ICS 67.040 SN CCS X 04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5358—2021 出口茶叶中氯噻啉残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of imidaclothiz residue in tea for export HPLC-MS/MS method 2021-11-22 发布 2022-06-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5358—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的 规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国杭州海关技术中心、浙江省检验检疫科学技术研究院、中华人民 共和国合肥海关技术中心。 本文件主要起草人：楼成杰、黄超群、崔晓美、蒋沁婷、吴娟、欧阳械华、严颖鹏、李翼、宋伟。 SN/T 5358—2021 出口茶叶中氯啉残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了出口茶叶中氯噻啉残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本文件适用于绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶中氯噻啉残留量的定量测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4方法提要 式出版文本为 试样复水后用乙睛提取，经固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量， 5试剂和材料 你准信息服务 除特殊注明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.1乙腈：色谱纯。 甲苯：色谱纯。 5. 2 5. 3 甲醇：色谱纯。 5.4 乙酸铵：色谱纯。 甲酸：色谱纯。 5.5 5.6氯化钠。 5.7乙酸铵-甲酸混合溶液：称取0.385g乙酸铵，用适量水溶解后加人1mL甲酸，用水定容至1L， 混匀。 5.8乙腈-甲苯混合溶液（3十1，/）：移取75mL乙腈和25mL甲苯，混合均勾。 5.9标准物质：氯噻啉，C,H：CIN，O,S.CAS号105843-36-5。 5.10标准储备溶液：准确称取10mg（精确至0.1mg）标准物质用乙睛溶解并定容于50mL容量瓶 中，配制成溶液浓度为200μg/mL的标准储备液，于0℃～4℃保存，有效期6个月 5.11标准中间液：准确移取标准储备溶液0.50mL，用甲醇稀释并定容至10mL，配制成溶液浓度为 10μg/mL的标准中间液。准确移取10μg/mL的标准中间液1.0mL,用甲醇稀释并定容至10mL,配 1 SN/T 5358—2021 制成溶液浓度为1.0μg/mL的标准中间液，于0℃～4℃储存，有效期3个月。 5.12标准工作溶液：用标准中间液配制成溶液浓度为1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10ng/mL 和50ng/mL的标准工作液，于0℃～4℃储存，有效期3个月。 5.13基质混合标准工作溶液：取适量经7.1和7.2步骤处理的空白样品基质溶液于进样瓶中，用氮气 缓缓吹至近干，加入等体积的标准工作溶液溶解混匀，用于做标准工作曲线。现用现配。 5mL乙睛-甲苯混合溶液（4.8）活化。 5.15微孔滤膜：0.22μm，有机相。 6仪器和设备 6.1液相色谱-质谱/质谱仪，配有电喷雾离子源。 6.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。 6.3涡旋混合器。 6.4均质机。 6.5台式离心机：转速不低于4000r/min。 6.6旋转蒸发仪。 6.7固相萃取仪。 6.8 移液枪：1mL。 7 试样制备与保存 7.1试样的制备 出版文本为准 取代表性样品约500g，用粉碎机粉碎并通过40目标准筛，混匀，装人洁净的盛样容器中，密封并标 明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 7.2试样的保存 试样于室温下保存。 8测定步骤 8.1提取 称取试样2g（精确至0.01g），置于50mL塑料离心管中，加人10mL水，浸泡至少30min，再加人 20mL乙睛，高速均质提取1min，加人3.5g氯化钠，涡旋混匀30秒，以4000r/min离心4min，上清 液待净化。 8.2净化 将2.0mL上清液转移至已活化的固相萃取柱（5.14)内，接收流出液，再用8.0mL乙-甲苯混合 溶液（5.8）洗脱，收集全部洗脱液，45℃水浴减压浓缩至近干，加人2.0ml甲醇溶解，经微孔滤膜过滤， 供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 2 SN/T 5358—2021 8.3测定 8. 3. 1 液相色谱-质谱/质谱条件 液相色谱-质谱/质谱参考条件列出如下： a) 色谱柱：C18，150mmX4.6mm（内径）,5μm，或相当者； b) 流动相：乙酸铵-甲酸混合溶液（5.7）和乙睛，梯度洗脱程序参见表1； 柱温：30℃； c) d) 流速：0.80mL/min； e) 进样量：10μL； f) 离子源：电喷雾离子源； g) 扫描方式：正离子扫描； h) 监测方式：多反应监测； 监测离子对参见附录A中表A.1。 i) 表 1 梯度洗脱程序 时间/min 乙酸铵-甲酸混合溶液/% 乙腈/% 0. 00 80 20 1.00 80 20 4.00 20 6.00 80 7.00 96 10.00 95 12. 00 80 20 14.00 K 80 20 8. 3.2 定性测定 按照上述仪器条件测定样液和标准工作溶液，如果定性离子均出现，且信噪比大于等于3，且样液 与标准工作液中待测物质色谱峰相对保留时间偏差在土2.5%范围内，定性离子对的相对丰度与浓度相 当的标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许误差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在相 应的被测物。 表 2 相对离子丰度最大容许误差 相对离子丰度（基峰） >50 >20~50 >10~20 ≤10 % 最大容许误差 ±20 ±25 ±30 ±50 % 8.3.3 定量测定 按7.3.1仪器条件测定基质混合标准工作溶液和样液，以外标曲线法计算样液中的氯噻啉含量。 3