ICS 67.050 SN CCS X 04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5444—2022 出口植物源食品中咪鲜胺及其代谢产物 的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of prochloraz and its metabolites in plant-origin foodstuffs for exportLC-MS/MS 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5444—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口， 本文件起草单位：中华人民共和国重庆海关技术中心、中国检验检疫科学研究院。 本文件主要起草人：莫敏、唐柏彬、存显、曹淑瑞、郑小玲、李贤良、张雷、王国民、张峰。 SN/T5444—2022 出口植物源食品中咪鲜胺及其代谢产物 的测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口植物源食品中咪鲜胺及其代谢产物的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本文件适用于蔬菜、水果、食用菌、谷物、油料、坚果、香辛料、茶叶、石斛中咪鲜胺及其代谢物N-丙 （BTS44596）、2，4，6-三氯苯酚（BTS45186）的定量测定和确证，其他植物源性食品也可参照使用。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 4方法原理 试样经酸化乙溶液提取提取液经QuEChERS/固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪检测， 标准信： 外标法定量。 试剂和材料 5 服务平台 5.1乙腈：色谱纯。 5.2乙酸：优级纯。 5.3甲苯：色谱纯。 5.4甲酸。 5.5 无水硫酸镁。 5.6 氯化钠。 5.7 乙酸铵。 5.8 乙酸钠。 5.9 1%酸化乙溶液（V/V）：990mL乙睛（5.1)中加人10mL乙酸（5.2）溶液，混匀。 5.10 乙腈-甲苯溶液（3+1，V/V）：100mL甲苯（5.3）加入300mL乙腈（5.1)中，混勾。 1 SN/T 5444—2022 5.112mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸）：称取0.154g乙酸铵（5.7），用950mL水溶解，加入1.0mL 甲酸（5.4），用水稀释至1000mL。 5.12乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA)：40μm~60μm。 5.13石墨化碳黑（GCB)：40μm~60μm。 合物详细信息参见表A.1。 5.15混合标准储备液（1.0mg/mL）：准确称取适量的咪鲜胺及其代谢物标准物质（5.14），用乙 (5.1)溶解并配制成浓度为1.0mg/mL的混合标准储备液。一18℃以下避光保存6个月。 5.16混合标准中间液（10.0mg/L）：移取上述1.0mg/mL混合标准储备液（5.15)0.1mL至10mL 容量瓶中，用乙睛（5.1)稀释并定容至刻度，配制成10.0mg/L混合标准中间液。0℃～4℃避光保存 1个月。 5. 17 混合标准工作液：临用前分别取适量10.0mg/L混合标准中间液（5.16），用乙睛（5.1）稀释至 2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL混合标准工作液，临用现配。 5.18微孔滤膜：有机系，0.22um。 5.19 5.20均质子。 6仪器和设备 分析天平：感量分别为0.01g和0.1mg。 6. 2 6.3均质器。 6.5超声波清洗器。 6. 6 氮吹仪。 6.7 涡旋混合器。 6.8强力振荡器。 6.9组织搅拌机。 6. 10 高速粉粹机。 6. 11 水浴旋转蒸发仪。 6. 12 具塞离心管：聚丙烯，15mL和50m 7试样的制备与保存 7.1蔬菜、水果和食用菌 取有代表性样品约500g，样品取样部位按照GB2763的规定执行，用组织搅拌机充分绞碎，装人 洁净容器，密闭并标明标记，于-18℃保存。 7.2谷物、油料、坚果、香辛料、茶叶和石斛 取有代表性样品约500g，样品取样部位按照GB2763的规定执行，用高速粉碎机充分粉碎，装人 洁净容器，密闭并标明标记，于阴凉干燥处保存。 2 SN/T5444—2022 8测定步骤 8.1提取 8.1.1蔬菜、水果和食用菌 准确称取10g（精确至0.01g）试样，置于50mL具塞离心管中，加人20mL酸化乙睛（5.9）、6.0g 氯化钠（5.6）及1颗均质子（5.20），盖上离心管盖，置于强力振荡器（6.8）剧烈振荡提取10min后 4000r·min-l离心5min，待净化， 注：对于干制样品，称取1g试样（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加9mL水涡旋混匀，静置30min后按上 述方式处理。 8.1.2谷物、油料、坚果、香辛料和石斛 准确称取5g（精确至0.01g）试样，置于50mL具塞离心管中，加入10mL水涡旋混匀，静置 20min，加人20mL酸化乙（5.9）、6.0g氯化钠（5.6）及1颗均质子（5.20），盖上离心管盖，置于强力 8.1.3茶叶 准确称取2g（精确至0.01g）试样，置于50mL具塞离心管中，加人10mL水涡旋混匀，静置 20min，加人20mL酸化乙腈（5.9）、6.0g硫酸镁（5.5）、1.5g乙酸钠（5.8）及1颗均质子（5.20），盖上 离心管盖，置于强力振荡器（6.8）剧烈振荡提取10min后4000r·min-1离心5min。吸取10mL上 8.2净化 8.2. 1 QuEChERS前处理 吸取待净化液（8.1.18.1.2)10mL加到内含900mg硫酸镁（5.5）、100mgPSA（5.12)）和10mg GCB(5.13）的15ml塑料离心管中，涡旋混匀5min后4000r·min-1离心5min，准确吸取5mL上 清液于10mL试管中，氮吹至干，加人2mL乙睛（5.1)溶解残渣，过微孔滤膜（5.18），供高效液相色谱 质谱/质谱仪测定。 8.2.2固相萃取前处理 用5mL乙睛-甲苯溶液（5.10）预洗固相萃取柱（5.19），弃去流出液。用3mL乙睛-甲苯溶液 (5.10)洗涤待净化试样（8.1.3)至固相萃取柱中，再用3mL乙睛甲苯溶液（5.10）重复洗涤操作1次； 1mL乙睛（5.1)溶解残渣，过微孔滤膜（5.18），供高效液相色谱-质谱/质谱仪测定。 8.3基质混合标准溶液的制备 空白基质样品按照8.1、8.2部分进行前处理至氮吹至干或旋转蒸发至干，加入相应质量浓度的混 合标准工作溶液（5.17）复溶，过微孔滤膜（5.18），基质混合标准工作溶液应现用现配。 注：空白基质溶液取样量应与相应的试样处理取样量一致。 3