ICS 11.120.01 C 23 团体标准 T/CACM 1326.25—2019 匍匐滨藜种子超低温保存技术规程 Technical code of practice for cryopreservation of Atriplex repens Roth seeds 2019 - 10 - 17发布 2019 - 10 - 17实施 中 华 中 医 药 学 会 发布 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.25—2019 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 种子的采收及选择 ................................ ................................ .. 2 4.1 种子采收 ................................ ................................ ...... 2 4.2 种子选择 ................................ ................................ ...... 2 5 种子前处理 ................................ ................................ ........ 2 5.1 活力 ................................ ................................ .......... 2 5.2 含水量范围 ................................ ................................ .... 2 6 种子保存量 ................................ ................................ ........ 3 7 种子冷冻方式 ................................ ................................ ...... 3 8 恢复培养 ................................ ................................ .......... 3 8.1 种子解冻处理 ................................ ................................ .. 3 8.2 冻后种子活力检测 ................................ .............................. 3 8.3 萌芽成苗 ................................ ................................ ...... 3 附录A（规范性附录） BTB的配制和保存方法 ................................ .............. 4 参考文献 ................................ ................................ ............. 5 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.25—2019 II 前 言 本标准是药用植物顽拗性种子超低温保存系列标准之一，该系列标准结构和名称如下： —— T/CACM 1326.1 药用植物顽拗性种子超低温保存技术通则； —— T/CACM 1326.2 白木香种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.3 降香种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.4 益智种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.5 高良姜种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.6 朱砂根种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.7 草豆蔻种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.8 化州柚种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.9 樟种子超低温保存技术规程 ； —— T/CACM 1326.10 两面针种子超低温保存技术规程； ………… 。 本标准按照 GB/T 1.1 —2009《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国医学科学院药用植物研究所海南分所提出 。 本标准由 中华中医药学会归口。 本标准起草单位： 中国医学科学院药用植物研究所海南分所、 中国医学科学院药用植物研究所。 本标准主要起草人： 曾琳，魏建和，郑希龙，李榕涛，王秋玲，何明军，金钺，顾雅坤，符丽 。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.25—2019 1 匍匐滨藜种子超低温保存技术规程 1 范围 本标准规定了匍匐滨藜 （Atriplex repens Roth）种子超低温保存过程中的术语和定义、种子的 选择、种子前处理、种子保存量、种子冷冻方式、恢复培养等内容。 本标准适用于匍匐滨藜种子的超低温长期贮藏。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定 GB/T 3543.7 农作物种子检验规程 其他项目检验 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 3.1 匍匐滨藜 Atriplex repens Roth 为藜科（ Chenopodiaceae ）滨藜属（ Atripliceae L.）中的一种南药植物，产海南岛，生于海滨 空旷沙地，分布于印度、阿富汗及伊朗。全草具有祛风行湿、固肾、消肿解毒之功效。收载于《福建 药物志（ 1983）》。 3.2 匍匐滨藜果实 Atriplex repens Roth fruits 果实为胞果，其胞果扁，卵形，果皮膜质 。 3.3 匍匐滨藜种子 Atriplex repens Roth seeds 匍匐滨藜的播种材料为完整种子，贮藏特性判断 为顽拗性种子。种子红褐色至黑色，扁球形，两 面微凸起，宽约 1.5 mm。 3.4 种子超低温保存 seed of cryopreservation 将经过前处理的匍匐滨藜种子置于液氮（ -196 ℃）中保存 。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.25—2019 2 4 种子的采收及选择 4.1 种子采收 12 月～翌年 1 月间，果皮转为棕色或红褐色时，即可采收，去除杂质和果皮，取出种子 。 4.2 种子选择 挑选发育饱满、均匀、健康的种子，置于 10 ℃ 冰箱中保存备用（存放时间不超过 3 个月）。 5 种子前处理 5.1 活力 5.1.1 检测 匍匐滨藜种子活力以种子生活力为判别标准。 按照 《植物生理学实验指导》 中的溴麝香草酚蓝 （ BTB） 法检测匍匐滨藜种子生活力。 待测种子在 30 ℃～35 ℃ 温水中浸种 2 h， 随后取吸胀种子 20 粒， 整齐地埋于备好的 1.5％ BTB 琼脂凝胶 中，注意要将胚埋入凝胶中。将培养皿置于 35 ℃ 温箱中 6 h 后观察结果。 BTB 的配制和保存方法见附录 A。 5.1.2 鉴定及要求 在光下用放大镜对染色结果进行观察鉴定。凡种胚周围出现黄色晕圈的种子为有活力的种子，否 则为无活力的种子。 待保存的匍匐滨藜种子生活力应 ≥70％。 5.1.3 计算 生活力按 照公式（ 1）进行计算： 式中： A——生活力； y——有活力的种子数； x——总的种子数。 5.2 含水量范围 用尼龙网袋包裹匍匐滨藜种子，置于盛有变色硅胶的干燥器内，硅胶与种子的体积比为 60:1，室 温条件下干燥处理 12 h～25 h，在干燥过程中定期测定种子含水量，将种子含水量由 20％～25％ 降 至 12％