，有机相型。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 1 SN/T4673—2016 5.2 2分析天平：感量0.0001g和0.01g。 5.3 涡旋混合器。 5.4振荡器：频率250r/min。 试样制备与保存 取10g以上有代表性的试样，剪碎至2mm×2mm以下，混匀。 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 7测定步骤 7.1样品处理 称取样品1g（精确至0.01g），置于50mL具塞离心管中，加人20mL甲醇一水（4.4）.300r/min 振摇，振摇20min，取上清液过0.22μm滤膜（4.9），4h内完成检测，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 7.2 2测定 7.2.1 液相色谱参考条件 由于测试结果与所使的仪器和条件有关，因此不可能给出仪器分析的普通参数，采用下列参数已被 证明对测试是合适的。 a) 色谱柱：Cs，150mm×4.6mm（内径），5μm，或相当者； b) 流动相：甲醇一水（6十4，体积比）； 流速：0.4mL/min; 进样量：20μL。 7.2.2 质谱参考条件 质谱参考条件如下： a) 离子源：电喷雾离子源： b) 扫描方式：负离子； c) 检测方式：多反应监测（MRM）； (P 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气：使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏 度达到检测要求，参考条件参见附录B； e) 喷雾电压、去簇电压、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度，参考条件见附录B。 7.3 液相色谱-质谱/质谱检测 7.3.1定量测定 根据试样中被测物的含量，选取响应值适宜的标准工作溶液进行分析。标准工作液和待测样液中 被测物的响应值均应在仪器线性响应范围内，如果含量超过标准曲线范围，应稀释到合适浓度后分析。 在上述色谱条件下乙烯利、噻苯隆和敌草隆农药的参考保留时间和标准溶液的多反应监测色谱图参见 附录 C中图 C.1。 7.3.2定性测定 2 SN/T 4673—2016 化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中各组分定性离子的相对丰度与 浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1规定的范 围，则可判断样品中存在对应的被测物。 表1相对离子丰度最大容许误差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 7.4 空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 7.5 结果计算和表示 用色谱数据处理机或按式（1)计算试样中被测物的含量，计算结果须扣除空白值： (1) m X 1 000 式中： X: 试样中待测物的残留量，单位为微克每千克（μug/kg）； 从标准曲线上得到的待测物质的溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； C; V —样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）。 m 计算结果保留至小数点后一位。 8 测定低限和回收率 8.1 测定低限 本方法的测定低限：乙烯利为100ug/kg、敌草隆为40ug/kg、噻苯隆为4g/kg。 8.2回收率 准信息服务平台 本方法添加水平及回收率数据参见附录D中表D.1。 3 SN/T 4673—2016 附录A （规范性附录） 标准物质信息 标准物质的基本信息见表A.1。 表A.1 标准物质的基本信息 中文名称 英文名称 CAS编号 分子式 相对分子质量 乙烯利 Ethephon C, H, CIO, P 144.5 16672-87-0 噻苯隆 Thidiazuron 51707-55-2 C, H.N,Os 220.2 敌草隆 Diuron 330-54-1 C, Hio Cl, N, O 233.1 行业标准信息服务平台 4 SN/T4673—2016 附录B (资料性附录) 仪器参数与监测离子对信息1) 仪器参数与监测离子对信息： a) 电喷雾电压（IS)：—4500V； b) 离子源温度（TEM）：525℃； 雾化气压力（GS1)：0.289MPa(42psi)； c) d) 气帘气压力（CUR）：0.172MPa(27psi)； 辅助气压力（GS2）：0.31MPa（45psi)； ( f) 碰撞气（CAD)：0.034MPa(5psi)； 定性离子对、定量离子对、碰撞能量、去簇电压、碰撞室出口电压、保留时间等参数见表B.1。 g) 表B.1定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞气能量和碰撞室出口电压 离子对 去簇电压(DP) 碰撞气能量 碰撞室出口电压 参考保留时间 名称 m/z V (CE)/V (CXP)/V min 142.7/107.0* 17 乙烯利 40 10 6.4 142.7/79.3 -25 219.2/100.0* -17 噻苯隆 55 -7 9.1 219.2/70.9 -46 231.1/186.0* 25 敌草隆 90 -10 17.0 231.1/149.8 -34 注：带*为定量离子。 行业标准信息服务平台 1）非商业性声明：附录B所列参考质谱条件是在API4000Q液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是 为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。 5