ICS 11.220 CCS B 41 64 宁夏回族自治区 地方标准 DB64/T 2011-2024 犊牛腹泻综合防控技术规范 Technical specification for comprehensive prevention and control for calf diarrhea 2024-07-09发布 2024-10-08实施 宁夏回族自治区市场监督管理厅 发布 DB64/T 2011-2024 2 前言 本文件按照GB/T 1.1— 2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏回族自治区农业农村厅提出 、归口并组织实施。 本文件起草单位：宁夏农林科学院动物科学研究所、西北农林科技大学、宁夏回族自治区食品检测 研究院、宁夏畜牧工作站。 本文件主要起草人：高海慧、康晓冬、郭抗抗、吕毅、李知新、吴亚文、肖爱萍 、王栋、黎玉琼、 郭亚男、赵正伟、马丽娜、王晓春、侯鹏霞、王锦。 DB64/T 2011-2024 1 犊牛腹泻综合防控技术规范 1 范围 本文件规定了犊牛腹泻的流行特点、诊断与防治等技术要求 。 本文件适用于奶牛场（户）、肉牛场（户）对犊牛腹泻的防治 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 16568 奶牛场卫生规范 GB/T 18647 动物球虫病诊断技术 GB/T 35942 隐孢子虫套式PCR检测方法 NY/T 3445 畜禽养殖场档案规范 DB64/T 1723 宁夏奶牛球虫病诊断和防制技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 犊牛腹泻 calf diarrhea 由多种病因所引起的一种临床性疾病， 是犊牛所发生的一种以腹泻和消化不良为主要临床症状的胃 肠消化道疾病，多发于10 日龄以内。特征是拉稀便、软便或水样便、呕吐、脱水和体重减轻。主要有营 养、应激和病原三个因素。 3.2 病原 pathogen 能引起犊牛腹泻的动物病原微生物和寄生虫的统称 。 4 流行特点 该病在一年四季内均可发生，尤以初春、夏末、秋初等气候多变季节多发，发病率高、治愈率低， 常呈持续性感染，哺乳期内的犊牛更容易发生腹泻。 5 诊断 5.1 营养性腹泻 因牛乳饲喂过量、牛 乳成分的突然改变、代乳品品质不良和乳品温度过低等因素造成的一类腹泻， 可根据饲养管理具体情况分析判定。 DB64/T 2011-2024 2 5.2 应激性腹泻 因气温骤变 、饲草料变化、长途运输以及犊牛自身免疫力低，消化系统不成熟等造成的一类腹泻， 可根据饲养管理具体情况分析判定。 5.3 病原性腹泻 由致泻性病原感染所致，发病犊牛主要临床症状为腹胀，腹痛，体温升高，精神沉郁，食欲减退， 粪便恶臭、有血丝、气泡或急性腹泻 ，呈大量水样、蛋花样性状，脱水，自体中毒及心力衰竭。 5.4 样本采集 5.4.1 细菌、寄生虫样本 用抚触按摩刺激直肠的方法收集腹泻犊牛粪便样本，若肛门内没有粪便时可采集地面新鲜粪便， 分 别装于无菌 15 mL离心管、 粪便采样袋中， 4 h内送回实验室进行细菌分离， 寄生虫检测样本可存放于2.5% 重铬酸钾中 4 ℃保存。 5.4.2 病毒样本 用抚触按摩刺激直肠的方法收集腹泻犊牛粪便样本，若肛门内没有粪便时无菌采集地面新鲜粪便， 装于含2%～5%双抗的DMEM 培养液中， 4 h内送回实验室 处理。 5.4.3 组织样本 采集腹泻病死犊牛肠道内容物，肠粘膜刮取物及有明显病变的组织脏器（肝、脾、肺、肾、淋巴等） 于无菌采样袋中，记录病牛详情，送实验室检测。 5.5 样本处理 5.5.1 病毒样本 将粪便样 品置于含2%～5%双抗的DMEM培养液中，充分振荡，8000 rpm， 4 ℃离心 15 min，取上清； 将组织样本分解成0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm大小，用无菌剪刀剪碎后，加入保存液（含 2%～5%双抗的DMEM 培养液），研磨成组织悬液反复冻融 3次，8000 rpm ，4 ℃离心15 min ，取上清液， 用0.22 um 微孔滤膜 过滤，分装于2 mL冻存管中，接种细胞或备注名称于 -80 ℃冰箱保存。 5.5.2 细菌样本 水样粪便样本可直接用于接种培养， 半固体粪便样本与灭菌生理盐水按照 1:10的比例制成样品匀浆 后接种培养。组织样本经无菌PBS 洗净后，取深部组织接种培养基。 5.5.3 寄生虫样本 按照GB/T 18647 和GB/T 35942进行。 6 治疗 6.1 治疗原则