! 7 ,     !7,+,0)      ' .   ' 羊人工授精技术规程 Technical code of practice for sheep/goat artificial insemination 2023 -07-03 发布 2023 -08-03 实施CCS B 43 DB32/T 4503—2023ICS　65.020.20 DB32/T 4503—2023 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则　第 1部分：标准文件的结构和起草规则 》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由江苏省农业科学院提出并归口 。 本文件起草单位 ：江苏省农业科学院 。 本文件主要起草人 ：钱勇、曹少先、王慧利、孟春花、李隐侠、丁强、张俊、钟声。 Ⅲ DB32/T 4503—2023 羊人工授精技术规程 1 范围 本文件规定了羊人工授精技术应用的场地条件 、准备事项 、采精、精液品质检查 、精液稀释与保存 、母 羊发情鉴定 、输精、配种记录等技术要求 。 本文件适用于羊的人工授精 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本 文件。 GB 20557 —2006　山羊冷冻精液 NY/T 2169　种羊场建设标准 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 3.1 台羊 dummy sheep/goat 采精时专供公羊爬跨的被固定的活羊或固定好的假羊 。 3.2 人工授精 artificial insemination 人为借助专门器械 ，将采集的种公羊精液经检查 、稀释、保存等处理合格后 ，输入到发情母羊生殖道 内，使其妊娠的一种繁殖技术 。 [来源：NY/T 1335 —2022，3.1] 4 场地条件 4.1 配种羊舍 4.1.1 新建羊场在规划设计时应包含配种羊舍 ，其他羊场也可通过改建或扩建设置配种羊舍 ，羊舍结构 设计应符合 NY/T 2169的规定。 4.1.2 配种羊舍面积应按每 1 000只可繁殖母羊 1 200 m2进行设计 ，内部空间应包括空怀母羊圈 、待配 母羊圈、种公羊圈 、试情公羊圈和人工授精实验室 、采精间（场地） 、输精间（场地）等设施。 4.1.3 配种舍羊圈宜采用双列或多列平面布局 ，走道两侧羊圈应设圈门 ，走道与羊床高度应持平或高差 ≤20 cm。 1 DB32/T 4503—2023 4.2 人工授精实验室 4.2.1 建设面积一般为 10 m2~30 m2。 4.2.2 实验室内应设置无菌间和器材洗涤消毒用的准备间 。 4.2.3 无菌间的门窗应可密闭 ，室内应安装紫外线消毒灯和空调 。 4.2.4 准备间应配置清洗水池 、消毒和干燥设备 ，电源功率 >5 kw。 4.3 采精间 4.3.1 采精间应紧邻人工授精实验室 ，面积以 8 m2~10 m2为宜。 4.3.2 采精间内应设置水池和采精架 ，地面应硬化并做防滑处理 。采精架设计示意图见附录 A。 4.4 输精间 4.4.1 输精间宜为独立空间 ，可以是围栏围起来的专用场地 ，位置应设在待配种母羊圈的附近 。 4.4.2 输精间内应设置输精操作台或输精保定栏杆 。 5 准备事项 5.1 配种公羊 5.1.1 要求 5.1.1.1 应符合该品种的种用标准 。 5.1.1.2 年龄以 1岁~5岁为宜，体格健壮 、睾丸发育良好 、性欲旺盛 。 5.1.1.3 公羊与待配种母羊的比例可为 1∶200~1∶400。 5.1.2 调教 5.1.2.1 调教时间 青年公羊采精前应进行调教 。调教时间宜从 8月龄开始 ，刚开始每周采精 1次，周岁后可按正常频 率采精。 5.1.2.2 调教方法 5.1.2.2.1 开始调教时 ，可用体型较大的发情母羊作为台羊保定在采精架上 。采精成功 3次后，发情母羊 即可换为非发情母羊或假羊 。 5.1.2.2.2 对于性欲不强或不会爬跨的后备公羊 ，可采用以下方法进行调教 ： ——在别的公羊配种时让其在旁边 “观看” ，刺激形成性条件反射 ； ——将发情母羊分泌物抹在公羊鼻尖上刺激性欲 ； ——将种公羊放入非育种群发情母羊群中 ，使其先自然交配几次 ，再进行采精训练 ； ——增加运动量和运动强度 。 5.1.3 补饲 配种期间应加强配种公羊日粮营养 ，增喂鸡蛋 、胡萝卜、复合维生素等 。 2 DB32/T 4503—2023 5.2 试情公羊 5.2.1 试情公羊应选择不参与配种 、周岁以上的青年公羊 ，且体格健壮 、性欲旺盛和无疾病的个体 。 5.2.2 试情公羊的数量可按配种母羊数量 1∶100~1∶200比例准备 。 5.2.3 试情公羊参与试情期间应单独饲养 。 5.3 配种母羊 应在配种期到来之前 ，及时做好羔羊断奶 、母羊整群 、预防接种 、驱虫，并进行短期优饲 ，母羊膘情以 中等水平为宜 。 6 采精 6.1 准备工作 6.1.1 器材和物品 人工授精所需的器材和物品应在配种期到来之前准备齐全 ，器材和物品名录见附录 B。 6.1.2 器材清洗与消毒 器材清洗与消毒方法见附录 C。 6.2 采精操作 6.2.1 假阴道安装 6.2.1.1 将内胎装入外壳内 ，将两端露出的部分向外壳表面翻卷展平 ，内胎应松紧均匀 、不扭曲。 6.2.1.2 在安装消毒好的假阴道一端安装集精杯 ，从外壳中央充气孔加入 50 ℃~ 55 ℃的热水至充气口 处，然后在充气孔上安装好橡胶塞和充气阀 （气嘴） ，从气嘴吹入适量空气 ，使假阴道采精口的一端内胎呈 三角“Y”状为宜。 6.2.1.3 用消毒玻璃棒蘸取少许医用凡士林均匀涂于假阴道采精口一端 ，深度约为内胎 1/2。 6.2.1.4 把消毒过的玻璃棒式温度计插入假阴道内检测温度 ，温度以 40 ℃~ 42 ℃为宜。 6.2.2 采精 6.2.2.1 采精前先用湿毛巾把公羊阴茎周围污物擦洗干净 。 6.2.2.2 当公羊爬跨台羊时 ，迅速拉开公羊 ，反复 2次后再进行采精 。 6.2.2.3 采精时，操作人员用右手掌心握住假阴道和集精杯 ，气嘴方向朝下 ，假阴道与地面呈 35°~40°夹 角，在公羊爬跨台羊伸出阴茎时 ，左手迅速轻托包皮将阴茎导入假阴道内 ，公羊向前耸身射精后迅速将假 阴道竖起 ，集精杯一端向下 。 6.2.2.4 打开气嘴放气 ，取下集精杯 ，盖上盖，在采精杯外壳上注明公羊个体编号 ，尽快送到检查室内 ，并 放到 30 ℃~ 37 ℃的恒温环境中 ，集精杯应避免阳光直射 ，防止污染 。 6.2.2.5 不宜将不同公羊的精液混合后使用 。 6.2.3 采精频率 每只公羊以每天采精 1次为宜，特殊情况下 1 d内需采精 2次的，则应间隔 1 d后再采精 。 3 DB32/T 4503—2023 6.2.4 采精记录 应及时做好当天种公羊的采精记录 ，种公羊采精记录表样式见附录 D。 7 精液品质检查 7.1 色泽与气味 正常精液应为乳白色或浅乳黄色 ，略带腥味 ，无异味。 7.2 射精量 可用有刻度的集精杯或注射器测定 ，一次射精量如 <0.5 mL的，应检查公羊健康状况或调整采精 频率。 7.3 精子密度 用于人工授精的鲜精的精子密度应 ≥6×108个/mL。可采用血球计数板法或精子密度仪进行测定 ， 精子密度仪应定期用血球计数板法进行校正 。 7.4 精子活力 用于人工授精的鲜精的精子活力应 ≥60%。检测方法按 GB 20557 —2006中A.3的规定执行 。 7.5 精子畸形率 用于人工授精的鲜精的精子畸形率应 ≤15%。检测方法按 GB 20557 —2006中A.5的规定执行 。 8 精液稀释与保存 8.1 精液稀释液配制 常用精液稀释液 （以下简称 “稀释液” ）配制方法见附录 E。 8.2 稀释方法 8.2.1 精液和稀释液的温度应保持相同或接近 ，稀释过程中应避免温度大幅度反复波动 。具体操作步骤 如下： ——将配制好的稀释连瓶置于 30 ℃~ 37 ℃的恒温环境中 ； ——将检查合格的精液连同玻璃容器 （集精杯或试管 ）同样置于相同的恒温环境中 ； ——根据精子密度 、活力和当天需要配种的母羊数确定稀释倍数 ，应保证每只羊每次输精剂量 （0.1 mL~ 0.2 mL）的有效精子数不少于 3 000万个； ——稀释前用注射器先吸入少量稀释液清洗内壁 ，弃去后再按需要量正式吸入稀释液 ，稀释时应沿 精液容器壁缓缓注入精液内并轻轻摇动混匀 ； ——用移液枪吸取一滴稀释后的精液 ，检查精子活力 ； ——将稀释后的精液放回 30 ℃~ 37 ℃的恒温环境中 ，盖上盖子 ； 8.2.2 精液稀释后 ，应尽快使用 。如有分装和保存需要 ，应在分装瓶上注明公羊个体编号 、采精时间 、精 子密度、活力和稀释倍数 。 4 DB32/T 4503—2023 8.3 精液常温保存 8.3.1 将稀释分装好的精液置于 20 ℃~ 25 ℃下1 h~2 h后，放入 16 ℃~ 18 ℃恒温箱内避光保存 ；也可用 8层~10层纱布包裹严实直接放入 16 ℃~ 18 ℃恒温箱内 。 8.3.2 保存的精液每隔 8 h~12 h摇动一次 ，摇动时应轻缓均匀 。 8.3.3 精液常温保存时间不宜超过 48h，使用前应检查精子活力 ， 精子活力 <30%的不宜使用 。 8.4 精液低温保存 8.4