ICS 67.050 SN CCS C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 54462022 为准 出口植物源性食品中喹琳铜残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of residue of oxine copper in plant-origin foodstuffs for export-LC-MS/MS method 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5446—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国广州海关、中华人民共和国黄埔海关 本文件主要起草人：徐娟、谢守新、邵琳智、李敏青、孙灵慧、庄嘉。 SN/T 5446—2022 出口植物源性食品中喹琳铜残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口植物源性食品中喹琳铜残留量的液相色谱-质谱/质谱测定和确证方法。 本文件适用于番茄、梨、苹果、黄瓜、柿子和山核桃中喹啉铜残留量的测定和确证。 2规范性文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语与定义 本文件没有需要界定的术语和定义 4方法提要 式出版文本为 采用1%乙酸超声提取试样中的喹啉铜，以N-丙基乙二胺固相吸附剂（PSA）和C18粉末净化，稀 释、过滤后供液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。 5试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 信息服务平 5.1乙腈：色谱纯。 5.2甲醇：色谱纯。 5.3乙酸：色谱纯。 5.4甲酸：色谱纯。 5.50.25%甲酸溶液：量取2.5mL甲酸（5.4），用水定容至1L 5.61%乙酸溶液：量取10mL乙酸（5.3），用水定容至1L。 5.7喹啉铜标准物质（OxineCopper)：C18H12CuN,O2，CAS号10380-28-6，纯度≥99.0%。 5.8喹啉铜标准储备液：准确称取喹啉铜标准品10mg（精确到0.1mg）于100mL容量瓶中，用甲醇 （5.2）溶解并定容至刻度，配制成浓度为0.1mg/mL的标准储备液，于一18℃以下避光保存，有效期6 个月。 5.9喹啉铜标准溶液：准确吸取喹啉铜标准储备液1mL于100mL容量瓶中，用甲醇（5.2）定容至刻 度，此标准溶液1mL相当于1ug喹啉铜标准品，于0℃～4℃冰箱内储存，有效期3周。 1 SN/T5446—2022 5.10喹啉铜标准曲线：吸取适量的上述标准溶液（5.9），用空白样品基质配制成喹啉铜浓度分别为 0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L的系列标准曲线，现用现配。 5.11微孔滤膜：0.22μm，有机型。 6仪器和设备 液相色谱-质谱/质谱仪，配电喷雾离子源（ESI）。 6.2电子天平：感量为0.0001g和0.01g。 6.3组织捣碎机。 6.4离心机：4000r/min,12000r/min。 6.5超声波清洗器。 6.6涡旋混合器。 1 试样制备与保存 7.1蔬菜和水果 蔬菜和水果的取样部位按照GB2763的规定执行，取样品500g，用组织捣碎机均质，充分混勾， 均分为2份，密封并标明标记，于一18℃条件下保存。 7.2坚果 坚果样品去壳取全果500g，用组织捣碎机均质，充分混匀，均分为2份，密封并标明标记，于0℃ 一4℃条件下保存。 8测定步骤 8.1提取 正式出片 称取约5g试样（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加人10mL1%乙酸（5.6），超声15min， 4000r/min离心5min，收集提取液于25mL塑料容量瓶中；再加入10mL上述提取液，再次超声提取 15min后，以4000r/min离心5min.合并上清液并以1%乙酸定容至25mL。 8.2净化 取1mL提取液加人装有PSA粉末50mg和C18粉未50mg的高速离心管里，涡旋1min后以 服务平台 12000r/min离心5min，取0.5mL净化后的提取液与05mL0.25%甲酸（5.5）混合均匀，经 0.22um微孔膜过滤后装瓶，供LC-MS/MS测定。 8.3测定 8.3.1液相色谱条件 8.3.1.1色谱柱：ODS-4色谱柱，150mm×2.1mm（内径），粒径3μm或相当者。 8.3.1.2柱温：40℃。 8.3.1.3流动相：乙腈（5.1)-0.25%甲酸溶液（5.5），梯度见表1。 2 SN/T5446—2022 表1流动相梯度洗脱程序 时间/min 流速/(mL/min) 0.25%甲酸/% 乙腈/% 0.00 0.2 95 5 5.00 0. 2 70 30 5. 01 0.2 95 5 10. 00 0. 2 95 5 8.3.1.4 流速：0.2mL/min。 8.3.1.5进样量：5L。 8.3.2质谱条件 8.3.2.1离子源：电喷雾离子源。 8. 3.2. 2 扫描方式：正离子扫描。 8. 3.2. 3 检测方式：多反应监测模式（MRM)。 8.3.2.4 监测离子对、定量离子对见表2。 为准 表2喹啉铜的监测离子对和定量离子对 被测物 监测离子对/(m/2) 定量离子对/(m/z) 146.07/75.05 喹啉铜 146. 07/91. 00 146.07/118.05 146. 07/118. 05 8.3.2.5雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气及其他适合气体，使用前应调节各气体流量以 使质谱灵敏度达到检测要求，喷雾电压、去簇电压、碰撞气能量等参数值应优化至最佳灵敏度，其他参 考质谱参数参见附录A。 8.3.3液相色谱-质谱/质谱检测和确证 8. 3. 3. 1 定性测定 按照液相色谱-质谱/质谱条件测定试样和标准工作液，试样中目标化合物的保留时间与标准工作 液中对应化合物的保留时间偏差在土2.5%之内：定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作液的 相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表3的规定，且每个离子的信噪比均≥3，则可判断试样中存在相应 的被测物。 表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 20~50（含） 10～20(含） ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.3.3.2定量测定 将标准工作液和试样溶液依次注人液相色谱-质谱/质谱仪中，测得定量离子峰面积。标准工作液 和待测液中，喹啉铜的响应值均应在仪器检测的定量线性范围内。在上述仪器条件下，喹啉铜的提取离 3