ICS 11.120.01 C 23 团体标准 T/CACM 1326.7 —2019 草豆蔻种子超低温保存技术规程 Technical code of practice for cr yopreservation of Alpinia katsumadai Hayata seeds 2019 - 10 - 17发布 2019 - 10 - 17实施 中 华 中 医 药 学 会 发布 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.7—2019 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 种子采收及选择 ................................ ................................ .... 2 4.1 种子采收 ........................................................................ 2 4.2 种子选择 ........................................................................ 2 5 种子前处理 ................................ ................................ ........ 2 5.1 活力 ................................ ................................ ......... 2 5.2 含水量范围 ...................................................................... 2 6 种子量保存 ................................ ................................ ........ 2 7 种子冷冻方式 ................................ ................................ ...... 2 8 恢复培养 ................................ ................................ .......... 3 8.1 种子解冻处理 .................................................................... 3 8.2 冻后种子生活力检测 .............................................................. 3 8.3 萌芽成苗 ........................................................................ 3 附录A（规范性附录） BTB配制和保存方法 ................................................. 4 参考文献 ................................ ................................ ............. 5 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.7—2019 II 前 言 本标准是 药用植物顽拗性种子超低温保存系列标准之一，该系列标准结构和名称如下： ——T/CACM 1326.1 药用植物顽拗性种子超低温保存技术通则； ——T/CACM 1326.2 白木香种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.3 降香种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.4 益智种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.5 高良姜种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.6 朱砂根种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.7 草豆蔻种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.8 化州柚种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.9 樟种子超低温保存技术规程； ——T/CACM 1326.10 两面针种子超低温保存技术规程； ……………… 。 本标准按照 GB/T 1.1 -2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国医学科学院药用植物研究所海南分所提出。 本标准由中华中医药学会归口。 本标准起草单位： 中国医学科学院药用植 物研究所海南分所、中国医学科学院药用植物研究所。 本标准主要起草人： 曾琳、魏建和、郑希龙、李榕涛、王秋玲、何明军、金钺、顾雅坤、符丽。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.7—2019 1 草豆蔻种子超低温保存技术规程 1 范围 本标准规定了草豆蔻（ Alpinia katsumadai Hayata）种子超低温保存过程中的术语和定义、种子 采收及选择、种子 前处理、种子保存量、 种子冷冻方式、恢复培养等内容。 本标准适 用于草豆蔻种子的超低温长期贮藏 。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543. 6 农作物种子检验规程 水分测定 植物生理学实验指导（第三版）， 2005 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 草豆蔻 Alpinia katsumadai Hayata 为姜科（ Zingiberaceae ）山姜属（ Alpinia Roxb）植物，株高 3 m，叶片线状披针形，总状花序 顶生。其干燥近成熟种子性辛、温，归脾、胃经，具有燥湿行气，温中止呕的功效。常用于治疗寒湿内 阻，脘腹胀满冷痛。收载于 《中华人民共和国药典》（ 2015 版）。 3.2 草豆蔻果实 Alpinia katsumadai Hayata fruits 果实为蒴果，圆球形，直径约 3.5 cm～4 cm，外面密生粗毛。内有类球形的种子团，直径 1.5 cm～2.7 cm，表面灰褐色，中间有黄白色的隔膜，将种子团分成 3瓣，每瓣有种子多数，粘连紧密，种 子团略光滑。 3.3 草豆蔻种子 Alpinia katsumadai Hayata seeds 草豆蔻的繁殖材料为完整种子，贮藏特性判断为顽拗性种子。 种子表面灰棕色或浅褐色，卵圆状 多面体，长 3 mm～5 mm，直径约 3 mm，外被一层白色透明膜质假种皮，种脊为一条纵沟，一端有种 脐；质硬，将种子沿种脊纵剖两瓣，纵断面观呈斜心形，种皮沿种脊向内伸入部分约占整个表面积的 1/2；胚乳灰白色。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.7—2019 2 3.4 种子超低温保存 seed of cryopreservation 将经过前处理的草豆蔻种子置于液氮（ -196 ℃）中保存。 4 种子采收及选择 4.1 种子采收 5 月～8 月，果皮呈金黄色时，即可采收，去除果肉，取出种子洗净。 4.2 种子选择 挑选发育饱满、完整、健康的种子为保存材料，置于 10 ℃ 种子低温低湿储藏柜中保存备用（存 放时间不超过 6 个月）。 5 种子前处理 5.1 活力 5.1.1 检测 草豆蔻种子活力以种子生活力为判别标准。 按照 《植物生理学实验指导》 中的溴麝香草酚蓝 （ BTB） 法测定草豆蔻种子生活力。待测种子在 30 ℃～35 ℃ 温水中浸种 2 h，随后取吸胀种子 20 粒，整 齐地埋于备好的 1.5％ BTB 琼脂凝胶中，应将胚部分埋入凝胶中。将培养皿置于 35 ℃ 温箱中 12 h 后观察结果。 BTB 的配制和保存方法见附录 A。 5.1.2 鉴定及要求 在光下用放大镜对染色结果进行观察鉴定。凡种胚周围出现黄色晕圈的种子为有活力的种子，否 则为无活力的种子。 待保存的草豆蔻种子生