ICS 67.040 SN CCS C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5449—2022 出口植物源性食品中消螨多残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of meptyldinocap residues in Plant-origin foodstuffs for export- LC-MS/MS 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5449—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国深圳海关、中国检验检疫科学研究院、深圳市检验检疫科学研 究院。 本文件主要起草人：吴凤琪、李荷丽、韩世鹤、沈金灿、洪小柳、侯乐锡、付立赢、李立、 SN/T 5449—2022 出口植物源性食品中消螨多残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口植物源食品中消螨多的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本文件适用于苹果、黄瓜、生菜、橙、葡萄、西葫芦、草莓、大米中消螨多残留量的测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3术语与定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4方法提要 式出版文本为 试样中的消螨多用乙酸乙酯提取后，进行碱水解转化为2，4-二硝基-6-（1-甲基庚基）苯酚（2，4- DNOP，采用LC-MS/MS进行定性定量分析。外标法定量。 5试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.1乙酸乙酯：色谱纯。 5.2甲醇：色谱纯。 5.3甲醇水溶液（6十4，体积比）：分别量取60mL甲醇和40mL纯净水定容至100mL。 5.41%甲酸溶液：量取1mL甲酸，用甲醇水溶液（5.3）定容至100mL。 5.51%乙醇胺溶液：量取1mL乙醇胺，用甲醇水溶液（5.3）定容至100mL。 硝基-6-（1-甲基庚基）苯酚（Meptyldinocap-Phenol)：分子式：Ci4H2oN,O，，CAS号3687-22-7；纯度大于 或等于99.0%。 5.7标准储备溶液：准确称取10mg消螨多（2,4-DNOPC)（精确到0.1mg）于10mL容量瓶中，用甲 醇溶解并定容至刻度，配置成浓度为1mg/mL的标准储备液，于一18℃备用，有效期3个月。 5.8消螨多标准工作溶液：吸取适量的上述标准溶液，加至空白样品基质中，配置0.010mg/L、0.020 mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L消螨多标准工作曲线，按8.1和8.2同步进行前处理。 5.9微孔滤膜：0.22μm，有机系。 1 SN/T 5449—2022 6仪器与设备 6.1液相色谱串联质谱仪：配有ESI源； 6.2分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g； 6.3均质器； 6.4离心机：转速不低于4500r/min； 6.5涡旋混合器； 6.6氮吹仪。 7试样制备与保存 7.1水果蔬菜等含水量高的样品 取有代表性样品500g，用组织捣碎机将样品加工成浆状，混勾，均分2份后装人洁净的盛样容器 内，防止样品受到污染或发生残留物含量的变化，密封并标明标记，于一18℃以下冷冻保存。 7.2大米等含水量低的样品 取有代表性样品500g，用粉碎机充分粉碎，混勾，均分2份后装人洁净的盛样容器内，防止样品受 到污染或发生残留物含量的变化，密封并标明标记，常温保存 8测定步骤 8.1提取 式出版 称取试样10.0g（精确至0.01g），置于50mL离心管中，加人10mL乙酸乙酯、5g氯化钠、 15000r/min均质2min，4500r/min离心5min，静置。 8.2水解、净化 取2mL上清液，35℃氮吹至近干.加人1mL1%乙醇胺溶液（5.5），超声15min，4500r/min离 心5min。取0.5mL上清液，用1%甲酸溶液（5.4）调pH值至中性（经pH计测量）、用甲醇水溶液 (5.3）定容至1mL，4500r/min离心5min过0.22μm滤膜（5.9），上机。 8.3测定 8.3.1 液相色谱/质谱条件 8. 3. 1. 1 8. 3. 1. 2 柱温：室温。 8. 3. 1.3 进样量：5μuL。 8. 3. 1. 4 流动相：水（0.1%甲酸）：甲醇=1：9。 8.3.1.5 流速：0.3mL/min。 8. 3. 1. 6 质谱条件：参见附录A。 2 SN/T 5449—2022 8. 3.2 液相色谱质谱/质谱测定 8.3.2.1定性测定 按照液相色谱质谱/质谱条件测定样品和基质标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间和 标准品保留时间相差不超过土2.5%，定性离子对的相对丰度（是用相对于最强离子丰度的强度百分比 表示）与浓度相对于基质标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围，则 可判断样品中存在相应的被测物。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.3.2.2定量测定 根据试样中被测物含量情况，选取响应值相近的基质标准工作液一起进行色谱分析。基质标准工 作液和待测液中2，4-DNOP的响应值应在仪器的线性响应范围内。在上述色谱条件下2，4-DNOP的 参考保留时间为5.45min。采用峰面积进行定量，监测离子对和定量离子对见表2。 表 22,4-DNOP 的监测离子对和定量离子对 参考保 母离子/ 子离子/ 碰撞能量 化合物中英文名称 留时间/ (m/z) (z/u) (CE)/eV min 25 295.3 134.2* 2,4-二硝基-6-（1-甲基庚基）苯酚 5.45 2,4-DNOP 295.3 193.1 35 ＊表示定量离子对。 8.3. 2.3 空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 8.4结果计算和表述 (1) m 1000 式中： X, 试样中待测组分的含量，单位为微克每千克（μg/kg）； C, 从基质标准曲线上得到的样液中分析物的含量，单位为微克每升（ug/L）： 样品定容体积，单位为毫升（mL）； 最终样液代表的试样量，单位为克（g）； m 注：计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。 3