ICS 67.050 SN CCS X 04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5448—2022 出口植物源性食品中三氯用基吡啶及其 代谢物的测定 气相色谱-质谱/质谱法 Determination of nitrapyrin pesticide and metabolites residues in foods of plant origin for export Gas chromatography-tandem mass spectrometry method 2022-10-01实施 2022-03-14发布 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5448—2022 前 言 规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国广州海关。 本文件主要起草人：韩世鹤、陈捷、杨洋、孙灵慧、李立、庄嘉、何曼莉。 SN/T 5448—2022 出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其 代谢物的测定 气相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其代谢物6-氯吡啶-2-羧酸的气相色谱-质谱 质谱测定方法。 本文件适用于小麦、高梁、大米、玉米、生菜、柑橘、甜玉米、开心果仁和爆谷中三氯甲基吡啶及其代 谢物6-氯吡啶-2-羧酸的定性定量测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 4原理 试样中的残留物采用酸性乙睛提取，QuEChERS方法净化后经甲酯化衍生，气相色谱-质谱/质谱 仪测定，基质匹配内标法定量。 标准 5 试剂和材料 息服务平台 5.1乙腈：色谱纯。 5. 2 乙酸乙酯：色谱纯。 5.3 甲醇：色谱纯。 5.4海砂颗粒度0.5mm~1mm。 5.5 氯化钠。 5. 6 无水硫酸镁。 5.7 5.8浓硫酸。 5.9甲酸。 5.10 饱和氯化钠溶液：称取36g氯化钠，溶于100mL水中。 5.11 2%硫酸钠溶液：称取2g硫酸钠，溶于100mL水中。 1 SN/T 5448—2022 5.12标准物质： 5.12.1三氯甲基吡啶（Nitrapyrin），CAS号1929-82-4，分子式：CH.Cl,N，纯度大于或等于99%， 6-氯吡啶-2-羧酸（6-Chloro-2-pyridinecarboxylicAcid），CAS号4684-94-0，分子式：C,H,CINO2，纯度大 于或等于99%。 5.12.2内标物：2-吡啶甲酸甲酯（Methylpicolinate），CAS号2459-07-6，分子式：C,H,NO2，纯度大于 或等于98%。 5.13空白基质溶液：用不含三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸残留的样品，除不加内标外，按照8.1、 8.2和8.3中规定进行操作制备空白基质溶液。 5.14标准溶液 5.14.1标准储备液（1000mg/L）：分别准确称取10mg（精确到0.1mg）三氯甲基吡啶和6-氯吡啶 2-羧酸标准物质，用甲醇溶解并定容至10mL，避光一18℃冰箱内保存。 5.14.2中间标准储备液（40mg/L）：分别准确吸取适量标准储备液，用甲醇稀释配制成40mg/L的中 间标准储备液，避光一18℃冰箱内保存。 5.14.3衍生混合标准使用液（20mg/L）：分别准确移取0.50mL三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸 （5.14.2于具塞比色管中，除不加内标外，按照8.3步骤衍生，用空白基质液（5.13)定容至1.0mL，此 衍生混合标准浓度为20mg/L，现用现配。 5.15内标溶液（10mg/L）：准确称取10mg（精确至0.1mg）2-吡啶甲酸甲酯，用乙酸乙酯溶解并至 10mL，混勾为内标储备液。内标储备溶液用乙酸乙酯稀释至10mg/L为内标溶液。 5.16材料 5.16.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：40μm~60m。 5. 16.2 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：40μm~6 5.16.3石墨化炭黑（GCB)：40μm~120μm。 5.16.41 6仪器和设备 6.1气相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电子轰击源（EI)。 6.2分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g。 6.3离心机：转速不低于45001/min 6.4组织捣碎机。 准信息服务平台 6.6旋涡混匀器。 6.7加热水浴摇床。 6.8氮吹仪：可控温。 7试样制备与保存 7.1试样的制备 7.1.1生菜、柑橘、甜玉米（鲜食玉米）、爆谷（爆米花）、开心果仁 取代表性样品约500g，放入组织捣碎机中捣碎，装人聚乙烯瓶或袋中，密封并标明标记。 7.1.2小麦、高梁、大米、玉米（干） 取代表性样品约500g，粉碎后使其全部可通过425um的标准网筛，放入聚乙烯瓶或袋中，密封并 2 SN/T5448—2022 标明标记。 7.2试样的保存 将试样按照测试和备用分别存放。于一18℃条件下保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样 品受到污染或发生残留物含量的变化。 8测定步骤 8.1提取 8.1.1生菜、柑橘、甜玉米（鲜食玉米） 称取样品10g（精确至0.01g）至50mL离心管中，加人10mL乙睛、0.1mL甲酸，涡旋1min，于 振荡器（震荡频次300r/min）震摇提取15min，加入3g氯化钠，再震摇5min后，4500r/min离心 5min，取上清液4mL，待净化。 8.1.2小麦、高梁、大米、玉米（干）、爆谷（爆米花）、开心果仁 称取样品5g（精确至0.01g）至50mL离心管中，加人15g海砂5mL水涡旋混匀，静置30min， 加人10mL乙腈、0.1mL甲酸，涡旋1min，于振荡器震摇提取15min，加人3g氯化钠后再震摇5min 后，4500r/min离心5min，取上清液4mL，待净化。 8.2净化 将4mL待净化样液加人到内含50mgPSA，100mgC18,100mgGCB,MgSO,200mg的10mL 塑料离心管中，涡旋混匀1min，4500r/min离心5min，准确吸取2mL净化液于10mL试管中，于 40℃水浴中氮气吹干后迅速加人1mL甲醇震荡溶解残渣，待衍生。 8.3衍生 将1mL待衍生液（8.2）置于冰水浴中，缓慢加人200uL浓硫酸，55℃下衍生30min，衍生溶液在 50℃水浴吹氮至近干，加5ml饱和氯化钠溶液（5.10）振荡溶解，转移至50mL离心管中；衍生试管再 用5ml乙酸乙酯进行洗涤后倒人同一离心管中振荡提取3min，于4500r/min离心5min，取上清液 置于干净的50mL另一离心管中，用乙酸乙酯再重复提取两次，每次加乙酸乙酯3mL，合并提取液后 用2mL2%硫酸钠溶液洗涤，静置分层。取乙酸乙酯层过装有无水硫酸钠的漏斗，收集全部滤液。在 40士2℃下氮吹浓缩至约1mL，转移至2mL刻度试管，加人40μL内标溶液（5.15）（相当于2-吡啶甲 酸甲酯400ng），用乙酸乙酯溶解并定容至2mL，过0.2μm微孔滤膜，待GC-MS/MS分析。 8.4测定 8.4.1仪器参考条件 8.4.1.1色谱柱：35%-苯基-聚硅氧烷石英毛细管柱；30m×0.25mm×0.25μm，或相当者 8.4.1.2升温程序：70℃保持1.5min，然后以20℃/min程序升温至180℃，再以5℃/min升温至 210℃，再以25℃/min升温至280℃，保持5min。 8.4.1.3载气：氮气，纯度≥99.999%，流速1.2mL/min。 8.4.1.4进样口温度：250℃。 8.4.1.5进样量：1μL。 3