SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4740—2016 进出口棉纺织原料 脱叶剂类农药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of defoliant residues in cotton textile materials for import and export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4740—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：孙武勇、郭会清、乔晴、禹建鹰、张守杰、张淑霞、徐铭蔓。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4740—2016 进出口棉纺织原料 脱叶剂类农药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口棉纺织原料中噻苯隆、敌草隆、环丙酸酰胺农药残留量的液相色谱-质谱/质谱 测定方法。 本标准适用于进出口棉纺织原料中噻苯隆、敌草隆、环内酸酰胺农药残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样采用乙睛进行提取，旋转蒸发仪蒸干后用含10%乙睛的水溶液溶解，液相色谱-质谱/质谱法 测定和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除特别规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水， 4.1乙睛：色谱纯。 4.2 噻苯隆、敌草隆、环丙酸酰胺标准品：纯度大于98.0%。 4.3标准储备溶液：准确称取适量标准品用乙睛（4.1）配制成浓度为100μg/mL的标准储备液，在 4℃下保存，有效期6个月。 4.4混合标准中间溶液：取上述标准储备液适量（4.3）用乙睛配制成浓度为1μg/mL的混合标准中间 溶液，4℃下保存，有效期3个月。 4.5标准工作溶液：吸取适量的混合标准中间液（4.4），用乙睛-水（7：3体积比）溶液配制成不同浓度 系列的标准工作溶液，现用现配 4.60.22μm滤膜，有机相型。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱联用仪，配有电喷雾离子源（ESI)。 5.2离心机：最高转速不低于4000r/min。 5.3 涡旋振荡器。 1 SN/T 4740—2016 5.4旋转蒸发仪。 5.5天平：感量为0.1mg。 5.6超声波萃取仪。 5.7 塑料离心管，50mL。 5.8鸡心瓶，100mL。 6 试样制备与保存 取10g以上有代表性的试样，剪碎至5mmX5mm以下，在制样的操作过程中，应防止样品污染 或发生残留物含量的变化。 测定步骤 7.1 样品前处理 称取1g试样（精确到0.01g），置于50mL塑料离心管（5.7）中，加30mL乙，涡旋震荡提取 2min，超声提取10min。收集滤液至100mL鸡心瓶中，剩余物质再加人30mL乙睛重复提取一次，合 并滤液于鸡心瓶（5.8）中，将滤液于旋转蒸发仪上50℃水浴蒸干，用2mL10%乙睛的水溶液溶解残 渣，过0.22um滤膜（4.6)后，供液相色谱-质谱/质谱测定。 7.2测定 7.2.1 液相色谱条件 液相色谱条件如下： a) 色谱柱：C1g柱，3μm，150mmX4.5mm（内径）或相当者。 b) 液相及洗脱条件见表1。 表1流动相及梯度洗脱条件 时间 流动相A（乙睛） 流动相B(水） min % % 0.0 10 90 1.0 10 06 10.0 90 10 务平台 12.0 10 06 柱温：室温。 c) d) 流速：0.25mL/min。 e) 进样量：10μL。 7.2.2 质谱条件 质谱条件如下： a）离子源：电喷雾离子源。 b) 扫描方式：负离子扫描。 2 SN/T 4740—2016 检测方式：多反应监测模式（MRM）。 c) 定性离子对、定量离子对见表2。 表2脱叶剂的定性离子对和定量离子对 定量离子对 定性离子对 化合物 m/ m/2 噻苯隆 219/100 219/71 敌草隆 231/186 231/150 环丙酸酰胺 272/160 272/228 e) 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气及其他合适气体：使用前应调节各气体流量 以使质谱灵敏度达到检测要求，喷雾电压、解簇电压、碰撞能等电压值应优化至最佳灵敏度，参 考质谱参数参见附录A 7.2.3液相色谱-质谱/质谱测定 7.2.3.1 定性测定 按照液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液（4.5），如果检测的质量色谱峰保留时间与 标准品保留时间相差不超过士5%，定性离子对的相对丰度（是用相对于最强离子丰度的强度百分比表 示）与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表3规定的范围，则可判断样 品中存在对应的被测物。 表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 >50% >20%~50% >10%~20% <10% 允许的最大偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.2.3.2 定量测定 根据试样中被测物的含量情况，选取响应值相近的标准工作液（4.5）一起进行色谱分析。标准工作 液和待测液中噻苯隆、敌草隆、环丙酸酰胺的响应值应在仪器线性响应范围内。噻苯隆、敌草隆、环丙酸 怡息服务平台 酰胺的标准溶液的多反应监测（MRM)色谱图参见附录B。 7.2.3.4空白试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。 8 结果计算 用液相色谱-质谱/质谱数据处理软件或者按式（1)计算样品中待测物的含量。 V 1000 X=cX X1000 .(1) m 式中： X ——试样中被测组分含量，单位为微克每千克（ug/kg）； 从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； 3 SN/T 4740—2016 试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）； 试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。 m 计算结果应扣除空白值。 检测限和回收率 9 9.1 检测限 本标准的方法检测限为噻苯隆：10μg/kg，敌草隆：10uμg/kg，环丙酸酰胺：10ug/kg。 9.2 回收率 三种脱叶剂的回收率范围分别为噻苯隆62.0%~100.7%，敌草隆69.0%~94.4%；环丙酸酰胺 82.0%~105.7%；平均回收率参见附录C。 行业标准信息服务平台 SN/T 4740—2016 附录A （资料性附录） 参考质谱参数 参考质谱参数见表A.1。 表 A.1 参考质谱参数1 质谱参数 参数值 雾化气 206 842 Pa(30 psi) 气帘气 172368 Pa(25psi) 辅助加热气 206 842 Pa(30 psi) 碰撞气 8 辅助加热气温度 500℃ 喷雾电压 -4500V 噻苯隆-52V 去簇电压 敌草隆-78V 环丙酸酰胺-50V 噻苯隆-14eV 碰撞能 敌草隆-23eV 环丙酸酰胺—27eV 行业标准信息服务平台 非商业性声明：表A.1所列参数是用API4000质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并 1) 不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。 5