ICS 11.120.01 C 23 团体标准 T/CACM 1326.1—2019 药用植物顽拗性种 子超低温保存技术通则 General rule for cryopreservation of recalcitrant seeds of Chinese medicinal plants 2019 - 10 - 17发布 2019 - 10 - 17实施 中 华 中 医 药 学 会 发布 全国团体标准信息平台 T/CACM T/CACMT/CACM 1326.1—2019 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ II 引言 ................................ ................................ ............... III 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 种子贮藏特性的判断 ................................ ................................ 2 5 种子的选择 ................................ ................................ ........ 2 6 种子前处理 ................................ ................................ ........ 2 6.1 种子活力检测 ................................ ................................ .. 2 6.2 保存种子 含水量范围选择 ................................ ........................ 2 7 种子保存量 ................................ ................................ ........ 2 8 种子冷冻方式 ................................ ................................ ...... 3 9 恢复培养 ................................ ................................ .......... 3 9.1 种子解冻处理 ................................ ................................ .. 3 9.2 冻后种子活力检测 ................................ .............................. 3 9.3 萌芽成苗 ................................ ................................ ...... 3 10 保存种子补充规则 ................................ ................................ . 3 附录A（规范性附录） 种子贮藏特性判断方法及 保存流程 ................................ ... 4 参考文献 ................................ ................................ ............. 5 全国团体标准信息平台 T/CACM T/CACMT/CACM 1326.1—2019 II 前 言 本标准是药用植物顽拗性种子超低温保存 系列标准之一，该系列标准结构和名称如下： ——T/CACM 1326.1 药用植物顽拗性种子超低温保存技术通则 ； ——T/CACM 1326.2 白木香种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 3 降香种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 4 益智种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 5 高良姜种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 6 朱砂根种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 7 草豆蔻种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 8 化州柚种 子超低温保存技术 规程； ——T/CACM 1326. 9 樟种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 10 两面针种子超低温保存技术规程 ； ………………。 本标准按照 GB/T 1.1－2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国医学科学院药用植物研究所海南分所提出。 本标准由中华 中医药学会 归口。 本标准起草单位：中国医学科学院药用植物研究所海南分所，中国医学科学院药用植物研究所， 中国科学院昆明植物研究所。 本标准主要起草人：魏建和，曾琳， 郑希龙， 李榕涛，王秋玲，杨湘云、 何明军，林亮、胡枭剑， 金钺，顾雅坤，符丽。 全国团体标准信息平台 T/CACM T/CACMT/CACM 1326.1—2019 III 引 言 药用植物 种质资源是中医药业可持续发展 和新药创制 的物质基础 ，我国是世界上药用植物 种质资 源最为丰富的国 家。长期以来，对药用植物的过度采伐与利用，工业化与城市化发展及近年来的全球 气候变暖，严重危及药用植物的多样性。药用植物主要通过种子繁殖。我国南方区域的药用植物种子 多为顽拗性种子，难以长期保存。顽拗性种子植物多采用就地保存和迁地保存，这两种传统保存方法 占地面积大，且易受极端气候条件的影响和病虫害侵袭，造成保存材料的丧失。建立 低耗、安 全、长 期的药用植物种质资源保存技术 方法极为重要。 超低温保存是将植物细胞、组织或器官置于液氮条件下（ -196℃）保存的一种技术。在液氮条件 下，细胞分裂与生理代谢停止，因而能长期 保存植物材 料和保证保存材料的遗传稳定性。超低温保存 具有占有空间小、耗能低、成本低、操作简便的特点，被认为是目前长期保存植物种质资源最理想的 方法。自上世纪 60 年代植物超低温保存首次成功报道以来，在过去的 60 年间，植物超低温保存技 术研究迅速发展。到目前为止，几乎所有重要经济作物的超低温保存都有成功报道。已建立了多种重 要经济作物的超低温 基因库。药用植物种质资源 的超低温保存技术研究远远滞后于其他植物，且超低 温基因库尚未建立。 为促进药用植物顽拗性种子液氮超低温保存技术的研究与超低温基因库的建立，我们建立了我国 唯一的国家级顽拗 性药用植物种质资源 ——国家南药基因资源库。 为促进药用植物顽拗性种子液氮超 低温保存技术研究，加快超低温基因库的建立，特制定本 标准。 全国团体标准信息平台 T/CACM T/CACMT/CACM 1326.1—2019 1 药用植物顽拗性种子超低温保存技术通则 1 范围 本标准规定了药用植物顽拗性种子超低温保存过程中的 术语和定义、贮藏特性的判断、保存种子 的选择、种子前处理、种子保存量、种子冷冻方式、解冻及恢复培养 、保存种子补充规则等内容。 本标准适用于药用植物顽拗性种子超低温保存 。 2 规范性引用文件 下列文件对本 文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单 ）适用于本文件。 GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定 GB/T 3543. 7 农作物种子检验规程 其他项目检验 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 3.1 种子 seed 种子植物特有的繁殖体，由胚珠经过传 粉受精形成 。 3.2 顽拗性种子 recalcitrant seeds 成熟脱落时仍保持较高含水量（ 20％～90％） ，且整个生长发育过程对脱水和低温（ 0℃）敏感 的种子，在自然条件下贮藏寿命短 。种子贮藏温度低于 0℃时，会因为细胞内形成冰晶而丧失活力。 3.3 正常性种子 orthodox seeds 种子含水量降至