ICS 67.050 SN CCS C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5440—2022 出口食品中双炔酰菌胺、噻唑菌胺、唑磺 菌胺等多种酰胺类杀菌剂残留量的测定 液相色谱质谱/质谱法 Determination of multiple amide fungicides including mandipropamid, ethaboxam,amisulbrom etc in food for exportLC-MS/MS method 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5440—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》要 求进行编制。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国杭州海关技术中心。 本文件主要起草人：祝子铜、谢文、雷美康、姜芝英、候建波、叶有标、章应俊。 SN/T5440—2022 出口食品中双炔酰菌胺、噻唑菌胺、吲唑磺 菌胺等多种酰胺类杀菌剂残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口食品中双炔酰菌胺、噻唑菌胺、吲唑磺菌胺、硅噻菌胺、吡噻菌胺残留量的液相色 谱-质谱/质谱测定方法。 本文件适用于葡萄、白菜、芹菜、黄瓜、番茄、草莓、花生、猪肉中双炔酰菌胺、噻唑菌胺、吲唑磺菌胺、 硅噻菌胺、吡噻菌胺残留量的定量测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 4方法提要 试样中残留的双炔酰菌胺、噻唑菌胺、吲唑磺菌胺、硅噻菌胺、吡噻菌胺经1%乙酸乙腈溶液均质提 取后，采用基质分散固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。 5试剂和材料 除特殊说明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水 5.1乙腈：色谱纯。 5.2甲醇：色谱纯。 5.3甲酸：色谱纯。 5.41%乙酸乙睛溶液：取1.0mL乙酸，用乙腈稀释并定容至100mL。 5.50.15%甲酸溶液：取1.5mL甲酸，用水稀释并定容至1000mL。 5.6标准物质：双炔酰菌胺、噻唑菌胺、吲唑磺菌胺、硅噻菌胺、吡噻菌胺，纯度均大于98.0%，5种酰胺 类化合物的中文名称、英文名称、CAS号、分子式和分子量参见附录A。 5.7标准储备溶液：分别准确称取适量的标准物质（5.6），用乙睛分别配制成浓度为1000μg/mL标 I SN/T5440—2022 准储备液，于一18℃避光保存。 5.8混合标准中间液：分别准确移取适量的标准储备溶液（5.7），用乙睛稀释配制成浓度为10μg/mL 的混合标准中间液，于一18℃避光保存。 5.9基质标准工作液：准确移取混合标准中间液适量（5.8），用空白样品基质溶液配制成浓度为 1.0ng/mL.2.0ng/mL、5.0ng/mL.10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL.60.0ng/mL的基质标 准工作液，现用现配。 5.10基质分散固相萃取剂：4g无水硫酸镁，1g氯化钠，1g柠檬酸钠和0.5g柠檬酸氢二钠。 5.11基质分散固相净化剂：150mg无水硫酸镁，25mgN-丙基乙二胺，75mg石墨化碳黑。 5.12 微孔滤膜：0.22um，有机滤膜。 6仪器和设备 6.1液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 6.2分析天平：感量为0.0001g和0.01g。 6.3离心机：转速大于等于8000r/min。 6.4均质机。 6.5涡旋混合器。 6.6离心管：50mL聚四氟乙烯离心管。 7样品制备与保存 版文本为准 取代表性样品部分约500g，将其可食部分先切碎，经多功能食品搅拌机充分捣碎均匀，试样均分 为两份，装人洁净容器，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 在制样过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 8分析步骤 8.1提取 8.1.1蔬菜、水果 称取10g试样（精确到0.01g）于50mL离心管中，加人20mL1%乙酸乙睛溶液，用均质机以 9000r/min均质1min，加人基质分散固相萃取剂（5.10），涡旋1min，以8000r/min离心5min，上清 液待净化。 8.1.2肉制品、坚果类 称取5g试样（精确到0.01g）于50mL离心管中，加人15mL1%乙酸乙睛溶液，用均质机以 9000r/min均质1min，以8000r/min离心5min，上清液转移至25mL比色管中，再加人10mL1% 乙酸乙腈溶液至残渣中，涡旋1min，以8000r/min离心5min，上清液转移至25mL比色管中，用1% 乙酸乙腈定容至25mL，待净化。 8.2净化 取2mL待净化液至含有基质分散固相净化剂（5.11)的离心管中，涡旋1min，以8000r/min离心 5min。取0.5mL上清液，加入0.5mL水，涡旋1min，过0.22μm滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪 2 SN/T 5440—2022 测定。 8.3测定 8. 3. 1 液相色谱条件如下： 色谱柱：AccucoreXLCi8柱，4.6mm×15omm（内径），粒度4.0um，或相当者； a). b) 流动相：A，甲醇；B，0.15%甲酸水溶液，梯度洗脱程序见表1； 表1梯度洗脱条件 0.15%甲酸 流速/ 时间/min 甲醇/% 水溶液/% (mL/min) 0 55.0 45.0 0. 4 1. 0 55.0 45.0 0. 4 3.0 20.0 80.0 0. 4 8. 0 5. 0 95.0 0.4 12.0 5.0 95.07 0. 4 13. 0 45.0 55.0 0. 4 17.0 45.0 55.0 0. 4 c) 流速：0.4mL/min;； d) 柱温：40℃； e) 进样量：10μL。 8.3.2 质谱条件如下： 式出版文 a) 离子源：电喷雾离子源， b) 扫描方式：正离子扫描 c) 检测方式：多反应监测模式； d) 其他参考质谱条件参见附录B。 8.3.3 定性测定 偏差在土2.5%之内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度 偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在相应的待测物。 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.3.4定量测定 根据样液中被测物的含量情况，选取响应值相近的基质标准工作液进行色谱分析。基质标准工作 液和样液中待测物的响应值均应在仪器线性响应范围内。 3