ICS 13.100 CCS C 52 团 体 标 准 T/WSJD 18.13 —2021 工作场所空气中化学因素测定 氢醌、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基 苯酚和2,4-二硝基苯酚的高效液相色 谱法 Determination of chemical agents in workplace air — Hydroquinone, resorcinol, catechol, p -nitrophenol and 2,4-dinitrophenol by high -performance liquid chromatography 2021-09-14发布 颁布布 2021-10-01实施 中国卫生监督协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/WSJD 18.13—2021 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020给出的规则起草。 本文件由中国卫生监督协会提出并归口。 本文件起草单位：武汉市职业病防治院、湖北省疾病预防控制中心、武汉科技大学医学院、华中科 技大学同济医学院。 本文件主要起草人：宋为丽、张铮、江金凤、杨莉、刘亚攀、聂晓明、梅勇、郑红燕、王敏、付小 蕾、万思宇、刘晙玭、王小嫚、罗平。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/WSJD 18.13—2021 1 工作场所空气中化学 因素测定 氢醌、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚的 高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了工作场所空气中氢醌（对苯二酚）、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基 苯酚的高效液相色谱法。 本文件适用于工作场所空气中蒸气态和气溶胶态氢醌（对苯二酚）、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基 苯酚和 2,4-二硝基苯酚浓度的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中 ,注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用 于本文件。 GBZ 159 工作场所空气中有害物质监测的采样规范 3 原理 工作场所空气中蒸气态和气溶胶态的氢醌、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚用 复合式采样管采集， 10%甲醇溶液洗脱和解吸，经色谱柱分离，紫外检测器 230 nm波长下检测，以保留 时间定性，测定峰面积或峰高，由外标标准曲线法进行 定量。 4 仪器设备与材料 4.1 复合式采样管，玻璃纤维滤膜（孔径 4 µ m）/硅胶（ 200 mg/100mg ）。 4.2 空气采样器，流量满足 0.5 L/min ～1.0 L/min 。 4.3 螺口玻璃瓶（盖内衬聚四氟乙烯膜）， 2 mL，5 mL。 4.4 容量瓶， 2 mL、10 mL。 4.5 针式过滤器（水相），孔径 0.45 μm。 4.6 分析天平，感量 0.01 mg。 4.7 高效液相色谱仪，具紫外检测器。 5 试剂 5.1 去离子水（ ρ≥18.2 MΩ ）。 5.2 甲醇（ CH 3OH），色谱纯。 5.3 氢醌（ C6H6O2），色谱纯。 全国团体标准信息平台 T/WSJD 18.13—2021 2 5.4 间苯二酚（ C6H6O2），色谱纯。 5.5 邻苯二酚（ C6H6O2），色谱纯。 5.6 对硝基苯酚（ C6H4NO 3），色谱纯。 5.7 2,4-二硝基苯酚（ C6H4N2O5），色谱纯。 5.8 乙酸铵（ C2H7NO 2），优级纯。 5.9 冰乙酸（ C2H4O2），优级纯。 5.10 乙酸铵 -乙酸缓冲溶液（ pH3.6）：称取 770.8 mg 乙酸铵溶于 1 L去离子水中，加入 7.5 mL冰 乙酸，混匀。 5.11 甲醇溶液， 10%（体积比）。 5.12 标准储备溶液： 准确称取一定量的氢醌、 间苯二酚、 邻苯二酚、 对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚， 用甲醇溶解并定容，配制成混合标准储备溶液；该溶液放置于 4℃条件下可稳定保存 1个月。 5.13 标准应用溶液： 用甲醇溶液将标准储备液稀释成浓度均为 200 μg/mL 的混和标准应用溶液。 6 样品的采集、运输和保存 6.1 样品采集 现场采样按照 GBZ 159 执行。用复合式采样管，以 1 L/min流量，采集 15 min空气样品。用复 合式采样管，以 0.5 L/min 流量，采集 2 h～8 h空气样品。 6.2 样品空白 打开复合式采样管两端，并立即封闭，然后同样品一起运输、保存和测定。每批次样品不少于 2 个样品空白。 6.3 样品运输和保存 采样后，立即封闭复合式采样管两端，与样品空白一起置清洁容器中运输和保存。样品在 -20℃ 条件下可稳 定保存 14 d。 7 分析步骤 7.1 仪器操作参考条件 a) 色谱柱： 250 mm×4.6 mm 5μm C 18； b) 柱温： 25℃； c) 波长： 230 nm； d) 流动相：甲醇：乙酸铵 -乙酸缓冲溶液，梯度洗脱程序如表 1； e) 流速 1.0 mL/min ； f) 进样体积： 100 μL。 表1 梯度洗脱条件 时间 min A 甲醇 % B 乙酸铵 -乙酸溶液 % ① 10.0 90.0 5.00 10.0 90.0 全国团体标准信息平台 T/WSJD 18.13—2021 3 20.00 40.0 60.0 30.00 60.0 40.0 31.00 10.0 90.0 7.2 标准系列溶液的配制与测定 取5只容量瓶，用甲醇溶液将混标应用液稀释配制成酚浓度为 0 μg/mL～100 μg/mL 混合标准系列 溶液。 参照仪器操作条件，将液相色谱仪调节至最佳测定状态，测定标准系列溶液，以测得的峰面积或峰 高对相应的氢醌、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚的浓度（ μg/mL）计算线性回归 方程。 7.3 样品处理与测定 将样品的玻璃纤维滤膜、前段硅胶、后段硅胶分别转入 5 mL螺口玻璃瓶中，滤膜中加入 1.00 mL 甲醇溶液，硅胶中加入 2.00 mL甲醇溶液，密闭后涡旋震荡 5 min，洗脱和 解吸 30 min；样品洗脱和解 吸溶液经针式过滤器过滤后供测定。 用测定标准系列的操作条件测定样品溶液，测得的峰面积或峰高值后，由线性回归方程得氢醌、间 苯二酚、邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚的浓度 （g/mL）。若样品溶液中氢醌、间苯二酚、 邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚浓度超出测定范围，可用甲醇溶液稀释后测定，计算时乘以稀 释倍数。 8 计算 8.1 按式（ 1）将样品的采样体积换算成样品的标准采样体积（ V20） 101.3 273293 20P tV V += ………………………………………… （1） 式中： V20 ——样品的标准采样体积，单位为升（ L）； V ——样品的采样体积，单位为升（ L）； t ——样品采集时的空气温度，单位为度（ ℃）； P ——样品采集时的空气大气压强度，单位为千帕（ kPa）。 8.2 按式（ 2）计算空气中氢醌、间苯二酚、邻苯二酚、对硝基苯酚和 2,4-二硝基苯酚的浓度 20323 20222 20111 VD VD VD ++= ……………………………………… （2） 式中： ρ ——空气中各待测物的浓度，单位为毫克每立方米（ mg/m3）； ρ1,ρ2,ρ3 ——测得的玻璃纤维滤膜洗脱液、前段硅胶解吸液和后段硅胶解吸液中各待测物的浓度，单 位为微克每毫升（ μg/mL）； v1,v2 ——样品洗脱液、解吸液的体积，单位为毫升（ mL） 全国团体标准信息平台 T/WSJD 18.13—2021 4 D1,D2,D3 ——与样品玻璃纤维滤膜、 前段硅胶、 后段硅胶 中待测物剂量相当的洗脱效率和解吸效率； V20——样品的标准采样体积，单位为升（ L）。 8.3 时间加权平均接触浓度（ ρTWA）按 GBZ 159 规定计算。 9 说明 9.1 方法定量下限、测定范围、最低定量浓度（以采集 15 L空气样品计）、精密度、洗脱和解吸效 率等方法性能指标见表 2。5种酚化合物吸附容量的总量（一种或几种之和），至少为 2671.5 μg 。应 测定每批复合式采样管的空白以及洗脱效率和解吸效率。 表2 各物质方法性能指标 化学物质 定量测定范围 μg/mL 定量下限 μg/mL 最低定量浓度 mg/m3 精密度 % 洗脱效率 % 解吸效率 % 氢醌 1.06～100 1.06 0.071 1.19～5.23 87.0～93.7 94.2～103.7 间苯二酚 1.60～100 1.60 0.21 1.88～4.38 80.0～92.9 99.1～100.8 邻苯二酚 1.56～100 1.56 0.21 1.49～5.94 94.8～97.5 92.4～94.8 对硝基酚 1.57～100 1